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胚乳中不表达基因组片段的分离及磷代谢的品种差异分析

目录第1-4页
中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
文献综述第8-23页
 1 植物磷高效的生理生化及分子生物学基础第8-14页
   ·磷元素在植物生长中的重要作用第8页
   ·磷肥与环境的矛盾第8-9页
   ·真核生物中低磷诱导反应的研究第9-10页
   ·植物磷高效的分子生物学研究进展第10-14页
 2 植物功能基因组学中基因表达的研究第14-20页
   ·生物芯片技术第14-16页
   ·cDNA点阵技术第16-17页
   ·生物信息学第17-20页
 3 差异表达克隆的分离第20-23页
   ·cDNA测序筛选法第20页
   ·示差筛选法第20-21页
   ·扣除杂交技术第21页
   ·扣除扩增筛选和代表性差式分析第21-22页
   ·生物芯片技术第22-23页
第一部分 利用高密度cDNA点阵技术筛选在穗中特异不表达的启动子第23-31页
 1 实验材料和实验方法第23页
   ·水稻材料第23页
   ·平衡化MH63全生育期cDNA文库第23页
 2 实验方法第23-25页
   ·材料第23页
   ·总RNA的抽提第23页
   ·cDNA点阵膜的制备和cDNA点阵杂交第23-24页
   ·Northern Blot杂交分析第24页
   ·差异表达克隆的测序第24页
   ·58N BAC文库筛选及BAC阳性片段的确定第24页
   ·58N BAC阳性克隆Shotgun测序并进行启动子序列的预测第24-25页
 3 结果与分析第25-29页
   ·高密度cDNA点阵杂交的结果和分析第25-28页
   ·58N BAC文库筛选及BAC阳性片段的确定第28页
   ·用GENESCAN和GeneFinder进行启动子序列的预测第28-29页
   ·转基因验证第29页
 4 讨论第29-31页
第二部分 利用cDNA芯片技术进行水稻在低磷胁迫条件下基因表达的分析第31-63页
 1 材料和方法第31-34页
   ·细胞悬浮材料的获得与胁迫处理第31页
   ·植株材料的培养和处理第31-32页
   ·总RNA及mRNA的抽提第32页
   ·低磷胁迫消减杂交文库的构建第32页
   ·消减杂交文库的测序第32页
   ·DNA芯片第32-34页
   ·序列测定和Northern验证第34页
 2 实验结果第34-48页
   ·植株胁迫条件的建立第34-35页
   ·芯片杂交及分析结果第35-48页
 3 分析和讨论第48-58页
   ·主要代谢反应第48-49页
   ·物质的运输第49-50页
   ·氨基酸代谢及氧化还原反应第50页
   ·复制,转录,翻译和修饰第50-51页
   ·其它第51页
   ·胁迫后基因表达的变化第51-56页
   ·消减杂交文库的序列整理第56-58页
 4 代谢途径的推测第58-60页
 5 芯片技术与消减杂交技术的比较第60-63页
参考文献第63-73页
附录第73-81页
配方第81-82页
致谢第82页

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