| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-27页 |
| 第一章 游离小孢子培养及cDNA-AFLP技术研究进展 | 第14-27页 |
| 1.芸薹属植物游离小孢子培养研究进展 | 第14-20页 |
| ·影响小孢子胚胎发生因素研究进展 | 第14-18页 |
| ·基因型 | 第14-15页 |
| ·供体植株生理状况 | 第15页 |
| ·小孢子发育时期 | 第15-16页 |
| ·花蕾预冷处理 | 第16页 |
| ·高温预处理 | 第16页 |
| ·培养基的类型和添加物 | 第16-18页 |
| ·小孢子培养密度 | 第18页 |
| ·影响小孢子植株再生因素研究 | 第18-19页 |
| ·内因 | 第18-19页 |
| ·外因 | 第19页 |
| ·小孢子再生植株的倍性鉴定 | 第19-20页 |
| ·加倍技术 | 第20页 |
| 2. 游离小孢子胚胎发生机理的研究进展 | 第20-21页 |
| ·细胞学研究进展 | 第20-21页 |
| ·分子生物学研究进展 | 第21页 |
| 3. cDNA-AFLP技术研究进展 | 第21-27页 |
| ·cDNA-AFLP技术的基本原理和步骤 | 第22-23页 |
| ·cDNA-AFLP的技术特点 | 第23-25页 |
| ·选择合适的内切酶组合 | 第23页 |
| ·重复性好,假阳性低,可检测低丰度表达的mRNA | 第23-24页 |
| ·准确反映基因间表达量的差别 | 第24页 |
| ·全面获取转录组的表达信息 | 第24-25页 |
| ·cDNA-AFLP技术的应用 | 第25-27页 |
| ·基因表达特性研究 | 第25页 |
| ·分离特异表达基因 | 第25页 |
| ·构建转录连锁图 | 第25-27页 |
| 第二部分 研究报告 | 第27-58页 |
| 第二章 不结球白菜游离小孢子胚胎发生影响因素研究 | 第27-36页 |
| 1.材料与和方法 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·小孢子分离和培养 | 第28-29页 |
| ·小孢子胚诱导率的影响因素研究 | 第29-30页 |
| ·基因型 | 第29页 |
| ·低温预处理 | 第29页 |
| ·热激处理 | 第29页 |
| ·蔗糖浓度 | 第29页 |
| ·结果统计 | 第29-30页 |
| 2.结果与分析 | 第30-34页 |
| ·基因型对小孢子胚诱导率的影响 | 第30-31页 |
| ·低温处理对小孢子胚诱导率的影响 | 第31页 |
| ·热激处理对小孢子胚诱导率的影响 | 第31-33页 |
| ·高糖浓度处理对小孢子胚诱导率的影响 | 第33-34页 |
| 3.讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 不结球白菜小孢子胚植株再生及倍性研究 | 第36-44页 |
| 1. 材料和方法 | 第36-38页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-38页 |
| ·小孢子胚芽诱导 | 第37页 |
| ·低温处理 | 第37页 |
| ·培养基中添加活性炭 | 第37页 |
| ·培养基中添加AgN03 | 第37页 |
| ·小孢子试管苗的继代及诱导生根 | 第37页 |
| ·小孢子植株的驯化移栽 | 第37-38页 |
| ·小孢子植株的倍性鉴定 | 第38页 |
| 2.结果与分析 | 第38-43页 |
| ·胚状体在固体培养基上的形态发育 | 第38-39页 |
| ·冷处理对小孢子胚芽再生的影响 | 第39-40页 |
| ·再生苗的继代、生根 | 第40页 |
| ·小孢子植株的驯化、移栽 | 第40-41页 |
| ·不同基因型不结球白菜小孢子植株的倍性变异 | 第41-43页 |
| 3.讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 不结球白菜游离小孢子胚胎发生相关基因的cDNA-AFLP分析 | 第44-58页 |
| 1.材料与方法 | 第45-53页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·各种酶类 | 第45页 |
| ·试剂盒 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-53页 |
| ·植物材料的准备 | 第45页 |
| ·总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第46-47页 |
| ·cDNA-AFLP分析 | 第47-50页 |
| ·聚丙烯凝胶电泳检测 | 第50-51页 |
| ·差异片段的回收 | 第51页 |
| ·差异片段的重新扩增 | 第51页 |
| ·琼脂糖凝胶回收与纯化 | 第51-52页 |
| ·回收片段的克隆 | 第52页 |
| ·回收产物的检测 | 第52-53页 |
| ·序列测定及分析 | 第53页 |
| 2. 结果与分析 | 第53-56页 |
| ·小孢子总RNA的提取 | 第53-54页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第54页 |
| ·cDNA酶切片段的预扩增结果 | 第54页 |
| ·选择性扩增的PAGE检测结果 | 第54-55页 |
| ·差异片段的再扩增及纯化 | 第55-56页 |
| ·差异片段的序列测定及同源性比较分析 | 第56页 |
| 3.讨论 | 第56-58页 |
| 全文结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 论文发表情况 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |