摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
中英文对照词 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1 噬菌体展示技术 | 第11-13页 |
·丝状噬菌体展示系统 | 第12页 |
·λ噬菌体展示系统 | 第12页 |
·T4 噬菌体展示系统 | 第12-13页 |
·T7 噬菌体展示系统 | 第13页 |
·噬菌体展示技术特点 | 第13页 |
2 抗体 | 第13-15页 |
·抗体的结构 | 第13-14页 |
·抗体的发展 | 第14-15页 |
3 噬菌体抗体库技术 | 第15-16页 |
·噬菌体抗体库技术的产生 | 第15页 |
·噬菌体抗体库的筛选方法 | 第15页 |
·噬菌体抗体库技术的应用 | 第15-16页 |
4 单链抗体在大肠杆菌中的表达 | 第16页 |
·单链抗体表达方式 | 第16页 |
·培养条件的优化 | 第16页 |
5 单链抗体的结构功能分析 | 第16-18页 |
第二章 抗伊维菌素单链抗体的筛选 | 第18-26页 |
1 材料与方法 | 第18-22页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·主要材料与试剂 | 第18-19页 |
·培养基及溶液 | 第19页 |
·实验仪器 | 第19页 |
·噬菌体抗体库的初步鉴定 | 第19-20页 |
·辅助噬菌体KM13 的大量制备 | 第19-20页 |
·噬菌体抗体库的扩增 | 第20页 |
·制备次级噬菌体抗体库 | 第20页 |
·抗IVM 抗体的筛选 | 第20-21页 |
·单克隆噬菌体ELISA 鉴定抗IVM 噬菌体抗体 | 第21-22页 |
·阳性克隆外源基因序列鉴定 | 第22页 |
2 试验结果 | 第22-25页 |
·噬菌体抗体库的初步鉴定 | 第22-23页 |
·抗IVM 抗体的筛选 | 第23页 |
·单克隆噬菌体ELISA 鉴定抗IVM 噬菌体抗体 | 第23页 |
·阳性克隆外源基因序列鉴定 | 第23-25页 |
3 讨论 | 第25-26页 |
第三章 抗伊维菌素单链抗体诱导表达及免疫活性鉴定 | 第26-31页 |
1 材料与方法 | 第26-28页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·主要材料与试剂 | 第26页 |
·培养基及溶液 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·hsIVM8 噬菌体上清制备 | 第27页 |
·hsIVM8 噬菌体感染E.coli HB2151 | 第27页 |
·诱导表达可溶性抗体 | 第27页 |
·HisTrap HP 镍亲和柱纯化抗IVM 可溶性抗体 | 第27-28页 |
·纯化抗体灵敏度测定 | 第28页 |
·纯化抗体工作浓度测定 | 第28页 |
·纯化抗体灵敏度测定 | 第28页 |
2 试验结果 | 第28-30页 |
·hsIVM8 噬菌体感染E.coli HB2151 | 第28-29页 |
·可溶性抗体的诱导表达及纯化 | 第29页 |
·纯化抗体灵敏度测定 | 第29-30页 |
3 讨论 | 第30-31页 |
第四章 hsIVM8 噬菌体抗体蛋白结构功能分析 | 第31-34页 |
1 材料和方法 | 第31页 |
·材料 | 第31页 |
·IVM 单链抗体理化性质分析 | 第31页 |
·蛋白质结构功能预测 | 第31页 |
2 结果 | 第31-33页 |
·IVM 单链抗体的理化性质 | 第31-32页 |
·蛋白质功能基序分析 | 第32页 |
·蛋白二级结构预测 | 第32页 |
·蛋白质亚细胞定位预测 | 第32页 |
·蛋白酶切位点预测 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
全文总结 | 第34-35页 |
附录 | 第35-38页 |
附录一 培养基配方 | 第35页 |
附录二 溶液配方 | 第35-36页 |
附录三 ELISA 试验所用缓冲液配方 | 第36页 |
附录四 SDS-PAGE 溶液配制及方法 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第44页 |