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芥菜新型几丁质酶BjCHI1的结构与功能关系研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
缩略词表第10-11页
第一部分 文献综述:植物几丁质酶的研究进展第11-28页
 1 植物几丁质酶的特性和生物学作用第11-13页
 2 植物几丁质酶的结构和催化机制第13-18页
 3 植物几丁质酶基因组结构第18页
 4 植物几丁质酶的分类第18-21页
 5 植物几丁质酶的分子进化第21-23页
 6 植物转几丁质酶基因工程第23-24页
 7 几丁质结合域的作用第24-27页
 8 本研究的目的和意义第27-28页
第二部分 酵母表达载体的构建、蛋白的诱导表达及纯化第28-49页
 1 材料与方法第28-37页
  1.1 材料第28-30页
  1.2 方法第30-37页
 2 结果与分析第37-46页
  2.1 酵母表达载体pP17、pP28、和pCat的构建第37-40页
  2.2 转化酵母和抗G418重组菌的筛选第40页
  2.3 重组酵母菌株的PCR鉴定第40-41页
  2.4 重组酵母菌的Southern杂交分析第41页
  2.5 蛋白质的小量诱导表达第41-42页
  2.6 最佳诱导时间的确定第42-43页
  2.7 Western blot分析第43-44页
  2.8 诱导方法的改进第44页
  2.9 蛋白的大量诱导表达和纯化第44-46页
 3 讨论第46-48页
 4 结论第48-49页
第三部分 几丁质酶酶活性与功能分析第49-68页
 1 材料与方法第49-52页
  1.1 材料第49-50页
  1.2 方法第50-52页
 2 结果与分析第52-63页
  2.1 以CM-chitin-RBV为底物的几丁质酶学特性第52-56页
  2.2 以胶状几丁质为底物的几丁质酶学特性第56-60页
  2.3 凝集素活性测定第60页
  2.4 抗细菌活性测定第60-62页
  2.5 离体抑真菌实验第62-63页
 3 讨论第63-66页
  3.1 酶活性方面第63-65页
  3.2 凝集素活性方面第65页
  3.3 抗细菌的可能性第65-66页
  3.4 抗真菌方面第66页
 4 结论第66-68页
第四部分 番茄组织培养与几丁质酶基因向番茄的转化第68-82页
 1 材料与方法第68-74页
  1.1 材料第68-70页
  1.2 方法第70-74页
 2 结果与分析第74-80页
  2.1 小型农杆菌转化载体构建第74页
  2.2 pBj17和pBj28的确证第74-75页
  2.3 番茄组织培养第75-77页
  2.4 几丁质酶基因向番茄的转化第77-80页
 3 讨论第80-81页
 4 结论第81-82页
本研究的创新之处及研究展望第82-83页
 1 创新之处第82页
 2 研究展望第82-83页
参考文献第83-92页
附录第92-102页
 附录A: Genbank中收录的芥菜BjCHI 1全长cDNA序列第92-94页
 附录B: pPIC9K质粒的AOX 1启动子序列和多克隆位点第94-95页
 附录C: BjCHI 1的核苷酸序列和所编码的成熟蛋白质序列第95-96页
 附录D: BjCHI 2的核苷酸序列和所编码的成熟蛋白质序列第96-98页
 附录E: BjCHI 3的核苷酸序列和所编码的成熟蛋白质序列第98-100页
 附录F: 计算Km值的数据第100-102页
致谢第102-103页
作者简历与发表论文情况第103页

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