摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1. 前言 | 第10-18页 |
·细菌细胞表面展示及其应用 | 第10-11页 |
·细菌细胞表面展示 | 第10-11页 |
·细菌表面展示系统的应用 | 第11页 |
·S-层蛋白及其在疫苗研制中的应用 | 第11-14页 |
·S-层蛋白及其功能 | 第11-13页 |
·S-层蛋白在疫苗研制中的应用 | 第13-14页 |
·苏云金芽胞杆菌杆菌 S-层蛋白CTC表面展示系统 | 第14页 |
·疫苗食品及其应用 | 第14-16页 |
·蜡样芽胞杆菌及其应用 | 第16-18页 |
·蜡样芽胞杆菌作为益生素的作用机理 | 第16-17页 |
·生物夺氧 | 第16页 |
·拮抗致病微生物,改善体内外生态环境 | 第16页 |
·增强动物体的免疫功能 | 第16-17页 |
·产生多种消化酶 | 第17页 |
·产生多种营养物质 | 第17页 |
·促进动物肠道发育和成熟并降低血脂和胆固醇 | 第17页 |
·蜡样芽胞杆菌在畜牧业中的应用效果 | 第17-18页 |
·研究的目的和意义 | 第18页 |
2 材料与方法 | 第18-29页 |
·实验材料 | 第18-24页 |
·实验动物 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·质粒和菌株 | 第19-21页 |
·主要试剂及溶液的配制 | 第21-24页 |
·抗生素类 | 第21页 |
·细菌培养主要溶液的配制 | 第21-22页 |
·质粒抽提与鉴定相关溶液的配制 | 第22页 |
·电转化相关溶液的配置 | 第22页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液 | 第22-23页 |
·Western-blot相关溶液 | 第23-24页 |
·阳性血清的来源 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-29页 |
·技术路线 | 第24页 |
·革兰氏阴性菌质粒的小量制备(碱裂解法提取质粒) | 第24-25页 |
·革兰氏阳性菌质粒的小量制备(根据碱裂解法修改) | 第25页 |
·PCR扩增 HA1P基因 | 第25-26页 |
·苏云金芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌电转感受态的制备及电转化 | 第26-27页 |
·电镜样品的制备 | 第27页 |
·展示 HA1蛋白的重组菌株 BCCH、CH血凝和血凝抑制试验 | 第27页 |
·菌悬液的制备 | 第27页 |
·血凝(HA, hemagglutination)试验方法 | 第27页 |
·血凝抑制(HI, hemagglutination inhibition)试验方法 | 第27页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
·Western blot | 第28-29页 |
·展示 HA1蛋白的重组菌株 BcA和 BcC免疫鸡实验 | 第29页 |
·免疫抗原的制备 | 第29页 |
·动物实验 | 第29页 |
·血清抗体效价测定 | 第29页 |
3 结果与分析 | 第29-37页 |
·质粒 pCSHA1P、pCTC-HA1P和 pMIL-CSA的提取 | 第29-30页 |
·重组菌株的构建 | 第30-32页 |
·重组菌株菌落形态的差异 | 第32-33页 |
·重组菌株的电子显微镜照片 | 第33页 |
·重组菌株 BcA和 BcC的血凝和血凝抑制试验 | 第33-35页 |
·融合蛋白的表达和活性检测 | 第35-36页 |
·重组菌株对商品代肉雏鸡的免疫效果 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
·蜡样芽胞杆菌的电转化 | 第37页 |
·蜡样芽胞杆菌与苏云金芽胞杆菌展示外源抗原的比较 | 第37-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
硕士期间已发表文章 | 第43-44页 |
致谢 | 第44页 |