| 第一章 前言 | 第1-23页 |
| 1 水稻遗传转化的研究进展 | 第7-10页 |
| ·水稻遗传转化的方法及其研究进展 | 第7-9页 |
| ·PEG法 | 第7页 |
| ·电激法 | 第7-8页 |
| ·基因枪法 | 第8页 |
| ·农杆菌介导法 | 第8-9页 |
| ·影响农杆菌介导的水稻转化的因素 | 第9-10页 |
| ·选择活跃分裂的功能细胞 | 第9页 |
| ·菌株的选择与质粒的构建 | 第9-10页 |
| ·酚类化合物的影响 | 第10页 |
| ·培养基 | 第10页 |
| 2 植物抗病分子机制及抗病基因工程 | 第10-18页 |
| ·植物抗病反应的机制 | 第11-12页 |
| ·植物抗病基因的克隆及结构、功能 | 第12-15页 |
| ·植物抗病过程中的信号传导 | 第15-17页 |
| ·植物抗病基因工程 | 第17-18页 |
| 3 植物系统获得抗性 | 第18-22页 |
| ·影响SA合成的突变体 | 第18-19页 |
| ·通过NPR1依赖性和NPR1非依赖性途径的SA信号 | 第19-20页 |
| ·影响SAR信号传导的其它突变体 | 第20页 |
| ·NPR1功能分析 | 第20-21页 |
| ·SAR相关基因的表达 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-38页 |
| 1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2 水稻品种 | 第23页 |
| 3 培养基 | 第23-25页 |
| 4 菌株培养条件及保存 | 第25-26页 |
| 5 抗生素及其使用浓度 | 第26页 |
| 6 常用溶液及缓冲液 | 第26-27页 |
| 7 质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·快速碱裂解少量质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第28页 |
| 8 DNA沉淀 | 第28页 |
| 9 DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第28-29页 |
| 10 植物总DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·植物总DNA的大量提取 | 第29页 |
| ·植物总DNA的微量提取 | 第29-30页 |
| 11 DNA的酶切、电泳及DNA片段浓度大小测算 | 第30页 |
| ·DNA的酶切 | 第30页 |
| ·电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第30页 |
| 12 DNA片段的回收 | 第30-31页 |
| ·低熔点琼脂糖凝胶法 | 第30-31页 |
| ·电透析法回收DNA片段 | 第31页 |
| 13 三亲本接合 | 第31-32页 |
| 14 水稻的遗传转化过程 | 第32-34页 |
| ·组织培养和转化的培养基 | 第32-33页 |
| ·水稻种子的灭菌 | 第33页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第33页 |
| ·水稻转化的基本路线 | 第33-34页 |
| 15 GUS组织化学检测 | 第34页 |
| 16 PCR | 第34-35页 |
| 17 DNA测序 | 第35页 |
| 18 DNA-DNA杂交 | 第35-37页 |
| ·Southern转移 | 第35页 |
| ·探针标记-随机引物标记 | 第35-36页 |
| ·Southern杂交 | 第36-37页 |
| 19 水稻抗病性检测 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-57页 |
| 1 根癌农杆菌介导的水稻桂99和TP309转化的主要条件的确定 | 第38-40页 |
| ·2，4-D诱导桂99成熟胚形成愈伤组织的最佳浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·桂99和TP309愈伤组织分化培养基的确立 | 第39-40页 |
| ·潮霉素筛选浓度的确定 | 第40页 |
| 2 桂99RNPR1基因对水稻桂99和TP309的转化及再生 | 第40-44页 |
| ·转化受体的制备 | 第40-41页 |
| ·对水稻的转化和筛选 | 第41-43页 |
| ·拟转基因植株的获得 | 第43-44页 |
| 3 GUS组织化学检测 | 第44-46页 |
| 4 转化效率分析 | 第46页 |
| 5 T0代植株的分子鉴定 | 第46-50页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第46-49页 |
| ·T_0代植株的PCR产物测序分析 | 第49-50页 |
| 6 T0代转基因植株的抗病性鉴定 | 第50-53页 |
| 7 T1代遗传分析 | 第53-55页 |
| 8 T1代植株的分子鉴定 | 第55-57页 |
| ·T1代植株PCR-Southern | 第55页 |
| ·T1代植株总DNA-Southern杂交分析 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
