目录 | 第1-4页 |
中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
文献综述 | 第8-23页 |
1 植物磷高效的生理生化及分子生物学基础 | 第8-14页 |
·磷元素在植物生长中的重要作用 | 第8页 |
·磷肥与环境的矛盾 | 第8-9页 |
·真核生物中低磷诱导反应的研究 | 第9-10页 |
·植物磷高效的分子生物学研究进展 | 第10-14页 |
2 植物功能基因组学中基因表达的研究 | 第14-20页 |
·生物芯片技术 | 第14-16页 |
·cDNA点阵技术 | 第16-17页 |
·生物信息学 | 第17-20页 |
3 差异表达克隆的分离 | 第20-23页 |
·cDNA测序筛选法 | 第20页 |
·示差筛选法 | 第20-21页 |
·扣除杂交技术 | 第21页 |
·扣除扩增筛选和代表性差式分析 | 第21-22页 |
·生物芯片技术 | 第22-23页 |
第一部分 利用高密度cDNA点阵技术筛选在穗中特异不表达的启动子 | 第23-31页 |
1 实验材料和实验方法 | 第23页 |
·水稻材料 | 第23页 |
·平衡化MH63全生育期cDNA文库 | 第23页 |
2 实验方法 | 第23-25页 |
·材料 | 第23页 |
·总RNA的抽提 | 第23页 |
·cDNA点阵膜的制备和cDNA点阵杂交 | 第23-24页 |
·Northern Blot杂交分析 | 第24页 |
·差异表达克隆的测序 | 第24页 |
·58N BAC文库筛选及BAC阳性片段的确定 | 第24页 |
·58N BAC阳性克隆Shotgun测序并进行启动子序列的预测 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-29页 |
·高密度cDNA点阵杂交的结果和分析 | 第25-28页 |
·58N BAC文库筛选及BAC阳性片段的确定 | 第28页 |
·用GENESCAN和GeneFinder进行启动子序列的预测 | 第28-29页 |
·转基因验证 | 第29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
第二部分 利用cDNA芯片技术进行水稻在低磷胁迫条件下基因表达的分析 | 第31-63页 |
1 材料和方法 | 第31-34页 |
·细胞悬浮材料的获得与胁迫处理 | 第31页 |
·植株材料的培养和处理 | 第31-32页 |
·总RNA及mRNA的抽提 | 第32页 |
·低磷胁迫消减杂交文库的构建 | 第32页 |
·消减杂交文库的测序 | 第32页 |
·DNA芯片 | 第32-34页 |
·序列测定和Northern验证 | 第34页 |
2 实验结果 | 第34-48页 |
·植株胁迫条件的建立 | 第34-35页 |
·芯片杂交及分析结果 | 第35-48页 |
3 分析和讨论 | 第48-58页 |
·主要代谢反应 | 第48-49页 |
·物质的运输 | 第49-50页 |
·氨基酸代谢及氧化还原反应 | 第50页 |
·复制,转录,翻译和修饰 | 第50-51页 |
·其它 | 第51页 |
·胁迫后基因表达的变化 | 第51-56页 |
·消减杂交文库的序列整理 | 第56-58页 |
4 代谢途径的推测 | 第58-60页 |
5 芯片技术与消减杂交技术的比较 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-73页 |
附录 | 第73-81页 |
配方 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |