| 主要英文缩写词 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-46页 |
| 第一部分 hOP-1成熟肽基因的克隆和序列分析 | 第46-65页 |
| 1 实验材料 | 第46-47页 |
| ·质粒和菌株 | 第46页 |
| ·DNA重组工具酶 | 第46页 |
| ·主要生化试剂 | 第46页 |
| ·主要实验仪器 | 第46-47页 |
| ·其它 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-56页 |
| ·DNA重组技术方法 | 第47-51页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第51页 |
| ·含重组质粒的阳性克隆挑选和初步鉴定 | 第51-52页 |
| ·寡核苷酸引物的设计、化学合成、后处理和纯化 | 第52页 |
| ·胎盘组织的取材和冻存 | 第52页 |
| ·胎盘组织总RNA的提取(一步酸酚法) | 第52-54页 |
| ·逆转录合成cDNA第一条链 | 第54-55页 |
| ·多聚酶链反应(PCR) | 第55页 |
| ·克隆cDNA的序列分析 | 第55-56页 |
| 3 实验结果 | 第56-60页 |
| ·中国人胎盘组织cDNA单链库的构建 | 第56-57页 |
| ·多聚酶链式反应(PCR)扩增目的基因 | 第57-58页 |
| ·OP-1m基因的克隆 | 第58-60页 |
| ·OP-1m基因片段核苷酸序列分析 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第二部分 hOP-1成熟肽基因5’端的修饰及其在大肠杆菌中的表达 | 第65-96页 |
| 1 实验材料 | 第65-66页 |
| ·质粒和菌株 | 第65-66页 |
| ·DNA重组试剂 | 第66页 |
| ·其它主要生化试剂 | 第66页 |
| ·主要实验仪器 | 第66页 |
| 2 实验方法 | 第66-72页 |
| ·DNA重组 | 第66页 |
| ·地高辛标记DNA探针的制备 | 第66-67页 |
| ·质粒的打点杂交(Dot Blotting) | 第67-68页 |
| ·大肠杆菌重组蛋白的诱导表达 | 第68页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和凝胶紫外密度蛋白扫描 | 第68页 |
| ·包涵体表达产物的纯化 | 第68-69页 |
| ·酶联免疫分析(ELISA) | 第69-70页 |
| ·Western印迹法检测表达蛋白 | 第70-71页 |
| ·牙髓细胞培养 | 第71页 |
| ·细胞培养上清中BGP的检测 | 第71-72页 |
| ·细胞中AKP的检测 | 第72页 |
| 3 实验结果 | 第72-90页 |
| ·hOP-1成熟肽基因5’端的修饰及PCR扩增 | 第72-73页 |
| ·PCR扩增产物OP-1m~M的克隆与序列分析 | 第73-74页 |
| ·pBV220／OP-1m~M表达质粒的构建 | 第74-75页 |
| ·pBv220／OP-1m~M在大肠杆菌中的表达 | 第75-79页 |
| ·包涵体表达产物的纯化 | 第79-83页 |
| ·表达产物的免疫学检测 | 第83-87页 |
| ·表达纯化蛋白可溶性上清对牙髓细胞BGP和AKP的影响 | 第87-90页 |
| 4 讨论 | 第90-93页 |
| 参考文献 | 第93-96页 |
| 总结 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 简历 | 第100-101页 |
