摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一部分 前言 | 第12-23页 |
·黑麦草的生物学特性 | 第12页 |
·耐盐黑麦草的利用前景及研究意义 | 第12-13页 |
·黑麦草转基因技术研究的进展 | 第13-18页 |
·黑麦草遗传转化的受体系统 | 第13-16页 |
·愈伤组织培养 | 第14-15页 |
·悬浮细胞培养 | 第15页 |
·原生质体培养 | 第15-16页 |
·黑麦草遗传转化方法 | 第16-18页 |
·基因枪轰击法 | 第16-17页 |
·硅碳纤维介导的直接基因转化 | 第17页 |
·原生质体直接吸入方法 | 第17页 |
·农杆菌介导法 | 第17-18页 |
·黑麦草耐盐性研究和耐盐育种 | 第18-21页 |
·黑麦草耐盐性研究 | 第19页 |
·植物耐盐基因工程的策略 | 第19-21页 |
·除草剂抗性基因 | 第21-22页 |
·工作的目的和意义 | 第22-23页 |
第二部分 材料与方法 | 第23-32页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·植物材料 | 第23-24页 |
·农杆菌 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·药品、试剂及溶液 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-28页 |
·丛生芽体系的建立 | 第26-27页 |
·外植体的获得 | 第26页 |
·丛生芽块的诱导与继代 | 第26-27页 |
·遗传转化 | 第27-28页 |
·除草剂筛选浓度的确定 | 第27页 |
·丛生芽组织块的转化、筛选和植株再生 | 第27-28页 |
·农杆菌的培养 | 第27-28页 |
·黑麦草丛生芽芽尖的浸染 | 第28页 |
·芽尖的抑菌、筛选及植株再生 | 第28页 |
·转基因苗的生根 | 第28页 |
·转化植株的分子生物学检测 | 第28-30页 |
·转化植株的PCR检测 | 第28-30页 |
·转基因植株的PCR-Southern blotting检测 | 第30页 |
·转基因芽和转基因植株的耐盐性分析 | 第30-31页 |
·转基因植株后代的耐盐性检测 | 第31页 |
·数据处理 | 第31-32页 |
第三部分 结果与分析 | 第32-48页 |
·黑麦草丛生芽体系的建立 | 第32-35页 |
·丛生芽的诱导 | 第32-33页 |
·丛生芽的增殖 | 第33-34页 |
·生根与移栽 | 第34-35页 |
·农杆菌介导的丛生芽芽尖的遗传转化 | 第35-40页 |
·绿磺隆筛选浓度的确定 | 第35-36页 |
·转化植株的获得 | 第36-37页 |
·影响转化频率的因素 | 第37-39页 |
·芽尖的继代培养时间对抗性芽尖频率的影响 | 第37-38页 |
·浸染液浓度对抗性芽尖频率的影响 | 第38-39页 |
·负压处理时间对抗性芽尖频率的影响 | 第39页 |
·转基因植株的PCR和PCR-Southern杂交检测 | 第39-40页 |
·转基因植株及T_1代的耐盐性分析 | 第40-45页 |
·转基因芽和转基因植株的耐盐性分析 | 第40-42页 |
·转基因植株后代的PCR检测和耐盐性分析 | 第42-45页 |
·转基因植株后代的PCR检测 | 第42-43页 |
·转基因植株后代的耐盐性分析 | 第43-45页 |
·离体开花 | 第45-48页 |
·影响离体开花的因素 | 第46-48页 |
·培养基激素组成及材料继代培养时间 | 第46-47页 |
·基因型 | 第47-48页 |
第四部分 讨论 | 第48-51页 |
·黑麦草高效丛生芽发生的影响因素 | 第48页 |
·黑麦草离体开花的意义 | 第48页 |
·黑麦草高效丛生芽发生的意义 | 第48-49页 |
·农杆菌介导的黑麦草遗传转化体系的优化 | 第49-50页 |
·适宜的选择剂浓度的确定 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第59页 |