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人源抗伊维菌素单链抗体的筛选、表达及结构功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
中英文对照词第10-11页
第一章 文献综述第11-18页
 1 噬菌体展示技术第11-13页
   ·丝状噬菌体展示系统第12页
   ·λ噬菌体展示系统第12页
   ·T4 噬菌体展示系统第12-13页
   ·T7 噬菌体展示系统第13页
   ·噬菌体展示技术特点第13页
 2 抗体第13-15页
   ·抗体的结构第13-14页
   ·抗体的发展第14-15页
 3 噬菌体抗体库技术第15-16页
   ·噬菌体抗体库技术的产生第15页
   ·噬菌体抗体库的筛选方法第15页
   ·噬菌体抗体库技术的应用第15-16页
 4 单链抗体在大肠杆菌中的表达第16页
   ·单链抗体表达方式第16页
   ·培养条件的优化第16页
 5 单链抗体的结构功能分析第16-18页
第二章 抗伊维菌素单链抗体的筛选第18-26页
 1 材料与方法第18-22页
   ·实验材料第18-19页
     ·主要材料与试剂第18-19页
     ·培养基及溶液第19页
     ·实验仪器第19页
   ·噬菌体抗体库的初步鉴定第19-20页
     ·辅助噬菌体KM13 的大量制备第19-20页
     ·噬菌体抗体库的扩增第20页
     ·制备次级噬菌体抗体库第20页
   ·抗IVM 抗体的筛选第20-21页
   ·单克隆噬菌体ELISA 鉴定抗IVM 噬菌体抗体第21-22页
   ·阳性克隆外源基因序列鉴定第22页
 2 试验结果第22-25页
   ·噬菌体抗体库的初步鉴定第22-23页
   ·抗IVM 抗体的筛选第23页
   ·单克隆噬菌体ELISA 鉴定抗IVM 噬菌体抗体第23页
   ·阳性克隆外源基因序列鉴定第23-25页
 3 讨论第25-26页
第三章 抗伊维菌素单链抗体诱导表达及免疫活性鉴定第26-31页
 1 材料与方法第26-28页
   ·实验材料第26-27页
     ·主要材料与试剂第26页
     ·培养基及溶液第26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·hsIVM8 噬菌体上清制备第27页
   ·hsIVM8 噬菌体感染E.coli HB2151第27页
   ·诱导表达可溶性抗体第27页
   ·HisTrap HP 镍亲和柱纯化抗IVM 可溶性抗体第27-28页
   ·纯化抗体灵敏度测定第28页
     ·纯化抗体工作浓度测定第28页
     ·纯化抗体灵敏度测定第28页
 2 试验结果第28-30页
   ·hsIVM8 噬菌体感染E.coli HB2151第28-29页
   ·可溶性抗体的诱导表达及纯化第29页
   ·纯化抗体灵敏度测定第29-30页
 3 讨论第30-31页
第四章 hsIVM8 噬菌体抗体蛋白结构功能分析第31-34页
 1 材料和方法第31页
   ·材料第31页
   ·IVM 单链抗体理化性质分析第31页
   ·蛋白质结构功能预测第31页
 2 结果第31-33页
   ·IVM 单链抗体的理化性质第31-32页
   ·蛋白质功能基序分析第32页
   ·蛋白二级结构预测第32页
   ·蛋白质亚细胞定位预测第32页
   ·蛋白酶切位点预测第32-33页
 3 讨论第33-34页
全文总结第34-35页
附录第35-38页
 附录一 培养基配方第35页
 附录二 溶液配方第35-36页
 附录三 ELISA 试验所用缓冲液配方第36页
 附录四 SDS-PAGE 溶液配制及方法第36-38页
参考文献第38-43页
致谢第43-44页
攻读学位期间发表的学术论文目录第44页

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