| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·蜡梅及其研究简况 | 第9页 |
| ·分子伴侣的类型及其基本功能 | 第9-10页 |
| ·热激蛋白(Heat Shock Protein,HSP) | 第10-14页 |
| ·HSP的分类 | 第10页 |
| ·HSP的特点 | 第10-11页 |
| ·HSP的生物学功能 | 第11-12页 |
| ·HSP的基因表达调控 | 第12-13页 |
| ·研究植物热激蛋白的意义 | 第13-14页 |
| ·基因表达的分析方法 | 第14-21页 |
| ·Northern杂交法 | 第14页 |
| ·半定量逆转录多聚酶链式反应(semiqunantitative reverse transcription andpoly-merse chain reaction,Sq RT-PCR) | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR(real-time flurescent quantitative PCR,FQ-PCR) | 第15-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| 第三章 Cphspl的克隆与分子特性 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第23页 |
| ·菌株与载体 | 第23页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
| ·主要仪器设备与耗材 | 第23页 |
| ·常用溶液配方 | 第23-24页 |
| ·基本培养基配方 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·EST序列特征分析 | 第24页 |
| ·Cphspl基因cDNA获得 | 第24-27页 |
| ·Cphspl基因cDNA的生物信息学分析 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-35页 |
| ·Cphspl的克隆子的获得及其cDNA序列特征 | 第27-28页 |
| ·蜡梅HSP基因Cphspl DNA片段克隆 | 第28页 |
| ·蜡梅HSP基因Cphspl的序列结构特征 | 第28-29页 |
| ·蜡梅Cphspl基因编码蛋白同源性 | 第29-30页 |
| ·蜡梅HSP基因Cphspl编码蛋白性质与结构分析 | 第30-35页 |
| 第四章 表达载体的构建与转化烟草的研究 | 第35-45页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·菌株与载体 | 第35页 |
| ·主要仪器及生化试剂 | 第35页 |
| ·常用溶液配方 | 第35-36页 |
| ·常用培养基 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| ·Cphspl基因植物表达载体的构建 | 第36-40页 |
| ·转化烟草及阳性植株的筛选 | 第40页 |
| ·结果分析 | 第40-45页 |
| ·Cphspl基因表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·转基因单株系的获得 | 第41-42页 |
| ·转基因烟草表型分析 | 第42-45页 |
| 第五章 基因胁迫表达荧光定量分析 | 第45-53页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·蜡梅高温、低温胁迫处理 | 第45页 |
| ·RNA提取和cDNA一链合成 | 第45-46页 |
| ·蜡梅Cphspl基因在高温、低温诱导下表达的荧光定量分析 | 第46-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·总RNA提取 | 第49-50页 |
| ·引物扩增特异性检测 | 第50页 |
| ·熔解曲线和标准曲线分析 | 第50-52页 |
| ·荧光定量分析 | 第52-53页 |
| 第六章 结果与讨论 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·叶盘法转化烟草中对抗生素浓度的选择 | 第53页 |
| ·热激蛋白与蜡梅耐冷性的关系 | 第53页 |
| ·总结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 缩略词表 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 发表论文和参加的研究课题 | 第63页 |
