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基于TAC多基因转化载体的构建及其转化水稻的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
第1章 绪论第9-30页
   ·综述第9-27页
     ·大片段DNA 插入文库(Large size insertgenomic library)发展史第9-14页
       ·质粒文库第10页
       ·λ噬菌体(λ-bacteriophage)文库第10页
       ·粘粒(Cosmids)文库第10-11页
       ·酵母人工染色体(YAC)文库第11页
       ·细菌人工染色体(BAC)文库第11-12页
       ·P1 克隆系统和源于P1 的人工染色体(PAC)文库第12页
       ·双元细菌人工染色体(BIBAC)文库第12-13页
       ·可转化人工染色体(TAC)文库第13-14页
     ·转化人工染色体(TAC)文库的发展第14-18页
     ·TAC 文库的筛选方法第18-19页
     ·TAC 多基因转化载体系统中的特异性重组系统的概述第19-23页
     ·水稻遗传转化技术第23-25页
       ·农杆菌介导遗传转化第23-24页
       ·影响农杆菌介导水稻遗传转化效率的因素第24-25页
     ·ossut5、oscin3、osmst6和oaat/haat的研究现状第25-27页
   ·本论文立题目的和意义、研究内容、技术路线第27-30页
     ·立题目的和意义第27-29页
     ·研究内容第29页
     ·技术路线第29-30页
第2章 转运蛋白基因组TAC 载体的构建、鉴定和转化第30-52页
   ·材料与方法第30-36页
     ·实验材料第30-33页
       ·供试水稻品种第30页
       ·菌株和质粒第30-33页
       ·主要试剂和仪器第33页
     ·实验方法第33-36页
       ·载体构建的一些基本方法第33-36页
   ·载体构建第36-50页
     ·多基因组TAC747 载体的构建原理第36-37页
     ·中间载体回收第37页
     ·OsMST4 与OsCIN3 双基因TAC 载体构建第37-41页
     ·OsSUT5Z 与OAAT 双基因TAC 载体构建第41-46页
     ·5 OsSUT5、OsMST4、OsCIN3和OAAT等4个基因构建成的TAC 多基因载体第46-50页
   ·载体电击转化农杆菌的PCR 检测第50-51页
   ·结论第51-52页
第3章 转基因植株的遗传转化和分子检测第52-65页
   ·材料与方法第52-57页
     ·实验材料第52页
       ·供试水稻品种第52页
       ·菌株第52页
     ·实验方法第52-57页
       ·转基因植株的遗传转化第52-53页
       ·影响农杆菌介导大片段基因水稻遗传转化效率的因素研究第53-54页
       ·PCR 模板的制备及引物第54-57页
   ·结果与分析第57-64页
     ·影响农杆菌介导水稻遗传转化效率的因素第57-62页
       ·水稻基因型对水稻大片段载体转化的影响第57页
       ·抗氧化剂对水稻愈伤组织转化率的影响第57-58页
       ·菌液浓度对转化效率的影响第58页
       ·愈伤组织继代次数对水稻大片段载体转化的影响第58-59页
       ·转化载体大小对转化效率的影响第59-60页
       ·转基因植株的获得第60-62页
     ·转基因水稻植株的分子检测第62-64页
       ·标记基因(hpt)的检测第62-63页
       ·转基因植株的目的基的PCR 的检测第63-64页
   ·结论第64-65页
讨论第65-68页
附录第68-73页
参考文献第73-81页
致谢第81页

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