| 第一章 绪 论 | 第1-24页 |
| ·引言 | 第9-10页 |
| ·转基因载体 | 第10-22页 |
| ·非病毒载体 | 第10-16页 |
| ·裸DNA载体 | 第10-11页 |
| ·脂质体/DNA复合物 | 第11-13页 |
| ·阳离子高聚物 | 第13-15页 |
| ·壳聚糖载体 | 第15-16页 |
| ·壳聚糖基非病毒载体 | 第16-20页 |
| ·脱氧胆酸改性的壳聚糖(DAMC)载体 | 第16-17页 |
| ·十二烷基壳聚糖载体 | 第17-18页 |
| ·季铵盐壳聚糖载体 | 第18页 |
| ·半乳糖改性壳聚糖载体 | 第18-19页 |
| ·运铁蛋白修饰的壳聚糖的载体 | 第19-20页 |
| ·其它非病毒载体 | 第20-22页 |
| ·树状高分子载体 | 第20-21页 |
| ·明胶载体 | 第21页 |
| ·脂质/多聚物/DNA复合体 | 第21页 |
| ·利用微生物或其亚成分构建的载体 | 第21-22页 |
| ·论文工作的提出 | 第22-24页 |
| 第二章 壳聚糖及其烷基化衍生物/DNA复合物的研究 | 第24-49页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验部分 | 第24-27页 |
| ·原料 | 第24-25页 |
| ·复合物的表征 | 第25-27页 |
| ·红外光谱 | 第25页 |
| ·核磁谱图(NMR) | 第25页 |
| ·圆二色谱(CD) | 第25页 |
| ·荧光光谱 | 第25-26页 |
| ·原子力显微镜 | 第26页 |
| ·差示扫描量热法(DSC) | 第26-27页 |
| ·复合物的电泳 | 第27页 |
| ·复合物的DNase降解性测试 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-48页 |
| ·红外光谱分析 | 第27-29页 |
| ·31P NMR谱 | 第29-30页 |
| ·复合物的圆二色谱和荧光光谱 | 第30-33页 |
| ·CS/DNA复合物的AFM观测 | 第33-34页 |
| ·壳聚糖及烷基化壳聚糖与DPPC的相互作用 | 第34-46页 |
| ·原子力显微镜的观测 | 第34-38页 |
| ·差示扫描量热法检测 | 第38-46页 |
| ·电泳分析 | 第46-47页 |
| ·复合物的DNase降解分析 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第三章 壳聚糖及烷基化壳聚糖介导基因转染的研究 | 第49-59页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验部分 | 第49-56页 |
| ·实验试剂 | 第49-50页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| ·菌体的培养与质粒的提取纯化 | 第50-52页 |
| ·试剂配制 | 第50页 |
| ·操作 | 第50-51页 |
| ·质粒DNA的大量提取:(26－125ml菌液) | 第51-52页 |
| ·C2C12细胞的培养 | 第52-54页 |
| ·培养用液的制备 | 第52-53页 |
| ·操作 | 第53-54页 |
| ·质粒pcDNA3.1/CAT体外转染C2C12细胞 | 第54-56页 |
| ·壳聚糖及烷基化壳聚糖/DNA复合物的形成 | 第54页 |
| ·细胞转染 | 第54-55页 |
| ·细胞转染率的测定 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-58页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| 第四章 转IFG-Ⅰ基因促细胞增殖作用的研究 | 第59-73页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·实验部分 | 第59-66页 |
| ·实验试剂 | 第59-60页 |
| ·实验仪器 | 第60-61页 |
| ·重组哺乳动物细胞表达载体pTracer-IGF-Ⅰ的构建 | 第61-65页 |
| ·酶切反应 | 第62页 |
| ·从凝胶上分离回收所需DNA片断 | 第62-63页 |
| ·连接反应 | 第63页 |
| ·连接后，转化感受态大肠杆菌 | 第63-65页 |
| ·重组质粒pTracer-IGF-Ⅰ体外转染C2C12细胞 | 第65页 |
| ·LipofectamineTM2000试剂包裹质粒DNA载体的形成 | 第65页 |
| ·重组质粒pTracer-IGF-Ⅰ体外转染C2C12细胞 | 第65页 |
| ·稳定表达细胞系的筛选及克隆化 | 第65-66页 |
| ·抗生素浓度的选择 | 第65-66页 |
| ·稳定表达细胞系的筛选 | 第66页 |
| ·转IGF -Ⅰ基因对细胞增殖的影响 | 第66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-73页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第66-68页 |
| ·GFP在细胞中的表达情况 | 第68-69页 |
| ·不同浓度抗生素对细胞的影响 | 第69-70页 |
| ·不同组别细胞增殖情况 | 第70-73页 |
| 第五章 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 攻读硕士学位期间完成的论文 | 第79-80页 |
| 致 谢 | 第80页 |
