| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-31页 |
| ·猪流感病毒概述 | 第17-18页 |
| ·历史上重大流感爆发概况 | 第18-19页 |
| ·流感病毒的分子生物学特征 | 第19-24页 |
| ·流感病毒的形态结构 | 第19页 |
| ·流感病毒基因组的结构及编码蛋白的功能 | 第19-22页 |
| ·流感病毒的复制 | 第22-23页 |
| ·流感病毒的抗原变异 | 第23-24页 |
| ·猪流感病毒疫苗研究进展 | 第24-27页 |
| ·全病毒灭活疫苗 | 第24-25页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第25页 |
| ·亚单位基因工程疫苗 | 第25页 |
| ·基因重组活载体疫苗 | 第25-26页 |
| ·核酸疫苗 | 第26-27页 |
| ·流感通用疫苗的研究进展 | 第27-29页 |
| ·基于 HA 基因的通用疫苗 | 第27-28页 |
| ·基于 M2e 的通用疫苗 | 第28-29页 |
| ·基于 NP 蛋白的通用疫苗 | 第29页 |
| ·研究的目的与意义 | 第29-31页 |
| 第二章 密码子优化的流感病毒 HA 基因 DNA 疫苗在小鼠体内免疫保护效力研究 | 第31-47页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·毒株、细胞和血清 | 第32页 |
| ·菌种和质粒 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·主要溶液配制 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·HA 基因的密码子优化 | 第34页 |
| ·HA 基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的构建 | 第35页 |
| ·质粒 DNA 的大量制备与纯化 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的体外表达检测 | 第36页 |
| ·免疫小鼠及攻毒保护试验 | 第36-37页 |
| ·抗 HA 特异性抗体检测 | 第37页 |
| ·血凝抑制抗体效价检测 | 第37页 |
| ·细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)的检测 | 第37页 |
| ·攻毒后肺病毒含量测定 | 第37-38页 |
| ·肺组织病理切片制作 | 第38页 |
| ·数据统计 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-45页 |
| ·密码子优化的 HA 基因 | 第38页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒 HA 基因的体外表达 | 第39-40页 |
| ·抗 HA 特异性抗体检测 | 第40-41页 |
| ·血凝抑制抗体效价检测 | 第41-42页 |
| ·细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)的检测 | 第42-43页 |
| ·攻毒后肺病毒含量测定 | 第43-44页 |
| ·肺组织病理学观察 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 H1 亚型流感病毒通用疫苗的免疫保护效力研究 | 第47-63页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·序列获得及密码子优化 | 第48页 |
| ·重组质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·间接免疫荧光检测 HA 基因的表达 | 第49页 |
| ·实验动物免疫 | 第49页 |
| ·免疫效果检测 | 第49-50页 |
| ·小鼠攻毒试验 | 第50页 |
| ·免疫保护效力检测 | 第50-51页 |
| ·数据统计分析 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-61页 |
| ·共有序列的获得及优化 | 第51页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组质粒 HA 基因的体外表达 | 第52-53页 |
| ·DNA 疫苗免疫小鼠引起的体液免疫反应 | 第53-56页 |
| ·DNA 疫苗免疫小鼠引起的细胞免疫反应 | 第56-58页 |
| ·小鼠攻毒保护实验 | 第58-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 M2e 合成肽流感通用疫苗的研究 | 第63-75页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·毒株 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·实验动物 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-66页 |
| ·M2e 合成肽的设计 | 第64-65页 |
| ·免疫试验 | 第65页 |
| ·ELISA 检测 | 第65页 |
| ·细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)检测 | 第65页 |
| ·ELISPOT 检测(IL-4 和 IFN-γ) | 第65页 |
| ·H9N2 病毒 EID_(50)及血凝效价滴定 | 第65-66页 |
| ·攻毒试验 | 第66页 |
| ·肺病毒分离及滴定 | 第66页 |
| ·肺组织病理学观察 | 第66页 |
| ·数据统计及分析 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-73页 |
| ·ELISA 抗体水平检测 | 第66-67页 |
| ·血清细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)检测 | 第67-68页 |
| ·ELISPOT 检测 IL-4 和 IFN-γ试验 | 第68-69页 |
| ·H9N2 病毒 EID_(50)及血凝效价滴定 | 第69-70页 |
| ·肺组织病毒 EID_(50)滴定 | 第70-71页 |
| ·小鼠肺脏中病毒含量滴定 | 第71-72页 |
| ·肺组织病理学观察 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 全文结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简历 | 第85页 |