豆类胰岛素(PA1b)基因克隆、表达及融合蛋白纯化
摘 要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
1 绪 论 | 第10-20页 |
·糖尿病及其治疗概况 | 第10-11页 |
·胰岛素及其受体 | 第11-13页 |
·豆类胰岛素及其受体碱性7S球蛋白 | 第13-17页 |
·豆类胰岛素及受体与胰岛素及受体比较 | 第17-18页 |
·本研究的目的、意义 | 第18-20页 |
2 材料与仪器 | 第20-24页 |
·实验用菌株及质粒 | 第20页 |
·培养基与抗生素 | 第20页 |
·酶类及主要生化试剂 | 第20-21页 |
·引物 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·常用溶液的配制 | 第22-24页 |
3 方法 | 第24-34页 |
·表达载体的构建、筛选及鉴定 | 第24-30页 |
·重组表达质粒表达条件的优化 | 第30页 |
·重组表达质粒在DH5α中的表达 | 第30页 |
·融合蛋白MBP-PA1b的纯化 | 第30-31页 |
·表达产物的酶切 | 第31-32页 |
·蛋白免疫印迹(Western blot)分析 | 第32-34页 |
4 结果 | 第34-41页 |
·PA1b基因的PCR扩增结果 | 第34-35页 |
·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第35-36页 |
·MBP-PA1b融合蛋白可溶性表达条件的优化 | 第36-37页 |
·MBP-PA1b融合蛋白的表达、纯化 | 第37-39页 |
·MBP-PA1b融合蛋白的酶切 | 第39-40页 |
·蛋白免疫印迹(Western blot)分析 | 第40-41页 |
5 讨论 | 第41-46页 |
·表达的意义 | 第41页 |
·PA1b基因的获得 | 第41页 |
·表达载体的选择和可溶性表达 | 第41-43页 |
·融合蛋白的纯化及鉴定 | 第43-44页 |
·酶切结果 | 第44页 |
·关于实验结果的思考 | 第44-46页 |
小 结 | 第46-47页 |
致 谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录1 在攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
附录2 常用电泳技术 | 第54-58页 |
附录3 缩略词 | 第58页 |