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外源抗原在蜡样芽胞杆菌细胞表面展示的可行性研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第9-10页
1. 前言第10-18页
   ·细菌细胞表面展示及其应用第10-11页
     ·细菌细胞表面展示第10-11页
     ·细菌表面展示系统的应用第11页
   ·S-层蛋白及其在疫苗研制中的应用第11-14页
     ·S-层蛋白及其功能第11-13页
     ·S-层蛋白在疫苗研制中的应用第13-14页
     ·苏云金芽胞杆菌杆菌 S-层蛋白CTC表面展示系统第14页
   ·疫苗食品及其应用第14-16页
   ·蜡样芽胞杆菌及其应用第16-18页
     ·蜡样芽胞杆菌作为益生素的作用机理第16-17页
       ·生物夺氧第16页
       ·拮抗致病微生物,改善体内外生态环境第16页
       ·增强动物体的免疫功能第16-17页
       ·产生多种消化酶第17页
       ·产生多种营养物质第17页
       ·促进动物肠道发育和成熟并降低血脂和胆固醇第17页
     ·蜡样芽胞杆菌在畜牧业中的应用效果第17-18页
   ·研究的目的和意义第18页
2 材料与方法第18-29页
   ·实验材料第18-24页
     ·实验动物第18-19页
     ·主要仪器第19页
     ·质粒和菌株第19-21页
     ·主要试剂及溶液的配制第21-24页
       ·抗生素类第21页
       ·细菌培养主要溶液的配制第21-22页
       ·质粒抽提与鉴定相关溶液的配制第22页
       ·电转化相关溶液的配置第22页
       ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液第22-23页
       ·Western-blot相关溶液第23-24页
       ·阳性血清的来源第24页
   ·试验方法第24-29页
     ·技术路线第24页
     ·革兰氏阴性菌质粒的小量制备(碱裂解法提取质粒)第24-25页
     ·革兰氏阳性菌质粒的小量制备(根据碱裂解法修改)第25页
     ·PCR扩增 HA1P基因第25-26页
     ·苏云金芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌电转感受态的制备及电转化第26-27页
     ·电镜样品的制备第27页
     ·展示 HA1蛋白的重组菌株 BCCH、CH血凝和血凝抑制试验第27页
       ·菌悬液的制备第27页
       ·血凝(HA, hemagglutination)试验方法第27页
       ·血凝抑制(HI, hemagglutination inhibition)试验方法第27页
     ·SDS-PAGE电泳第27-28页
     ·Western blot第28-29页
   ·展示 HA1蛋白的重组菌株 BcA和 BcC免疫鸡实验第29页
     ·免疫抗原的制备第29页
     ·动物实验第29页
     ·血清抗体效价测定第29页
3 结果与分析第29-37页
   ·质粒 pCSHA1P、pCTC-HA1P和 pMIL-CSA的提取第29-30页
   ·重组菌株的构建第30-32页
   ·重组菌株菌落形态的差异第32-33页
   ·重组菌株的电子显微镜照片第33页
   ·重组菌株 BcA和 BcC的血凝和血凝抑制试验第33-35页
   ·融合蛋白的表达和活性检测第35-36页
   ·重组菌株对商品代肉雏鸡的免疫效果第36-37页
4 讨论第37-38页
   ·蜡样芽胞杆菌的电转化第37页
   ·蜡样芽胞杆菌与苏云金芽胞杆菌展示外源抗原的比较第37-38页
5 结论第38-39页
参考文献第39-43页
硕士期间已发表文章第43-44页
致谢第44页

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