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功能基因芯片(GeoChip)在两种典型环境微生物群落分析中应用的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
论文缩略词表第13-14页
第一章 绪论第14-24页
   ·宏(环境微生物)基因组学第14-17页
     ·全基因组鸟枪法测序第15-16页
     ·基因芯片第16页
     ·焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术第16-17页
   ·国内外研究进展第17-20页
     ·环境微生物总基因组的提取与纯化研究第17-18页
     ·酸性矿坑水中微生物群落的研究第18-20页
     ·气候变化对土壤环境微生物群落研究第20页
   ·GeoChip的特点及其在环境微生物群落分析中的应用第20-21页
   ·本研究的目的、内容、技术路线和创新性第21-23页
   ·展望第23-24页
第二章 环境样品总DNA的提取及纯化方法比较的研究第24-43页
   ·前言第24-25页
   ·材料和方法第25-31页
     ·样地信息与实验样品采集第25-26页
     ·DNA提取程序第26-27页
     ·改进后的胶纯化方法第27-28页
     ·DNA的定性与定量第28页
     ·比较低pH PIPES缓冲液和Tris-HCl缓冲液第28-29页
     ·粗DNA纯化的比较第29页
     ·比较Tris-HCl缓冲液加改进胶纯化方法和PIPES缓冲液加Promega试剂盒纯化方法第29页
     ·PCR放大第29-30页
     ·全基因组滚环放大(Rolling circle amplification,RCA)、标记和杂交第30页
     ·改进后胶纯化的通用性第30-31页
     ·结果第31-40页
     ·比较低pH PIPES DNA抽提缓冲液和Tris-HCl DNA抽提缓冲液第31-34页
     ·DNA纯化方法的比较第34-40页
     ·低溶点胶纯化方法的适用性第40页
   ·讨论第40-42页
   ·小结第42-43页
第三章 德兴、银山和永平三座铜矿山酸性矿坑水中微生物群落系统发育的分析研究第43-60页
   ·前言第43页
   ·材料和方法第43-47页
     ·样地描述和取样第43-44页
     ·DNA提取与纯化第44-45页
     ·16S rDNA基因PCR扩增、纯化、克隆和测序第45-46页
     ·序列系统发育分析第46页
     ·数据统计及分析第46-47页
     ·核苷酸序列登记号第47页
   ·结果第47-57页
     ·样品地球化学参量特征第47-49页
     ·AMD中微生物群落系统发育分析第49-55页
     ·微生物群落组成结构和地球化学参量、空间距离的关系第55-57页
   ·讨论第57-58页
   ·小结第58-60页
第四章 德兴、银山和永平三座铜矿山酸性矿坑水中微生物群落功能基因的分析研究第60-80页
   ·前言第60页
   ·实验材料和方法第60-63页
     ·样地描述、样品采集和地化参量分析第60-61页
     ·样品中微生物群落总DNA提取与纯化(详见3.2.2)第61页
     ·样品中微生物群落总DNA全基因组放大、标记、芯片杂交和扫描第61-62页
     ·芯片数据预处理第62-63页
     ·数据统计及分析第63页
   ·结果第63-75页
     ·样品地化性质分析第63-65页
     ·AMD中微生物群落功能基因多样性和结构概述第65-69页
     ·检测到功能基因分析第69-75页
   ·微生物群落功能基因组成和地化参量、空间距离之间的关系第75-77页
   ·讨论第77-79页
   ·小结第79-80页
第五章 美国大平原高草牧场的土壤微生物群落在气候变化下演变的研究第80-102页
   ·前言第80页
   ·材料和方法第80-85页
     ·样地描述第80-82页
     ·土壤取样第82页
     ·磷酸酯脂肪酸分析第82页
     ·BIOLOG分析第82-83页
     ·实验室中土壤呼吸的测定第83页
     ·土壤有机活性碳和总有机碳的测定第83页
     ·微生物群落总DNA提取和纯化第83-84页
     ·GeoChip分析第84页
     ·数据统计分析第84-85页
   ·结果第85-98页
     ·土壤温度、湿度和容重分析第85页
     ·土壤碳和氮分析第85页
     ·土壤呼吸作用、碳源利用、微生物生物量和相对丰度分析第85页
     ·功能基因多样性分析第85-88页
     ·微生物群落结构概述第88-89页
     ·功能基因的聚类分析第89-93页
     ·细菌、古菌和真菌的相对丰度第93页
     ·碳、氮、硫和磷循环过程相关功能基因的变化第93-96页
     ·微生物群落结构和环境变量之间的关系第96-98页
   ·讨论第98-100页
     ·微生物群落的适应性第98页
     ·加温处理的直接作用第98-99页
     ·其他因素第99页
     ·碳氮循环的生物学意义第99-100页
   ·小结第100-102页
第六章 结论第102-104页
参考文献第104-114页
附录1 用PicoGreen方法对双链DM进行定量的操作说明第114-116页
致谢第116-117页
主要研究成果第117-119页

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