| 提要 | 第1-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-39页 |
| ·干扰素概述 | 第11-19页 |
| ·干扰素的发现 | 第11-12页 |
| ·干扰素的定义、命名和分类 | 第12页 |
| ·人干扰素的分子结构及基本特性 | 第12-14页 |
| ·干扰素的诱生 | 第14-15页 |
| ·干扰素的生物学功能及作用机制 | 第15-17页 |
| ·干扰素的临床应用 | 第17页 |
| ·干扰素的研究进展 | 第17-19页 |
| ·干扰素口服给药的研究进展 | 第19页 |
| ·植物表达系统生产干扰素的研究进展 | 第19页 |
| ·霍乱毒素B 亚单位概述 | 第19-22页 |
| ·CTB 的结构特点 | 第20页 |
| ·CTB 粘膜载体系统的应用 | 第20-21页 |
| ·转基因植物表达CTB 的研究进展 | 第21-22页 |
| ·人参概述 | 第22-26页 |
| ·人参的化学成分 | 第22-25页 |
| ·人参的药理作用 | 第25页 |
| ·转基因人参的研究进展 | 第25-26页 |
| ·植物基因工程 | 第26-37页 |
| ·转基因植物技术 | 第26-28页 |
| ·根癌农杆菌Ti 质粒介导的转化系统 | 第28-35页 |
| ·利用转基因植物生产药用蛋白 | 第35-37页 |
| ·本研究的目的、意义及研究方案 | 第37-39页 |
| ·研究的目的及意义 | 第37-38页 |
| ·研究方案 | 第38-39页 |
| 第2章 CTB－HIFN-α2b 融合蛋白植物细胞表达载体的构建 | 第39-58页 |
| ·材料 | 第39-41页 |
| ·菌株与质粒 | 第39页 |
| ·工具酶 | 第39页 |
| ·DNA 分子量标准 | 第39页 |
| ·生化试剂 | 第39页 |
| ·抗生素 | 第39页 |
| ·试剂盒 | 第39-40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第40页 |
| ·仪器设备 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-51页 |
| ·CTB 基因的获得 | 第41-45页 |
| ·hIFN-α2b 基因的获得 | 第45-46页 |
| ·克隆载体的构建 | 第46-50页 |
| ·表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-55页 |
| ·重叠PCR 法合成CTB 基因的电泳检测 | 第51-52页 |
| ·PCR 扩增hIFN-α2b 基因 | 第52-53页 |
| ·克隆载体pMDCI 的鉴定 | 第53-54页 |
| ·表达载体pBICI 的鉴定 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第3章 根癌农杆菌的转化 | 第58-64页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·菌株 | 第58页 |
| ·工具酶 | 第58页 |
| ·DNA 分子量标准 | 第58页 |
| ·生化试剂 | 第58页 |
| ·抗生素 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·仪器设备 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59-61页 |
| ·CaCl_2法制备农杆菌LBA4404 感受态细胞 | 第59页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第59-60页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-63页 |
| ·农杆菌转化子的PCR 鉴定 | 第61-62页 |
| ·农杆菌转化子的酶切鉴定 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第4章 农杆菌介导的人参愈伤组织细胞的转化 | 第64-74页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·植物细胞株 | 第64页 |
| ·生化试剂 | 第64页 |
| ·抗生素 | 第64页 |
| ·培养基 | 第64-65页 |
| ·仪器设备 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-67页 |
| ·人参愈伤组织细胞抗生素敏感性实验 | 第65-66页 |
| ·农杆菌的预培养 | 第66页 |
| ·农杆菌和人参愈伤组织细胞的共培养 | 第66页 |
| ·抗性愈伤组织细胞的筛选 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-69页 |
| ·人参愈伤组织细胞抗生素敏感性实验 | 第67-68页 |
| ·农杆菌与人参愈伤组织细胞的共培养 | 第68-69页 |
| ·转化后愈伤组织细胞的筛选情况 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-73页 |
| ·植物材料的选择 | 第70页 |
| ·遗传转化方法选择 | 第70页 |
| ·抗生素及其浓度的选择 | 第70-71页 |
| ·转化过程中乙酰丁香酮的添加 | 第71-72页 |
| ·转化后愈伤组织细胞发生褐变的原因 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第5章 CTB－HIFN-α2b 融合蛋白在人参愈伤组织细胞中表达的检测 | 第74-85页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·植物材料 | 第74页 |
| ·细胞株和毒株 | 第74页 |
| ·生化试剂 | 第74页 |
| ·分子量标准 | 第74页 |
| ·试剂盒 | 第74-75页 |
| ·培养基 | 第75页 |
| ·仪器设备 | 第75页 |
| ·方法 | 第75-80页 |
| ·融合基因在转基因人参愈伤组织细胞中整合的PCR 鉴定 | 第75-77页 |
| ·融合基因在转基因人参愈伤组织细胞中转录的RT-PCR 鉴定 | 第77-78页 |
| ·Western blot 法检测融合蛋白的表达 | 第78-79页 |
| ·融合蛋白抗病毒活性的检测 | 第79-80页 |
| ·融合蛋白GM1 结合活性的检测 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-83页 |
| ·抗性细胞的PCR 检测 | 第80-81页 |
| ·转基因细胞的RT-PCR 检测 | 第81-82页 |
| ·Western blot 法检测检测融合蛋白的表达 | 第82页 |
| ·融合蛋白抗病毒活性测定 | 第82页 |
| ·融合蛋白GM1 结合活性的检测 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·融合蛋白表达的检测 | 第83页 |
| ·检测融合蛋白的抗病毒活性 | 第83页 |
| ·检测融合蛋白的GM1 结合活性 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-103页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 中文摘要 | 第105-108页 |
| ABSTRACT | 第108-110页 |
