| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-21页 |
| ·杀虫晶体蛋白的的分类 | 第13-14页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因鉴定方法 | 第14-15页 |
| ·杀虫晶体蛋白的生物活性 | 第15-16页 |
| ·杀虫晶体蛋白的作用机理 | 第16-18页 |
| ·多种杀虫晶体蛋白的相互作用 | 第18页 |
| ·杀虫晶体蛋白的的应用 | 第18-19页 |
| ·BT 对重要的农业害虫的防治 | 第19页 |
| ·本论文研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-28页 |
| ·cry 基因PCR-RFLP 鉴定 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·模板制备 | 第23-24页 |
| ·PCR 反应 | 第24页 |
| ·简并引物设计和两步法PCR | 第24页 |
| ·酶切分析 | 第24页 |
| ·E. coli 质粒DNA 提取 | 第24页 |
| ·Bt 大质粒DNA 提取 | 第24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第24-25页 |
| ·DNA 回收 | 第25页 |
| ·连接反应 | 第25页 |
| ·E. coli 的转化 | 第25页 |
| ·基因在大肠杆菌中自诱导表达 | 第25页 |
| ·基因在大肠杆菌中诱导表达 | 第25页 |
| ·Bt 菌株的培养与蛋白提取 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第26页 |
| ·序列测定及分析 | 第26页 |
| ·杀虫晶体蛋白SDS-PAGE 分析 | 第26页 |
| ·杀虫测定 | 第26-27页 |
| ·数据分析处理 | 第27页 |
| ·Ni 柱亲和层析纯化His-Taq 可溶组分蛋白 | 第27页 |
| ·切胶制备抗原及抗体的检测(western-blot) | 第27-28页 |
| 3 试验结果 | 第28-37页 |
| ·菌株SC7-D1 基因片段的克隆与鉴定 | 第28页 |
| ·CRY1AX 全长基因的克隆与表达及生物活性测定 | 第28-33页 |
| ·S 菌株大质粒图谱 | 第28-29页 |
| ·S 菌株的PCR-RFLP 鉴定 | 第29页 |
| ·cry1Ax 基因的克隆和测序及分析 | 第29-31页 |
| ·cry1Ax 基因的表达 | 第31页 |
| ·杀虫活性测定 | 第31-33页 |
| ·CRY1B3、CRY1I8 蛋白对CRY1AC 抗性小菜蛾的生物活性 | 第33-35页 |
| ·杀虫蛋白SDS-PAGE 分析 | 第33页 |
| ·小菜蛾生物活性测定 | 第33-35页 |
| ·BT 杀虫晶体蛋白对杨扇舟蛾和舞毒蛾的初测 | 第35页 |
| ·CRY2A84 的抗原制备 | 第35-37页 |
| ·Cry2A64 蛋白的表达 | 第35页 |
| ·Cry2A64 蛋白纯化 | 第35-36页 |
| ·Cry2A64 蛋白的抗原制备 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |
