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H1亚型流感病毒通用疫苗的构建及免疫保护效力研究

摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第一章 引言第17-31页
   ·猪流感病毒概述第17-18页
   ·历史上重大流感爆发概况第18-19页
   ·流感病毒的分子生物学特征第19-24页
     ·流感病毒的形态结构第19页
     ·流感病毒基因组的结构及编码蛋白的功能第19-22页
     ·流感病毒的复制第22-23页
     ·流感病毒的抗原变异第23-24页
   ·猪流感病毒疫苗研究进展第24-27页
     ·全病毒灭活疫苗第24-25页
     ·弱毒活疫苗第25页
     ·亚单位基因工程疫苗第25页
     ·基因重组活载体疫苗第25-26页
     ·核酸疫苗第26-27页
   ·流感通用疫苗的研究进展第27-29页
     ·基于 HA 基因的通用疫苗第27-28页
     ·基于 M2e 的通用疫苗第28-29页
     ·基于 NP 蛋白的通用疫苗第29页
   ·研究的目的与意义第29-31页
第二章 密码子优化的流感病毒 HA 基因 DNA 疫苗在小鼠体内免疫保护效力研究第31-47页
   ·材料第32-34页
     ·毒株、细胞和血清第32页
     ·菌种和质粒第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器设备第32-33页
     ·主要溶液配制第33-34页
     ·实验动物第34页
     ·方法第34-38页
     ·HA 基因的密码子优化第34页
     ·HA 基因的扩增第34-35页
     ·重组质粒的构建第35页
     ·质粒 DNA 的大量制备与纯化第35-36页
     ·重组质粒的体外表达检测第36页
     ·免疫小鼠及攻毒保护试验第36-37页
     ·抗 HA 特异性抗体检测第37页
     ·血凝抑制抗体效价检测第37页
     ·细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)的检测第37页
     ·攻毒后肺病毒含量测定第37-38页
     ·肺组织病理切片制作第38页
     ·数据统计第38页
     ·结果第38-45页
     ·密码子优化的 HA 基因第38页
     ·重组质粒的构建与鉴定第38-39页
     ·重组质粒 HA 基因的体外表达第39-40页
     ·抗 HA 特异性抗体检测第40-41页
     ·血凝抑制抗体效价检测第41-42页
     ·细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)的检测第42-43页
     ·攻毒后肺病毒含量测定第43-44页
     ·肺组织病理学观察第44-45页
   ·讨论第45-47页
第三章 H1 亚型流感病毒通用疫苗的免疫保护效力研究第47-63页
   ·材料第48页
   ·方法第48-51页
     ·序列获得及密码子优化第48页
     ·重组质粒的构建第48-49页
     ·间接免疫荧光检测 HA 基因的表达第49页
     ·实验动物免疫第49页
     ·免疫效果检测第49-50页
     ·小鼠攻毒试验第50页
     ·免疫保护效力检测第50-51页
     ·数据统计分析第51页
   ·结果第51-61页
     ·共有序列的获得及优化第51页
     ·重组质粒的构建与鉴定第51-52页
     ·重组质粒 HA 基因的体外表达第52-53页
     ·DNA 疫苗免疫小鼠引起的体液免疫反应第53-56页
     ·DNA 疫苗免疫小鼠引起的细胞免疫反应第56-58页
     ·小鼠攻毒保护实验第58-61页
   ·讨论第61-63页
第四章 M2e 合成肽流感通用疫苗的研究第63-75页
   ·材料第64页
     ·毒株第64页
     ·主要试剂第64页
     ·主要仪器设备第64页
     ·实验动物第64页
   ·方法第64-66页
     ·M2e 合成肽的设计第64-65页
     ·免疫试验第65页
     ·ELISA 检测第65页
     ·细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)检测第65页
     ·ELISPOT 检测(IL-4 和 IFN-γ)第65页
     ·H9N2 病毒 EID_(50)及血凝效价滴定第65-66页
     ·攻毒试验第66页
     ·肺病毒分离及滴定第66页
     ·肺组织病理学观察第66页
     ·数据统计及分析第66页
   ·结果第66-73页
     ·ELISA 抗体水平检测第66-67页
     ·血清细胞因子(IL-4 和 IFN-γ)检测第67-68页
     ·ELISPOT 检测 IL-4 和 IFN-γ试验第68-69页
     ·H9N2 病毒 EID_(50)及血凝效价滴定第69-70页
     ·肺组织病毒 EID_(50)滴定第70-71页
     ·小鼠肺脏中病毒含量滴定第71-72页
     ·肺组织病理学观察第72-73页
   ·讨论第73-75页
第五章 全文结论第75-76页
参考文献第76-84页
致谢第84-85页
作者简历第85页

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