| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 促卵泡素（FSH）研究概述 | 第11-13页 |
| 2 重组FSH 表达体系的选择 | 第13-15页 |
| 3 细胞转染方式的选择 | 第15-21页 |
| ·囊泡的概述 | 第16-21页 |
| ·囊泡的性质 | 第16-17页 |
| ·囊泡的应用 | 第17-19页 |
| ·囊泡的制备方法 | 第19-21页 |
| 4 转染效率影响因素 | 第21-22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 囊泡法转染山羊重组 FSH 在巴斯德毕赤酵母中的优化表达效应的研究 | 第24-49页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| ·质粒、菌株和主要试剂 | 第24页 |
| ·培养基与常用溶液配方 | 第24-26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-34页 |
| ·酵母表达载体pPIC9K/EGFP-FSHβ-CTP-α线性化处理及纯化 | 第26-27页 |
| ·复合物囊泡的制备 | 第27-29页 |
| ·不同电荷比DNA/CTAB、DNA/DTAB、DNA/DEAB 复合物囊泡 的制备 | 第27-28页 |
| ·不同比例DNA/Lipofectamine? 2000 复合物的制备 | 第28页 |
| ·不同比例DNA/Sofast 复合物的制备 | 第28-29页 |
| ·转染巴斯德毕赤酵母 | 第29-30页 |
| ·巴斯德毕赤酵母感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·转染过程 | 第29-30页 |
| ·巴斯德毕赤酵母中阳性菌落的筛选与鉴定 | 第30-32页 |
| ·含目的基因的阳性菌落及高拷贝转化子的筛选 | 第30页 |
| ·阳性菌落的表型判定与筛选 | 第30页 |
| ·阳性菌落的PCR 鉴定 | 第30-32页 |
| ·阳性巴斯德毕赤酵母菌基因组的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR 鉴定目的基因 | 第31-32页 |
| ·巴斯德毕赤酵母阳性菌落的诱导表达 | 第32页 |
| ·阳性菌落的诱导表达 | 第32页 |
| ·目的蛋白表达产物的检测 | 第32-34页 |
| ·SDS－PAGE 凝胶电泳检测 | 第32-33页 |
| ·Western-blot 检测表达的蛋白 | 第33-34页 |
| ·放射免疫检测蛋白的表达量 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-43页 |
| ·转染质粒pPIC9K/EGFP-FSHβ-CTP-α的表达 | 第34-35页 |
| ·不同处理组MD 平板长势 | 第35-37页 |
| ·阳性菌落的表型判定与筛选 | 第37-38页 |
| ·阳性菌落的鉴定 | 第38-39页 |
| ·阳性巴斯德毕赤酵母菌基因组的提取 | 第38-39页 |
| ·巴斯德毕赤酵母菌基因组的PCR 检测 | 第39页 |
| ·巴斯德毕赤酵母阳性菌落的诱导表达与检测 | 第39-43页 |
| ·巴斯德毕赤酵母阳性菌落的诱导表达产物 FSHβ-CTP-α的SDS-PAGE 检测 | 第39-40页 |
| ·表达产物的Western blot | 第40页 |
| ·表达产物的放射免疫检测（RIA） | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-49页 |
| ·不同表面活性剂的转染效果分析 | 第44-45页 |
| ·不同DNA/表面活性剂电荷比的转染效果分析 | 第45-46页 |
| ·DNA/表面活性剂囊泡与其他转染方式对比转染效果分析 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59页 |
