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叶锈菌与TcLr19小麦互作体系中2个病程相关蛋白基因的克隆及分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-16页
   ·植物病程相关蛋白基因的研究进展第9-12页
     ·植物病程相关蛋白的定义及分类第9-10页
     ·病程相关蛋白与植物抗性第10-11页
     ·病程相关蛋白1 基因第11-12页
     ·β-1,3-葡聚糖酶基因第12页
   ·实时荧光定量PCR 研究进展及其在植物上的应用第12-13页
   ·小麦遗传转化方法第13-15页
     ·基因枪法第13-14页
     ·农杆菌介导法第14页
     ·花粉管通道法第14-15页
   ·研究的目的及意义第15-16页
2 材料和方法第16-36页
   ·材料、试剂及仪器第16-18页
     ·材料第16-18页
     ·试剂第18页
     ·仪器第18页
   ·实验方法第18-36页
     ·小麦抗叶锈病近等基因系TcLr19 及感病亲本Thatcher 接种试验第18-19页
     ·小麦叶片总RNA 的提取及cDNA 第一链的合成第19-20页
     ·TcLr19 小麦病程相关蛋白基因片段的分离第20-23页
     ·病程相关蛋白基因TcLr19PR1、TcLr19Glu 全长cDNA 的获得第23-25页
     ·TcLr19 小麦病程相关蛋白基因的半定量分析第25-26页
     ·TcLr19 小麦病程相关蛋白基因实时荧光定量表达分析第26-27页
     ·TcLr19PR1 基因的DNA 序列克隆及染色体定位第27-28页
     ·TcLr19PR1 基因拷贝数的验证第28-29页
     ·β-1,3-葡聚糖酶活性测定第29-30页
     ·TcLr19 小麦病程相关蛋白基因瞬时表达分析第30-34页
     ·TcLr19 小麦病程相关蛋白基因的转化及转基因植株再生第34-36页
3 结果与分析第36-52页
   ·TcLr19 小麦中病程相关蛋白基因片段的获得第36-38页
     ·小麦叶片总RNA 的提取第36页
     ·TcLr19 小麦病程相关蛋白1 基因片段的分离第36-37页
     ·TcLr19 小麦β-1,3-葡聚糖酶基因片段的分离第37-38页
   ·小麦TcLr19PR1基因全长cDNA的获得第38-39页
     ·RACE第38页
     ·TcLr19PR1 基因全长cDNA 的核苷酸及其推导氨基酸序列分析第38-39页
   ·TcLr19PR1 基因组DNA 扩增及分析第39-40页
   ·TcLr19PR1 基因染色体定位分析第40-41页
   ·TcLr19PR1 基因的拷贝数验证第41-42页
   ·小麦TcLr19Glu 基因全长cDNA 的获得第42-43页
     ·RACE第42页
     ·TcLr19Glu 基因全长及其推导氨基酸序列分析第42-43页
   ·β-1,3-葡聚糖酶活性测定第43-44页
   ·半定量RT-PCR 分析第44-45页
   ·实时荧光定量PCR 分析第45-47页
     ·TcLr19PR1 实时定量PCR 表达分析第45-46页
     ·TcLr19Glu 实时定量PCR 表达分析第46-47页
   ·目的基因植物表达载体的构建第47-48页
     ·转基因表达载体pAHC-TcLr19PR1 的构建第47页
     ·转基因表达载体pAHC-TcLr19Glu 的构建第47-48页
   ·目的基因与叶锈菌的互作第48-49页
   ·小麦胚性愈伤组织培养各阶段及转化子筛选结果第49-52页
4 讨论第52-54页
   ·叶锈菌与TcLr19 小麦互作体系中的TcLr19PR1 基因第52页
   ·叶锈菌与TcLr19 小麦互作体系中的TcLr19PR1 基因第52页
   ·小麦遗传转化体系的优化第52-53页
   ·展望与发展第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-60页
附录第60-66页
在读期间发表的学术论文第66-67页
作者简介第67-68页
致谢第68-69页

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