中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
前言 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-29页 |
·丹参的研究进展 | 第12-16页 |
·化学成分 | 第12页 |
·清除自由基抗氧化 | 第12-13页 |
·抗血小板聚集、抗血栓 | 第13页 |
·对内皮细胞的保护 | 第13-15页 |
·改善微循环 | 第15页 |
·抗炎与增强免疫功能 | 第15-16页 |
·内皮细胞氧化性损伤机理 | 第16-17页 |
·活性氧的产生 | 第16-17页 |
·活性氧与内皮细胞损伤 | 第17页 |
·活性氧参与的信号转导 | 第17页 |
·内皮细胞黏附性变化及相关的信号转导 | 第17-21页 |
·内皮功能改变与动脉硬化斑块形成 | 第18页 |
·内皮细胞黏附分子与白细胞-内皮细胞黏附过程 | 第18-20页 |
·内皮细胞黏附分子的调节 | 第20-21页 |
·内皮细胞单层通透性变化及相关的信号转导 | 第21-25页 |
·内皮细胞间连接结构 | 第22-23页 |
·调节内皮屏障功能的信号转导途径 | 第23-25页 |
·谷胱甘肽(GSH)参与的细胞信号转导 | 第25-27页 |
·GSH 的结构和分布 | 第25页 |
·GSH 的作用 | 第25-27页 |
·本文研究意义及主要的研究内容 | 第27-29页 |
第二章 丹参提取物对H_2O_2损伤的内皮细胞的保护作用 | 第29-44页 |
·引言 | 第29页 |
·材料与方法 | 第29-36页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·丹参提取物(ESM)制备 | 第30页 |
·人脐静脉内皮细胞(HUVEC)原代培养及传代实验 | 第30-31页 |
·八因子免疫组化法鉴定内皮细胞 | 第31页 |
·MTT 法检测ESM 对细胞存活率的影响 | 第31-32页 |
·乳酸脱氢酶(LDH)渗出率测定 | 第32-33页 |
·膜蛋白变化情况分析 | 第33页 |
·胞内ATP 水平测定 | 第33-34页 |
·胞内超氧化物歧化酶(SOD)水平测定 | 第34-35页 |
·显微镜下细胞形态观察 | 第35-36页 |
·数据的统计学处理 | 第36页 |
·结果与讨论 | 第36-43页 |
·ESM对H_2O_2损伤的内皮细胞存活率的影响 | 第36-39页 |
·ESM对H_2O_2损伤的内皮细胞LDH渗出率的影响 | 第39页 |
·ESM对H_2O_2损伤的内皮细胞膜蛋白的影响 | 第39-40页 |
·ESM对H_2O_2损伤的内皮细胞胞内ATP水平的影响 | 第40-41页 |
·ESM对H_2O_2损伤的内皮细胞形态变化的影响 | 第41-42页 |
·ESM对H_2O_2损伤的内皮细胞胞内SOD水平的影响 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第三章 丹参提取物对TNF-α诱导的内皮细胞黏附分子表达的调节 | 第44-60页 |
·引言 | 第44页 |
·材料与方法 | 第44-50页 |
·主要仪器 | 第44-45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·细胞培养 | 第45页 |
·MTT 法检测TNF-α对细胞存活率的影响 | 第45页 |
·虎红染色法检测内皮细胞与HL-60 细胞的黏附 | 第45-46页 |
·酶联免疫法(细胞ELISA)检测内皮细胞黏附分子表达 | 第46-47页 |
·蛋白质浓度标准曲线绘制及含量测定 | 第47页 |
·免疫印迹法检测内皮细胞黏附分子表达 | 第47-50页 |
·数据的统计学处理 | 第50页 |
·结果与讨论 | 第50-59页 |
·肿瘤坏死因子(TNF-α)对内皮细胞存活率的影响 | 第50-51页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞与HL-60 黏附的影响 | 第51-54页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞黏附分子表达的影响 | 第54-58页 |
·在ESM对内皮细胞黏附分子表达调节中GSH的作用 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第四章 丹参提取物对TNF-α诱导的内皮细胞核转录因子的调节 | 第60-76页 |
·引言 | 第60页 |
·材料与方法 | 第60-65页 |
·主要仪器 | 第60-61页 |
·主要试剂 | 第61页 |
·免疫组化法观察核转录因子(NF-κB)转位 | 第61-62页 |
·蛋白质浓度测定 | 第62页 |
·免疫印迹法检测核转录因子转位 | 第62页 |
·免疫印迹法检测核因子抑制蛋白(IκB)降解 | 第62-63页 |
·荧光分光光度法测定胞内活性氧(ROS)水平 | 第63-64页 |
·DTNB 法检测胞内谷胱甘肽(GSH)含量 | 第64-65页 |
·数据的统计学处理 | 第65页 |
·结果与讨论 | 第65-74页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞核转录因子转位的影响 | 第65-68页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞核因子抑制蛋白降解的影响 | 第68-70页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞胞内活性氧水平的影响 | 第70-72页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞胞内谷胱甘肽含量的影响 | 第72-74页 |
·小结 | 第74-76页 |
第五章 丹参提取物及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞单层通透性的影响 | 第76-88页 |
·引言 | 第76页 |
·材料与方法 | 第76-80页 |
·主要仪器和试剂 | 第76-77页 |
·细胞单层通透性测定 | 第77页 |
·酶联免疫法测定血管内皮生长因子(VEGF)表达 | 第77-79页 |
·蛋白质浓度测定 | 第79页 |
·免疫组化法观察跨膜蛋白分布及细胞间隙形成 | 第79页 |
·免疫印迹法检测跨膜蛋白表达及MAPK 活化状态 | 第79页 |
·数据的统计学处理 | 第79-80页 |
·结果与讨论 | 第80-87页 |
·ESM及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮单层通透性的影响 | 第80-81页 |
·ESM及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞VEGF表达的影响 | 第81-83页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞跨膜蛋白(VE-cadherin)分布及细胞间隙形成的影响 | 第83-84页 |
·ESM 对TNF-α诱导的内皮细胞VE-cadherin 表达的影响 | 第84-85页 |
·ESM及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞MAPK活化的影响 | 第85-87页 |
·小结 | 第87-88页 |
第六章 丹参提取物及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞跨膜蛋白复合物的影响 | 第88-98页 |
·引言 | 第88页 |
·材料与方法 | 第88-91页 |
·主要仪器和试剂 | 第88页 |
·胞内酪氨酸磷酸化水平测定 | 第88-89页 |
·胞内磷酸酯酶活力测定 | 第89页 |
·免疫荧光法检测内皮细胞间连接部位酪氨酸磷酸化状态 | 第89-90页 |
·免疫沉淀法检测VE-cadherin 和β-catenin 磷酸化状态 | 第90页 |
·免疫印迹法法检测内皮细胞β-catenin 与细胞骨架的连接 | 第90页 |
·数据的统计学处理 | 第90-91页 |
·结果与讨论 | 第91-97页 |
·ESM 及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞胞内酪氨酸磷酸化水平及磷酸酯酶活力的影响 | 第91-93页 |
·ESM 及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞间连接部位磷酸化的影响 | 第93-94页 |
·ESM 及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞VE-cadherin 和β-catenin 磷酸化状态的影响 | 第94-96页 |
·ESM 及主要活性成分对TNF-α诱导的内皮细胞β-catenin 与细胞骨架连接的影响 | 第96-97页 |
·小结 | 第97-98页 |
第七章 结论与展望 | 第98-101页 |
·结论 | 第98-99页 |
·本文主要创新点 | 第99-100页 |
·展望 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-113页 |
攻读博士期间发表论文及参加科研情况 | 第113-114页 |
致谢 | 第114页 |