| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-37页 |
| 一 小麦条锈病危害及抗条锈病基因遗传研究 | 第11-14页 |
| 1 小麦条锈病危害 | 第11页 |
| 2 小麦抗条锈病基因遗传研究 | 第11-14页 |
| ·小麦抗条锈病基因的遗传研究方法 | 第12-14页 |
| ·常规杂交法 | 第12-13页 |
| ·基因推导法 | 第13-14页 |
| ·非整倍体法 | 第14页 |
| 二 小麦抗条锈病基因克隆研究进展 | 第14-18页 |
| 1 禾谷类作物抗病基因克隆现状 | 第15-16页 |
| 2 小麦抗条锈病基因克隆研究进展 | 第16-18页 |
| 三 抑制性消减杂交技术及ESTs分析 | 第18-28页 |
| 1 抑制性消减杂交技术原理及应用 | 第18-23页 |
| ·抑制性消减杂交技术原理 | 第18-19页 |
| ·抑制消减杂交技术操作步骤 | 第19-21页 |
| ·SSH技术的应用 | 第21-23页 |
| 2 ESTs分析 | 第23-28页 |
| ·cDNA文库构建 | 第24-25页 |
| ·ESTs随机测序 | 第25页 |
| ·序列前处理 | 第25页 |
| ·聚类和拼接 | 第25-26页 |
| ·基因注释及功能分类 | 第26-27页 |
| ·ESTs代谢途径及对应基因产物的系统分析 | 第27-28页 |
| ·ESTs数据的后续分析 | 第28页 |
| ·基因核苷酸序列分析 | 第28页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第28页 |
| 四 比较基因组学与小麦抗条锈病基因分子标记 | 第28-37页 |
| 1 植物比较基因组学研究策略与进展 | 第28-32页 |
| ·比较基因组学的兴起 | 第28-29页 |
| ·比较基因组学在植物中的应用 | 第29-32页 |
| ·比较遗传作图 | 第29-30页 |
| ·基因结构区域的微共线性研究 | 第30-31页 |
| ·基于比较基因组学的QTL比较与基因克隆 | 第31-32页 |
| 2 小麦抗条锈病基因分子标记研究进展 | 第32-37页 |
| 第二部分 研究报告 | 第37-77页 |
| 引言 | 第37-38页 |
| 一 材料与方法 | 第38-49页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-49页 |
| ·培养和接种 | 第38-39页 |
| ·取样 | 第39页 |
| ·总RNA提取 | 第39页 |
| ·总RNA中基因组DNA的去除 | 第39-40页 |
| ·抑制消减杂交(SSH)文库构建 | 第40-46页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第40-41页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第41页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切及接头连接 | 第41-42页 |
| ·两次消减杂交 | 第42-43页 |
| ·两次PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·感受态细胞的制备及SSH-PCR产物的连接转化 | 第44页 |
| ·菌液PCR及文库片段大小检测 | 第44-45页 |
| ·地高辛差式筛选 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第46页 |
| ·序列分析 | 第46页 |
| ·半定量PCR | 第46-47页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第46-47页 |
| ·第一链cDNA浓度定量 | 第47页 |
| ·比较基因组学开发Yr26分子标记 | 第47-49页 |
| ·分子标记的遗传作图 | 第49页 |
| 二 结果与分析 | 第49-73页 |
| 1 SSH文库构建及ESTs功能分析 | 第49-68页 |
| ·总RNA的提取 | 第49页 |
| ·SSH文库的构建 | 第49-53页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第50页 |
| ·RsaⅠ酶切 | 第50-51页 |
| ·两次PCR扩增 | 第51页 |
| ·SSH-PCR产物的连接转化及文库片段大小检测 | 第51-53页 |
| ·地高辛标记探针的SSH文库差式筛选 | 第53页 |
| ·测序及ESTs生物信息学分析 | 第53-57页 |
| ·ESTs表达分析及物理定位 | 第57-68页 |
| ·条锈菌诱导ESTs表达分析 | 第57-62页 |
| ·条锈菌诱导表达ESTs的物理定位 | 第62-68页 |
| 2 利用比较基因组学开发Yr26分子标记 | 第68-72页 |
| ·与小麦染色体1BL-6区段共线性短柄草序列寻找 | 第68-72页 |
| 3 引物HJ-9的扩增及遗传图谱构建 | 第72-73页 |
| 三 讨论 | 第73-77页 |
| 1 SSH文库的构建与ESTs分析 | 第73-75页 |
| ·SSH文库的构建 | 第73-74页 |
| ·ESTs分析 | 第74-75页 |
| ·定位于第一群ESTs的分析 | 第74-75页 |
| ·在92R137与扬麦5号中差异表达ESTs的分析 | 第75页 |
| ·SSH文库的缺点 | 第75页 |
| 2 利用比较基因组开发Yr26分子标记 | 第75-77页 |
| 全文结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-91页 |
| 致谢 | 第91页 |