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缺氧,内皮素-1和一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞增殖,迁移和胶原合成的影响及其细胞分子生物学机制的研究

略语表第1-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-14页
Ⅰ.前言第14-16页
Ⅱ.材料与方法第16-32页
 一.材料第16-18页
  1.主要仪器、设备第16-17页
  2.主要试剂第17-18页
 二.方法第18-32页
  1.主要溶液配制第18-19页
  2.主要实验方法第19-32页
   (1) 减压缺氧大鼠模型的建立第19页
   (2) 组织制备第19页
   (3) 血管收缩和舒张反应的生物测定法第19页
   (4) 肺腺泡内动脉超微结构观察第19页
   (5) 细胞培养第19-20页
   (6) 平滑肌细胞鉴定第20-22页
   (7) 细胞缺氧模型第22页
   (8) ~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入第22页
   (9) 细胞趋化反应第22-23页
   (10) 美蓝染色分析第23页
   (11) 流式细胞计测定细胞中DNA含量第23页
   (12) ~(45)Ca~(2+)跨膜内流测定第23-24页
   (13) 胃蛋白酶消化法测定细胞胶原合成第24页
   (14) PASMC条件培养液(PASMC-CM)的制备第24页
   (15) PASMC细胞内cGMP放免测定第24-25页
   (16) PASMC培养液中ET-1放免测定第25-26页
   (17) cDNA探针的制备第26-27页
   (18) cDNA探针的标记第27页
   (19) 组织及细胞总RNA的提取第27-28页
   (20) Nor thern印迹杂交第28-29页
   (21) 斑点杂交第29-30页
   (22) RT-PCR第30-31页
   (23) 统计学处理第31-32页
Ⅲ.实验结果第32-65页
 一.缺氧对PASMC增殖、迁移和胶原合成的影响第32-44页
  1.缺氧对PASMC增殖的影响第32-40页
  2.缺氧促进PASMC的趋化反应第40-43页
  3.缺氧对PASMC胶原合成的影响第43-44页
 二.EDCF/ET-1和EDRF/NO对PASMC作用的多能性第44-65页
  1.ET-1和NO对大鼠离体肺动脉张力的影响及缺氧可特异地破坏EDCF/ET-1和EDRF/NO作用的动态平衡第45-50页
  2.ET-1和NO对PASMC增殖的影响第50-56页
   (1) ET-1对PASMC增殖的影响第50-54页
   (2) NO对PASMC增殖的影响第54-56页
  3.PDGF、ET-1、NO和ANP对PASMC迁移的影响第56-63页
   (1) PDGF诱导PASMC的趋化反应第56-57页
   (2) ET-1诱导PASMC的趋化反应第57-60页
   (3) NO和ANP对PDGF诱导的PASMC趋化反应的抑制作用第60-63页
  4.ET-1和NO对PASMC胶原合成的影响第63-65页
Ⅳ.讨论第65-75页
 一.缺氧对PASMC的直接作用在HPH发病机制中的作用第65-67页
 二.EDCF/ET-1和EDRF/NO对血管作用的多功能研究第67-69页
 三.肺血管中EDCF/ET-1与EDRF/NO失衡在缺氧性肺血管收缩反应增强和结构重组中的作用第69-74页
 四.结论第74-75页
Ⅴ.参考文献第75-82页
Ⅵ.文献综述第82-110页
简历第110-112页
致谢第112页

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