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农杆菌介导的黑麦草丛生芽芽尖的遗传转化及转基因植株再生

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
符号说明第11-12页
第一部分 前言第12-23页
   ·黑麦草的生物学特性第12页
   ·耐盐黑麦草的利用前景及研究意义第12-13页
   ·黑麦草转基因技术研究的进展第13-18页
     ·黑麦草遗传转化的受体系统第13-16页
       ·愈伤组织培养第14-15页
       ·悬浮细胞培养第15页
       ·原生质体培养第15-16页
     ·黑麦草遗传转化方法第16-18页
       ·基因枪轰击法第16-17页
       ·硅碳纤维介导的直接基因转化第17页
       ·原生质体直接吸入方法第17页
       ·农杆菌介导法第17-18页
   ·黑麦草耐盐性研究和耐盐育种第18-21页
     ·黑麦草耐盐性研究第19页
     ·植物耐盐基因工程的策略第19-21页
   ·除草剂抗性基因第21-22页
   ·工作的目的和意义第22-23页
第二部分 材料与方法第23-32页
   ·实验材料第23-26页
     ·植物材料第23-24页
     ·农杆菌第24页
     ·培养基第24-25页
     ·药品、试剂及溶液第25-26页
   ·方法第26-28页
     ·丛生芽体系的建立第26-27页
       ·外植体的获得第26页
       ·丛生芽块的诱导与继代第26-27页
     ·遗传转化第27-28页
       ·除草剂筛选浓度的确定第27页
       ·丛生芽组织块的转化、筛选和植株再生第27-28页
         ·农杆菌的培养第27-28页
         ·黑麦草丛生芽芽尖的浸染第28页
         ·芽尖的抑菌、筛选及植株再生第28页
         ·转基因苗的生根第28页
   ·转化植株的分子生物学检测第28-30页
     ·转化植株的PCR检测第28-30页
     ·转基因植株的PCR-Southern blotting检测第30页
   ·转基因芽和转基因植株的耐盐性分析第30-31页
   ·转基因植株后代的耐盐性检测第31页
   ·数据处理第31-32页
第三部分 结果与分析第32-48页
   ·黑麦草丛生芽体系的建立第32-35页
     ·丛生芽的诱导第32-33页
     ·丛生芽的增殖第33-34页
     ·生根与移栽第34-35页
   ·农杆菌介导的丛生芽芽尖的遗传转化第35-40页
     ·绿磺隆筛选浓度的确定第35-36页
     ·转化植株的获得第36-37页
     ·影响转化频率的因素第37-39页
       ·芽尖的继代培养时间对抗性芽尖频率的影响第37-38页
       ·浸染液浓度对抗性芽尖频率的影响第38-39页
       ·负压处理时间对抗性芽尖频率的影响第39页
     ·转基因植株的PCR和PCR-Southern杂交检测第39-40页
   ·转基因植株及T_1代的耐盐性分析第40-45页
     ·转基因芽和转基因植株的耐盐性分析第40-42页
     ·转基因植株后代的PCR检测和耐盐性分析第42-45页
       ·转基因植株后代的PCR检测第42-43页
       ·转基因植株后代的耐盐性分析第43-45页
   ·离体开花第45-48页
     ·影响离体开花的因素第46-48页
       ·培养基激素组成及材料继代培养时间第46-47页
       ·基因型第47-48页
第四部分 讨论第48-51页
   ·黑麦草高效丛生芽发生的影响因素第48页
   ·黑麦草离体开花的意义第48页
   ·黑麦草高效丛生芽发生的意义第48-49页
   ·农杆菌介导的黑麦草遗传转化体系的优化第49-50页
   ·适宜的选择剂浓度的确定第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
攻读学位期间发表的学术论文第59页

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