缩略语表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第13-16页 |
材料与方法 | 第16-45页 |
一、主要实验试剂 | 第16-17页 |
二、主要仪器设备 | 第17-18页 |
三、主要实验方法 | 第18-45页 |
(一) 肿瘤干细胞的分离和筛选 | 第18-20页 |
1.T3A细胞的来源和培养 | 第18-19页 |
2.成瘤后T3A的二次分离 | 第19页 |
3.T3A细胞的单细胞克隆筛选 | 第19页 |
4.MTT法比较各克隆的增殖能力 | 第19-20页 |
5.利用在免疫缺陷小鼠上的成瘤能力筛选T3A细胞 | 第20页 |
(二) 肿瘤干细胞特性的鉴定 | 第20-28页 |
1.RT-PCR检测与干细胞增殖、自我更新相关的基因在T3A-A3细胞的表达 | 第20-23页 |
2.RT-PCR检测干细胞marker在T3A-A3细胞的表达 | 第23-26页 |
3.流式细胞术检测干细胞标志在T3A-A3细胞的表达 | 第26页 |
4.集落形成实验及二次集落形成实验 | 第26-27页 |
5.二次成瘤实验 | 第27页 |
6.染色体核型检测 | 第27页 |
7.T3A-A3细胞的致瘤能力和转移能力的分析 | 第27-28页 |
(三) T3A-A3细胞向不同肿瘤细胞的定向诱导分化 | 第28-42页 |
1.RT-PCR检测干细胞多向分化潜能相关的转录因子在T3A-A3细胞的表达 | 第28-31页 |
2.T3A-A3细胞向不同肿瘤细胞的定向诱导分化 | 第31-32页 |
3.T3A-A3细胞向黑色素瘤细胞的定向分化 | 第32-37页 |
4.T3A-A3细胞向淋巴瘤细胞的诱导分化 | 第37-42页 |
(四) T3A单克隆抗体在人多种肿瘤组织上的免疫组织化学染色 | 第42-45页 |
1.T3A单克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
2.各株T3A单克隆抗体在T3A-A3细胞上的免疫染色 | 第43-44页 |
3.T3A单克隆抗体在人多种肿瘤组织上的免疫组织化学染色 | 第44-45页 |
结果 | 第45-60页 |
一、肿瘤干细胞的分离和筛选 | 第45-47页 |
二、肿瘤干细胞特性的鉴定 | 第47-51页 |
1、T3A-A3细胞具有干细胞的特性 | 第47-50页 |
·T3A-A3细胞表达干细胞相关基因和干细胞标志分子 | 第47-49页 |
·T3A-A3细胞具有自我更新能力 | 第49-50页 |
2、T3A-A3细胞具有肿瘤细胞的特性 | 第50-51页 |
·染色体核型异常 | 第50页 |
·高致瘤性及高转移性 | 第50-51页 |
三、T3A-A3多向分化潜能的分析 | 第51-58页 |
1、T3A-A3细胞表达干细胞多向分化潜能相关的转录因子 | 第51-52页 |
2、T3A-A3细胞向黑色素瘤细胞的诱导分化 | 第52-55页 |
·诱导后的T3A-A3细胞形态的变化 | 第52-53页 |
·诱导后的T3A-A3细胞表达黑色素瘤的特异标志gp100 | 第53-54页 |
·诱导分化后的T3A-A3细胞形成的肿瘤组织表达gp100 | 第54-55页 |
3、T3A-A3细胞向淋巴瘤细胞的诱导分化 | 第55-58页 |
·诱导后T3A-A3细胞的形态变化 | 第55-56页 |
·诱导后的T3A-A3细胞出现淋巴瘤特异标志CD10的表达 | 第56-57页 |
·诱导分化后的T3A-A3细胞形成的肿瘤组织表达CD10 | 第57-58页 |
四、肿瘤干细胞存在的普遍性 | 第58-60页 |
讨论 | 第60-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
综述 | 第72-85页 |
个人简历 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-89页 |