| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-33页 |
| ·HIV-1病原生物学简介 | 第11-13页 |
| ·耐药性HIV-1的流行简介 | 第13-14页 |
| ·HIV-1耐药性的研究现状 | 第14-23页 |
| ·HIV-1耐药性的产生、进化 | 第14页 |
| ·抗HIV-1药物的研究现状 | 第14-17页 |
| ·HIV-1耐药机制及耐药性突变的研究现状 | 第17-23页 |
| ·HIV-1蛋白酶及其耐药机制 | 第17-18页 |
| ·HIV-1蛋白酶的耐药性突变 | 第18-19页 |
| ·H1V-1逆转录酶及其耐药机制 | 第19-21页 |
| ·HIV-1逆转录酶的耐药性突变 | 第21-23页 |
| ·HIV-1耐药性的检测方法研究现状 | 第23-27页 |
| ·基因型耐药性检测 | 第23-24页 |
| ·表型耐药性检测 | 第24-27页 |
| ·研究目的 | 第27-28页 |
| ·实验设计 | 第28-30页 |
| ·实验原理及技术流程 | 第30-33页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第33-50页 |
| ·实验材料 | 第33-37页 |
| ·感受态菌株 | 第33页 |
| ·细胞及培养基 | 第33页 |
| ·用于耐药性研究的质粒 | 第33-34页 |
| ·用于耐药性研究的HIV感染者血浆样本 | 第34页 |
| ·用于耐药性研究的抗逆转录病毒药物 | 第34-35页 |
| ·主要化学试剂及试剂盒 | 第35页 |
| ·主要工具酶及DNA Marker | 第35页 |
| ·引物合成及测序 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·常用试剂配置 | 第36-37页 |
| ·主要生物软件和分析工具 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-50页 |
| ·HIV-1 RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·HIV-1 CDNA的合成 | 第38页 |
| ·巢式PCR反应扩增目的基因片段 | 第38-40页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第40页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌化学感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·定点突变改造载体PSG3ΔENv | 第41-42页 |
| ·目的基因片段的克隆 | 第42页 |
| ·质粒的小量提取 | 第42-43页 |
| ·质粒的中量提取 | 第43-44页 |
| ·质粒的定量 | 第44页 |
| ·LIPOFECTAMINE 2000进行质粒PCDNA3.1-env与PSG3Δenv共转染形成假病毒 | 第44-45页 |
| ·功能性假病毒的滴度测定 | 第45页 |
| ·假病毒法表型敏感性实验 | 第45-46页 |
| ·活病毒法表型耐药实验 | 第46-48页 |
| ·HIV-1 P24抗原检测 | 第48页 |
| ·实验数据的计算与分析 | 第48-49页 |
| ·耐药性突变的分析和耐药性解释 | 第49-50页 |
| 第三章 实验结果 | 第50-79页 |
| ·假病毒法表型耐药性检测体系的构建 | 第50-70页 |
| ·重组耐药性HIV-1假病毒的构建及鉴定 | 第50-57页 |
| ·骨架载体质粒的改造及参考假病毒株的构建 | 第50-51页 |
| ·参考假病毒株感染能力及滴度的验证 | 第51-52页 |
| ·用于构建重组假病毒株的耐药性HIV-1样本目的基因片段的获得 | 第52-53页 |
| ·耐药性HIV-1样本目的基因片段的克隆以及重组克隆的鉴定筛选 | 第53-54页 |
| ·16株重组假病毒株基因型耐药性分析 | 第54-56页 |
| ·16株重组假病毒株耐药基因的分型 | 第56-57页 |
| ·假病毒法表型耐药性检测实验方法的构建以及验证 | 第57-60页 |
| ·参考假病毒株对12种抗病毒药物的表型敏感性检测及验证 | 第57-59页 |
| ·假病毒表型敏感性检测方法重复性的验证 | 第59-60页 |
| ·假病毒表型耐药性检测方法准确性的验证 | 第60页 |
| ·假病毒表型耐药性检测方法的应用以及对假病毒表型耐药性的解释和分析 | 第60-69页 |
| ·假病毒株对蛋白酶抑制剂的敏感性以及与基因型耐药性的比较 | 第60-62页 |
| ·假病毒株对核苷类逆转录酶抑制剂的敏感性以及与基因型耐药性的比较 | 第62-65页 |
| ·假病毒株对非核苷类逆转录酶抑制剂的敏感性以及与基因型耐药性的比较 | 第65-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| ·我国广西壮族自治区HIV-1基因型耐药性研究 | 第70-79页 |
| ·广西HIV-1样品RNA的提取及目的耐药基因片段的扩增 | 第70页 |
| ·广西HIV-1样本蛋白酶及逆转录酶基因的分型及进化树 | 第70-72页 |
| ·广西HIV-1样本基因型耐药性的检测结果 | 第72-75页 |
| ·广西HIV-1样本蛋白酶及逆转录酶基因多态性分析 | 第75-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 第四章 实验讨论 | 第79-87页 |
| ·单轮假病毒法表型耐药性检测的讨论 | 第79-84页 |
| ·应用假病毒法对16株HIV-1的表型检测以及对其耐药性的解释 | 第79-81页 |
| ·本研究中假病毒表型耐药性检测方法的优势 | 第81-82页 |
| ·假病毒表型耐药性检测方法的应用 | 第82-84页 |
| ·我国广西壮族自治区HIV-1样品基因型耐药性研究的讨论 | 第84-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 附录 缩略语一览表 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简历 | 第98页 |
