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Cyclin D1反义RNA真核表达载体的构建及其对胃癌恶性和耐药表型的影响

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-14页
缩略语表第14-17页
前言第17-19页
文献回顾第19-37页
 细胞周期调控网络及其与肿瘤的关系第19-30页
 D型周期蛋白与肿瘤第30-37页
材料和方法第37-77页
 主要实验材料第37-42页
  1.主要实验仪器第37页
  2.质粒、菌种、细胞株及实验动物第37-39页
  3.主要试剂第39-40页
  4.主要溶液配制第40-42页
 主要实验方法第42-53页
  1.细胞培养第42页
  2.细胞爬片和涂片的制备第42页
  3.免疫细胞化学染色第42-43页
  4.流式细胞仪检测细胞株cydin D1、MGr1-Ag表达水平第43页
  5.大肠杆菌感受态细胞的制备及转化宿主菌第43-44页
  6.质粒DNA的提取及纯化第44页
  7.Cyclin D1基因的亚克隆第44-46页
  8.Cyclin D1反义RNA真核表达载体的构建第46页
  9.Cyclin D1反义DNA在SGCR7901/VCR细胞中的稳定表达第46-49页
  10.细胞生长曲线、倍增时间及生长饱和密度的测定第49页
  11.流式细胞仪细胞周期测定第49-50页
  12.细胞生长血清依赖性检测第50页
  13.软琼脂克隆形成试验第50页
  14.药物敏感实验第50-51页
  15.MGr1促细胞增殖实验第51页
  16.Cyclin D1反义RNA稳定表达细胞MGr1-Ag表达水平检测第51页
  17.流式细胞仪双参数分析第51页
  18.裸鼠体内移植瘤生长实验第51-52页
  19.统计学处理第52-53页
 主要实验结果第53-77页
  1.Cyclin D1基因的亚克隆及限制性酶切分析第53-54页
  2.Cyclin D1反义RNA真核表达载体的构建及限制性酶分析第54-56页
  3.转染细胞neo和cyclin D1 mRNA表达的检测第56-57页
  4.Cyclin D1和MGr1-Ag蛋白水平的表达检测第57-64页
  5.Cyclin D1反义RNA稳定表达细胞的形态学观察的结果第64页
  6.细胞生长曲线、倍增时间和生长饱和密度测定结果第64页
  7.流式细胞仪测定细胞周期分布的结果第64-71页
  8.细胞生长血清依赖性检测结果第71页
  9.软琼脂克隆形成试验结果第71-73页
  10.药物敏感试验结果第73页
  11.MGr1促细胞增殖作用的检测结果第73页
  12.流式细胞仪双参数分析第73-76页
  13.裸鼠移植瘤成瘤率第76-77页
讨论第77-88页
 有关cyclin D1反义RNA真核表达载体的构建第77-79页
 有关基因转染的方法第79-80页
 有关cyclin D1反义RNA对胃癌细胞恶性表型的影响第80-82页
 有关cyclin D1反义RNA对胃癌多药耐药细胞耐药表型的影响第82-88页
小结第88-90页
致谢第90-91页
在读期间发表文章及获奖情况第91-92页
参考文献第92-107页

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