豆类胰岛素(PA1b)基因克隆、表达及融合蛋白纯化
| 摘 要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 绪 论 | 第10-20页 |
| ·糖尿病及其治疗概况 | 第10-11页 |
| ·胰岛素及其受体 | 第11-13页 |
| ·豆类胰岛素及其受体碱性7S球蛋白 | 第13-17页 |
| ·豆类胰岛素及受体与胰岛素及受体比较 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与仪器 | 第20-24页 |
| ·实验用菌株及质粒 | 第20页 |
| ·培养基与抗生素 | 第20页 |
| ·酶类及主要生化试剂 | 第20-21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·常用溶液的配制 | 第22-24页 |
| 3 方法 | 第24-34页 |
| ·表达载体的构建、筛选及鉴定 | 第24-30页 |
| ·重组表达质粒表达条件的优化 | 第30页 |
| ·重组表达质粒在DH5α中的表达 | 第30页 |
| ·融合蛋白MBP-PA1b的纯化 | 第30-31页 |
| ·表达产物的酶切 | 第31-32页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot)分析 | 第32-34页 |
| 4 结果 | 第34-41页 |
| ·PA1b基因的PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| ·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·MBP-PA1b融合蛋白可溶性表达条件的优化 | 第36-37页 |
| ·MBP-PA1b融合蛋白的表达、纯化 | 第37-39页 |
| ·MBP-PA1b融合蛋白的酶切 | 第39-40页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot)分析 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-46页 |
| ·表达的意义 | 第41页 |
| ·PA1b基因的获得 | 第41页 |
| ·表达载体的选择和可溶性表达 | 第41-43页 |
| ·融合蛋白的纯化及鉴定 | 第43-44页 |
| ·酶切结果 | 第44页 |
| ·关于实验结果的思考 | 第44-46页 |
| 小 结 | 第46-47页 |
| 致 谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录1 在攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 附录2 常用电泳技术 | 第54-58页 |
| 附录3 缩略词 | 第58页 |