中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-7页 |
1. 前言 | 第7-19页 |
1.1 植酸酶概述 | 第7-9页 |
1.2 植酸酶基因工程菌国内外研究进展 | 第9-10页 |
1.3 毕赤酵母表达系统研究进展 | 第10-15页 |
1.4 提高植酸酶表达量的研究进展 | 第15-18页 |
1.5 存在的问题 | 第18页 |
1.6 本研究的前期工作基础 | 第18-19页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第19页 |
2. 技术路线 | 第19-20页 |
3. 实验材料及仪器 | 第20-23页 |
3.1 菌株及载体 | 第20-21页 |
3.2 主要仪器 | 第21-22页 |
3.3 主要试剂 | 第22页 |
3.4 培养基 | 第22-23页 |
4. 实验方法 | 第23-29页 |
4.1 植酸酶phyA基因的多点突变及克隆载体的构建 | 第23-25页 |
4.2 多点突变phyA基因真核表达载体的构建 | 第25页 |
4.3 多点突变重组质粒的电击转化及转化子的筛选 | 第25-26页 |
4.4 多点突变phyA基因毕赤酵母转化子的鉴定 | 第26-29页 |
4.5 多点突变phyA基因在毕赤酵母中的诱导表达 | 第29页 |
4.6 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第29页 |
4.7 重组毕赤酵母工程菌的遗传稳定性测定 | 第29页 |
5. 结果 | 第29-34页 |
5.1 植酸酶phyA基因的多点突变及克隆载体的构建 | 第29-30页 |
5.2 多点突变phyA基因真核表达载体的构建 | 第30-31页 |
5.3 重组酵母的获得与筛选 | 第31-32页 |
5.4 多点突变phyA基因毕赤酵母转化子的鉴定 | 第32-33页 |
5.5 多点突变PhyA基因在毕赤酵母中的诱导表达 | 第33页 |
5.6 表达产物的SDS-PAGE | 第33-34页 |
5.7 遗传稳定性 | 第34页 |
6. 讨论 | 第34-36页 |
6.1 植酸酶phyA基因的多点突变技术 | 第34-35页 |
6.2 植酸酶基因的改造 | 第35页 |
6.3 进一步提高phyA基因在毕赤酵母中表达量的措施 | 第35-36页 |
7. 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
致谢 | 第42页 |