| 摘要 | 第1-7页 |
| 1.引言 | 第7-15页 |
| ·概述 | 第7-8页 |
| ·猪瘟的历史及危害 | 第7页 |
| ·当前我国猪瘟的流行特点 | 第7-8页 |
| ·病原学 | 第8-10页 |
| ·形态结构 | 第8页 |
| ·基因结构 | 第8-10页 |
| ·流行病学 | 第10页 |
| ·诊断 | 第10-13页 |
| ·一般诊断 | 第10页 |
| ·鉴别诊断 | 第10-11页 |
| ·实验室诊断 | 第11-13页 |
| ·相关领域国内外发展技术及趋势 | 第13-15页 |
| ·研究的目的和意义 | 第15页 |
| 2.材料与方法 | 第15-24页 |
| ·材料 | 第15-18页 |
| ·病毒 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-17页 |
| ·溶液的配制 | 第17-18页 |
| ·主要耗材 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-24页 |
| ·组织RNA的提取及反转录 | 第18-19页 |
| ·Digoxigenin标记PCR产物 | 第19-20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第20页 |
| ·基因的克隆及测序 | 第20-21页 |
| ·PCR-ELISA术式 | 第21-22页 |
| ·工作浓度的确定 | 第22-23页 |
| ·特异性试验 | 第23页 |
| ·敏感性试验 | 第23页 |
| ·检出率试验 | 第23页 |
| ·田间试验 | 第23页 |
| ·保存期试验 | 第23-24页 |
| 3.结果 | 第24-32页 |
| ·地高辛标记RT-PCR.产物及克隆测序 | 第24-26页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第24页 |
| ·地高辛标记PCR产物及电泳检测 | 第24-25页 |
| ·克隆测序检测 | 第25-26页 |
| ·PCR-ELISA各种工作浓度的确定 | 第26-32页 |
| ·酶标板均匀性的检测 | 第26页 |
| ·阴阳性判定标准的建立 | 第26页 |
| ·封闭液以及工作浓度的确定 | 第26-27页 |
| ·链亲和素工作浓度的确定 | 第27-28页 |
| ·酶标二抗工作浓度的选择 | 第28页 |
| ·链亲和素和抗地高辛的过氧化物酶最适工作浓度的确定 | 第28-29页 |
| ·包被链亲和素和探针最适工作浓度的确定 | 第29页 |
| ·杂交条件的确定 | 第29-30页 |
| ·阳性样品的制备 | 第30页 |
| ·特异性试验 | 第30页 |
| ·敏感性试验 | 第30-31页 |
| ·检出率试验 | 第31页 |
| ·田间试验 | 第31页 |
| ·保存期试验 | 第31-32页 |
| 4.讨论 | 第32-34页 |
| ·建立RT-PCR-ELISA的理论依据及其应用意义 | 第32页 |
| ·RT-PCR ELISA的优势及应用范围 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR ELISA方法的不足 | 第33页 |
| ·试剂盒的研制 | 第33-34页 |
| ·本试验方法的研究趋势 | 第34页 |
| 5.结论 | 第34-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 英文摘要 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42页 |