| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·金属硫蛋白的特性 | 第11-12页 |
| ·植物金属硫蛋白的分类 | 第12页 |
| ·植物金属硫蛋白的功能 | 第12-14页 |
| ·植物金属硫蛋白参与金属离子的运输和供给的功能 | 第13页 |
| ·植物金属硫蛋白的重金属解毒功能 | 第13-14页 |
| ·植物金属硫蛋白的活性氧清除功能 | 第14页 |
| ·植物金属硫蛋白基因的结构 | 第14-15页 |
| ·植物金属硫蛋白基因的表达特征 | 第15-16页 |
| ·金属硫蛋白的应用 | 第16-17页 |
| 第二章 引言 | 第17-18页 |
| ·研究背景 | 第17页 |
| ·研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第三章 蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与序列分析 | 第18-27页 |
| ·技术路线 | 第18页 |
| ·实验材料与试剂 | 第18-19页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第18页 |
| ·菌株与载体 | 第18页 |
| ·主要设备 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·自配的主要试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-22页 |
| ·EST序列特征分析 | 第19页 |
| ·CpMT基因cDNA的获得 | 第19-21页 |
| ·CpMT基因cDNA的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-26页 |
| ·CpMT克隆子的获得及其cDNA序列特征 | 第22页 |
| ·目标克隆子的EST序列特征分析与保守结构域分析 | 第22页 |
| ·CpMT编码蛋白同源性分析和进化树分析 | 第22-24页 |
| ·CpMT基因编码蛋白结构特征分析 | 第24-26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 第四章 蜡梅金属硫蛋白基因原核表达载体的构建及目的蛋白的表达 | 第27-35页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| ·试验材料与试剂 | 第28-29页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要设备 | 第28页 |
| ·自配主要试剂 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-32页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·IPTG诱导融合蛋白表达 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE检测融合蛋白的表达 | 第31页 |
| ·诱导条件优化 | 第31-32页 |
| ·纯化回收融合蛋白 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·pET-32a/CpMT表达分析 | 第33页 |
| ·诱导条件的优化 | 第33页 |
| ·融和蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第五章 蜡梅金属硫蛋白基因的功能初步分析 | 第35-40页 |
| ·转化菌对重金属离子的耐受性分析 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35页 |
| ·目的基因转化烟草以及转基因烟草的重金属胁迫 | 第35-40页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·技术路线 | 第35-36页 |
| ·植物表达载体pC2301-CpMT的构建 | 第36页 |
| ·转基因植株的获得与鉴定 | 第36页 |
| ·转基因植株的重金属胁迫试验 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| 第六章 讨论 | 第40-42页 |
| ·CpMT基因的克隆 | 第40页 |
| ·CpMT基因编码蛋白的特性 | 第40页 |
| ·CpMT基因原核表达载体的构建及融合蛋白的表达 | 第40-41页 |
| ·CpMT基因功能验证 | 第41-42页 |
| 第七章 总结 | 第42-43页 |
| ·结论 | 第42页 |
| ·下一步工作打算 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 附录 | 第49-50页 |
| 在校期间发表的论文 | 第50页 |