致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-30页 |
1 抗微生物的筛选及生物防治 | 第14-18页 |
·小霉属真菌 | 第14页 |
·芽孢杆菌属 | 第14-15页 |
·假单胞菌属 | 第15页 |
·阴沟肠杆菌 | 第15-18页 |
2 细菌拮抗物质及其基因的研究 | 第18-23页 |
·Andrimid | 第18-19页 |
·P.agglomerans产生的其它拮抗物质 | 第19-21页 |
·芽孢杆菌属细菌产生的拮抗物质 | 第21-22页 |
·假单孢菌属产生的拮抗物质 | 第22-23页 |
3 基于PCR技术研究未知基因-染色体步行(Chromosome Walking) | 第23-28页 |
·反向PCR(IPCR) | 第24页 |
·随机引物PCR(RP-PCR) | 第24-25页 |
·连接介导PCR(LM-PCR) | 第25-27页 |
·染色体小结 | 第27-28页 |
4 本研究的工作基础、目的、意义和主要内容 | 第28-30页 |
·本研究的工作基础 | 第28页 |
·本研究的目的、意义和主要内容 | 第28-30页 |
第二章 阴沟肠杆菌拮抗活性相关片段的克隆与分析 | 第30-49页 |
1 材料 | 第30-31页 |
2 方法 | 第31-37页 |
3 结果 | 第37-47页 |
·质粒pTLF的F片段测序 | 第37页 |
·质粒pTLB的B片段测序 | 第37页 |
·F片段外围序列的染色体步行 | 第37-39页 |
·B片段染色体步行 | 第39-40页 |
·Fcontig序列的拼接及同源性比较分析 | 第40-43页 |
·Bcontig序列的拼接及同源性比较分析 | 第43-46页 |
·Tn5插入破坏的anrF基因和AnrB片段的PCR扩增验证 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
第三章 阴沟肠杆菌B8拮抗相关基因簇的克隆 | 第49-64页 |
1 材料 | 第49-50页 |
2 方法 | 第50-53页 |
3 结果 | 第53-60页 |
·12.5kb片段的PCR扩增及PCR产物的酶切 | 第53页 |
·12.5kb片段的分段克隆和测序 | 第53-57页 |
·B8拮抗基因簇3’端的克隆和测序 | 第57-58页 |
·'admO’和'admT'基因之间8.3kb片段的PCR扩增 | 第58-59页 |
·B8拮抗相关基因簇与adrimid生物合成基因簇部分基因的比较分析 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-64页 |
第四章 阴沟肠杆菌B8拮抗相关基因簇的克隆 | 第64-76页 |
1 材料 | 第64-65页 |
2 方法 | 第65-68页 |
3 结果 | 第68-73页 |
·B8、B8B和B8F菌株的药敏试验 | 第68-70页 |
·Gen~r基因的扩增与克隆 | 第70页 |
·基因互补质粒pMD-FG的构建 | 第70-71页 |
·#基因敲除质粒pMD-BG的构建及QCBG片段的扩增 | 第71-72页 |
·电击转化重组子的筛选和鉴定 | 第72-73页 |
·电击转化重组子的拮抗活性检测 | 第73页 |
4 讨论 | 第73-76页 |
本研究的主要结论和创新点 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
攻读硕士学位期间发表和录用的学术论文 | 第83页 |