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食管上皮细胞的COX-2表达、调控与细胞永生化及丝裂霉素C抗性

Ⅰ 综述:非甾体类抗炎药与消化道肿瘤第1-24页
 Ⅰ 1 摘要:非甾体类抗炎药与消化道肿瘤第12页
 Ⅰ 2 引言第12-13页
 Ⅰ 3 NSAIDs对结肠癌的预防作用第13-14页
 Ⅰ 4 NSAIDs对食管癌的预防作用第14-15页
  Ⅰ 4.1 对食管鳞癌的预防作用第14页
  Ⅰ 4.2 对食管腺癌的预防作用第14-15页
  Ⅰ 4.3 对贲门腺癌的预防作用第15页
 Ⅰ 5 NSAIDs对其他肿瘤的预防作用第15页
 Ⅰ 6 COX-2与NSAIDs的抗肿瘤作用第15-17页
 Ⅰ 7 小结第17页
 Ⅰ 8 参考文献第17-24页
Ⅱ 全文摘要第24-33页
 Ⅱ 1 中文摘要:食管上皮细胞的COX-2表达、调控与细胞永生化及丝裂霉素C抗性第24-27页
  Ⅱ 1.1 目的与方法第24页
  Ⅱ 1.2 主要结果与结论第24-27页
 Ⅱ 2 ABSTRACT:THE EXPRESSION AND REGULATION OF COX-2 IN ESOPHAGEAL EPITHELIAL CELLS AND ITS FUNCTION IN IMMORTALIZATION AND MITOMYCIN C RESISTANCE第27-33页
  Ⅱ 2.1 Aims and methods第27-28页
  Ⅱ 2.2 Key results and conclusions第28-33页
Ⅲ 研究背景第33-37页
 Ⅲ 1 国内外研究现状第33页
 Ⅲ 2 河南高发区食管癌预防的探索第33页
 Ⅲ 3 PGE_2、COX与食管癌的预防第33-34页
 Ⅲ 4 COX-2抑制剂与其他NSAIDs的抗肿瘤作用第34-35页
 Ⅲ 5 COX-2表达调控机制的探讨第35页
 Ⅲ 6 研究目的与手段第35-37页
Ⅳ 食管癌组织中COX-2的表达及其意义第37-43页
 Ⅳ 1 中英文摘要第37-38页
  Ⅳ 1.1 摘要:食管癌组织中COX-2的表达及其意义第37页
  Ⅳ 1.2 ABSTRACT:Increased expression of COX-2 protein in human esophageal carcinoma第37-38页
 Ⅳ 2 引言第38-39页
 Ⅳ 3 材料和方法第39-40页
  Ⅳ 3.1 研究材料第39页
  Ⅳ 3.2 免疫组织化学检查第39-40页
 Ⅳ 4 结果第40-41页
  Ⅳ 4.1 COX-2在ESC中的表达第40页
  Ⅳ 4.2 COX-2表达与ESC恶性程度及淋巴结转移的关系第40-41页
 Ⅳ 5 讨论第41-43页
Ⅴ 血清浓度对不同食管癌细胞株COX-2表达和细胞生长的影响第43-60页
 Ⅴ 1 中英文摘要第43-45页
  Ⅴ 1.1 摘要:血清浓度对不同食管癌细胞株COX-2表达和细胞生长的影响第43-44页
  Ⅴ 1.2 ABSTRACT:Effect of serum concentrations on COX-2 expression and cell growth in two EC cell lines第44-45页
 Ⅴ 2 引言第45-46页
 Ⅴ 3 材料与方法第46-50页
  Ⅴ 3.1 细胞准备第46页
  Ⅴ 3.2 TGF-β受体在食管癌细胞株EC-109和EC-18的表达第46-48页
  Ⅴ 3.3 食管癌细胞的梯度浓度血清培养第48页
  Ⅴ 3.4 MTT法分析食管癌细胞生长第48页
  Ⅴ 3.5 梯度血清浓度培养下食管癌细胞的COX-2 mRNA表达第48-50页
  Ⅴ 3.6 梯度血清浓度培养下食管癌细胞的COX-2蛋白质表达第50页
  Ⅴ 3.7 统计学处理第50页
 Ⅴ 4 结果第50-52页
  Ⅴ 4.1 TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的Western Blotting检测第50页
  Ⅴ 4.2 两种食管癌细胞在不同血清浓度条件下的生长情况第50-51页
  Ⅴ 4.3 COX-2的mRNA和蛋白表达第51-52页
 Ⅴ 5 讨论第52-60页
Ⅵ TGF-β1与成纤维细胞的相互作用影响食管癌细胞COX-2表达第60-72页
 Ⅵ 1 中英文摘要第60-62页
  Ⅵ 1.1 摘要:TGF-β_1与成纤维细胞的相互作用影响食管癌细胞COX-2表达第60-61页
  Ⅵ 1.2 ABSTRACT:Expression of COX-2 in EC cells was affected by the interaction between TGF-β_1 and fibroblast第61-62页
 Ⅵ 2 引言第62-63页
 Ⅵ 3 材料与方法第63-65页
  Ⅵ 3.1 细胞准备第63页
  Ⅵ 3.2 TGF-β受体在食管癌细胞株EC-109和EC-18的表达第63页
  Ⅵ 3.3 条件培养基FS液和FSTB液的制备第63页
  Ⅵ 3.4 实验分组第63页
  Ⅵ 3.5 MTT法检测不同浓度TGF-β_1对食管癌细胞生长的影响第63-64页
  Ⅵ 3.6 总RNA抽提及cDNA第1链合成第64页
  Ⅵ 3.7 PCR反应第64页
  Ⅵ 3.8 蛋白质的抽提与浓度测定第64页
  Ⅵ 3.9 Western Blotting分析第64页
  Ⅵ 3.10 统计学处理第64-65页
 Ⅵ 4 结果第65-66页
  Ⅵ 4.1 TGF-βⅠ、Ⅱ受体的Western Blotting检测第65页
  Ⅵ 4.2 MTT方法检测不同浓度TGF-β_1对食管癌细胞生长的影响第65页
  Ⅵ 4.3 不同条件培养基对EC-18和ECa-109细胞COX-2表达的影响第65-66页
 Ⅵ 5 讨论第66-72页
Ⅶ 食管上皮细胞的永生化与COX-2表达调控第72-109页
 Ⅶ 1 中英文摘要第72-75页
  Ⅶ 1.1 摘要:食管上皮细胞的永生化与COX-2表达调控第72-73页
  Ⅶ 1.2 ABSTRACT:Esophageal epithelial cell immortalization and the regulation of COX-2 expression第73-75页
 Ⅶ 2 引言第75-77页
 Ⅶ 3 材料与方法第77-84页
  Ⅶ 3.1 原代食管上皮培养的取材第77页
  Ⅶ 3.2 食管上皮细胞原代培养的建立第77-78页
  Ⅶ 3.3 不同培养条件下正常食管上皮与食管癌细胞COX-2表达的检测第78页
  Ⅶ 3.4 感受态大肠杆菌的制备第78-79页
  Ⅶ 3.5 HPV-16-E_6E_7逆转录病毒载体来源第79页
  Ⅶ 3.6 细菌的转化第79页
  Ⅶ 3.7 重组质粒载体的筛选第79页
  Ⅶ 3.8 小量质粒DNA的提取第79-80页
  Ⅶ 3.9 pLXSN-E_6E_7及pLXSN的限制性酶切反应第80页
  Ⅶ 3.10 质粒DNA的大量制备和鉴定第80页
  Ⅶ 3.11 脂质体介导pLXSN-E_6E_7和pLXSN转染病毒包装细胞第80-81页
  Ⅶ 3.12 转染细胞的筛选第81页
  Ⅶ 3.13 病毒滴度的测定第81页
  Ⅶ 3.14 pLXSN-E_6E_7、pLXSN转染正常食管上皮细胞第81页
  Ⅶ 3.15 NIH hTERT转染第81-82页
  Ⅶ 3.16 总RNA的抽提第82页
  Ⅶ 3.17 总RNA含量及纯度检测第82页
  Ⅶ 3.18 总RNA完整性检测第82页
  Ⅶ 3.19 cDNA第1链的合成第82页
  Ⅶ 3.20 转染细胞HPV-16-E_6和hTERT的mRNA检测第82页
  Ⅶ 3.21 转录PCR产物的检测第82-83页
  Ⅶ 3.22 蛋白质的抽提第83页
  Ⅶ 3.23 蛋白浓度测定第83页
  Ⅶ 3.24 NECA_6及转染HPV-16-E_6E_7(NECA_6-E_6E_7),HPV-16-E_6E_7-hTERT(NECA_6-E_6E_7-hTERT)后COX-2表达与VEGF、Id-1、Bcl-2、P53、Rb、和P16等基因表达的关系第83页
  Ⅶ 3.25 统计学处理第83-84页
 Ⅶ 4 结果第84-86页
  Ⅶ 4.1 食管上皮细胞原代培养的建立第84页
  Ⅶ 4.2 不同培养条件下正常食管上皮与食管癌细胞COX-2表达第84页
  Ⅶ 4.3 pLXSNE_6E_7及pLXSN的限制性酶切第84页
  Ⅶ 4.4 转染细胞HPV-16-E_6和hTERT的mRNA检测第84页
  Ⅶ 4.5 COX-2和Id-1表达第84-85页
  Ⅶ 4.6 VEGF表达第85页
  Ⅶ 4.7 P16表达第85页
  Ⅶ 4.8 P53表达第85-86页
  Ⅶ 4.9 Rb表达第86页
  Ⅶ 4.10 Bcl-2表达第86页
 Ⅶ 5 讨论第86-109页
  Ⅶ 5.1 永生化食管上皮的体外培养条件选择与COX-2表达第86-87页
  Ⅶ 5.2 HPV-16-E_6E_7与食管上皮永生化第87-88页
  Ⅶ 5.3 hTERT转染与食管上皮永生化第88-89页
  Ⅶ 5.4 P53与食管上皮永生化及COX-2表达第89-90页
  Ⅶ 5.5 Rb与细胞永生化及COX-2表达第90-91页
  Ⅶ 5.6 P16与食管上皮永生化及COX-2表达第91页
  Ⅶ 5.7 Id-1与食管上皮永生化及COX-2表达第91-92页
  Ⅶ 5.8 Bcl-2与食管上皮永生化及COX-2表达第92页
  Ⅶ 5.9 VEGF与食管上皮永生化及COX-2表达第92-109页
Ⅷ COX-2表达与食管癌细胞的丝裂霉素C抗性有关第109-128页
 Ⅷ 1 中英文摘要第109-111页
  Ⅷ 1.1 摘要:COX-2表达与食管癌细胞的丝裂霉素C抗性有关第109页
  Ⅷ 1.2 ABSTRACT:The alterations of COX-2 expression were associated with the anti-apoptosis effect on EC cells treated by mitomycin C第109-111页
 Ⅷ 2 引言第111页
 Ⅷ 3 材料与方法第111-113页
  Ⅷ 3.1 细胞培养第111页
  Ⅷ 3.2 MTT法检测细胞数量第111-112页
  Ⅷ 3.3 细胞周期分析第112页
  Ⅷ 3.4 总RNA的准备第112页
  Ⅷ 3.5 cDNA第1链的合成第112页
  Ⅷ 3.6 PCR反应第112页
  Ⅷ 3.7 蛋白质的抽提与浓度测定第112页
  Ⅷ 3.8 Western Blotting分析第112-113页
  Ⅷ 3.9 统计学处理第113页
 Ⅷ 4 结果第113-115页
  Ⅷ 4.1 细胞生长检测第113页
  Ⅷ 4.2 细胞周期分析第113-114页
  Ⅷ 4.3 MMC处理与COX-2表达第114页
  Ⅷ 4.4 MMC处理与Bcl-2蛋白表达第114页
  Ⅷ 4.5 MMC处理与P53蛋白表达第114页
  Ⅷ 4.6 MMC处理与Rb蛋白表达第114-115页
  Ⅷ 4.7 单因素方差分析第115页
  Ⅷ 4.8 距离相关分析第115页
 Ⅷ 5 讨论第115-128页
Ⅸ 参考文献第128-143页
Ⅹ 致谢第143-145页
Ⅹ Ⅰ 附录第145-149页
 Ⅹ Ⅰ.1 博士研究生学习期间发表的论著一览第145-147页
 Ⅹ Ⅰ.2 博士研究生学习期间参加学术会议发表的文摘一览第147-148页
 Ⅹ Ⅰ.3 博士研究生学习期间作为第一负责人申报的科研课题一览第148页
 Ⅹ Ⅰ.4 博士研究生学习期间作为主要负责人申报的科研课题一览第148页
 Ⅹ Ⅰ.5 博士研究生学习期间承担理论大课情况一览第148页
 Ⅹ Ⅰ.6 博士研究生学习期间完成的译作一览第148页
 Ⅹ Ⅰ.7 博士研究生学习期间参与专著编纂情况第148-149页
 Ⅹ Ⅰ.8 博士研究生学习期间获得学术荣誉情况第149页
 Ⅹ Ⅰ.9 博士研究生学习期间申报科研成果情况第149页
 Ⅹ Ⅰ.10 博士研究生学习期间作学术讲演题录第149页
 Ⅹ Ⅰ.11 博士研究生学习期间承担社会工作情况第149页

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