| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 中英文缩略词表 | 第19-21页 |
| 引言 | 第21-24页 |
| 第一部分 miR-145-5p在恶性黑色素瘤中的表达及意义研究 | 第24-36页 |
| 1 前言 | 第24-25页 |
| 2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1 样本收集 | 第25页 |
| 2.2 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.3 实验仪器 | 第26页 |
| 3 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.1 qRT-PCR检测miR-145-5p在恶性黑色素瘤中的表达情况 | 第26-27页 |
| 3.2 数据分析 | 第27-28页 |
| 4 结果 | 第28-30页 |
| 4.1 miR-145-5p在恶性黑色素瘤中的表达情况 | 第28页 |
| 4.2 miR-145-5p在不同分期恶性黑色素瘤中的表达情况 | 第28-29页 |
| 4.3 miR-145-5p在恶性黑色素瘤中的表达与患者临床病理参数的关系 | 第29-30页 |
| 5 讨论 | 第30-31页 |
| 6 结论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-36页 |
| 第二部分 miR-145-5p对恶性黑色素瘤细胞生物学行为的调控作用研究 | 第36-95页 |
| 1 前言 | 第36-37页 |
| 2 实验材料 | 第37-41页 |
| 2.1 实验细胞 | 第37页 |
| 2.2 实验试剂 | 第37-39页 |
| 2.3 实验器材 | 第39页 |
| 2.4 实验配制的试剂 | 第39-41页 |
| 3 实验方法 | 第41-57页 |
| 3.1 构建miR-145-5p过表达慢病毒载体 | 第41-44页 |
| 3.2 构建miR-145-5p干扰慢病毒载体 | 第44-46页 |
| 3.3 构建TLR4过表达慢病毒载体 | 第46-47页 |
| 3.4 qRT-PCR检测miR-145-5p在多种黑色素瘤细胞中的表达情况 | 第47-48页 |
| 3.5 重组慢病毒包装和滴定 | 第48-49页 |
| 3.6 重组慢病毒感染A375、M14细胞 | 第49-50页 |
| 3.7 MTT方法检测A375、M14细胞的增殖情况 | 第50页 |
| 3.8 克隆形成实验检测A375、M14细胞的克隆形成能力 | 第50-51页 |
| 3.9 划痕实验检测A375、M14细胞的迁移情况 | 第51页 |
| 3.10 Transwell小室实验检测A375、M14细胞的侵袭能力 | 第51页 |
| 3.11 流式细胞术检测A375、M14细胞的凋亡情况 | 第51页 |
| 3.12 ELISA检测A375、M14细胞中Caspase3、NF-κB的活性 | 第51-52页 |
| 3.13 在线生物信息学软件预测miR-145-5p和TLR4的靶向关系 | 第52-53页 |
| 3.14 双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和TLR4的靶向关系 | 第53-55页 |
| 3.15 Western blot | 第55-56页 |
| 3.16 数据分析 | 第56-57页 |
| 4 结果 | 第57-87页 |
| 4.1 miR-145-5p过表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 4.2 miR-145-5p干扰载体的构建 | 第58页 |
| 4.3 TLR4过表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 4.4 miR-145-5p在多种黑色素瘤细胞中的表达情况 | 第59-60页 |
| 4.5 慢病毒包装和滴定结果 | 第60-61页 |
| 4.6 Lv-miR-145-5p、Lv-sh-miR-145-5p转染A375、M14细胞效率的测定 | 第61-62页 |
| 4.7 miR-145-5p对A375、M14细胞增殖的影响 | 第62-63页 |
| 4.8 miR-145-5p对A375、M14细胞克隆形成能力的影响 | 第63-64页 |
| 4.9 miR-145-5p对A375、M14细胞迁移能力的影响 | 第64-66页 |
| 4.10 miR-145-5p对A375、M14细胞侵袭能力的影响 | 第66-67页 |
| 4.11 miR-145-5p对A375、M14细胞凋亡的影响 | 第67-68页 |
| 4.12 miR-145-5p对A375、M14细胞中Caspase-3活性的影响 | 第68-69页 |
| 4.13 miR-145-5p对A375、M14细胞中NF-κB活性的影响 | 第69-70页 |
| 4.14 miR-145-5p对A375、M14细胞中NF-κBp65表达的影响 | 第70-72页 |
| 4.15 在线生物信息学软件预测miR-145-5p和TLR4的靶向关系 | 第72页 |
| 4.16 荧光素酶报告基因载体的构建 | 第72-74页 |
| 4.17 双荧光素酶报告基因载体实验验证TLR4是miR-145-5p的靶基因 | 第74页 |
| 4.18 miR-145-5p对A375、M14细胞中TLR4蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
| 4.19 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞增殖的影响 | 第75-76页 |
| 4.20 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞中Ki67蛋白表达的影响 | 第76-77页 |
| 4.21 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞克隆形成能力的影响 | 第77-79页 |
| 4.22 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞迁移能力的影响 | 第79-80页 |
| 4.23 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞侵袭能力的影响 | 第80-82页 |
| 4.24 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞侵袭相关蛋白表达的影响 | 第82-83页 |
| 4.25 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞凋亡的影响 | 第83-84页 |
| 4.26 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞中Caspase3活性的影响 | 第84-85页 |
| 4.27 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞NF-κB活性的影响 | 第85-86页 |
| 4.28 miR-145-5p靶向TLR4对A375、M14细胞中NF-κBp65蛋白表达的影响 | 第86-87页 |
| 5 讨论 | 第87-90页 |
| 6 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-95页 |
| 第三部分 miR-145-5p对黑色素瘤细胞裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用研究 | 第95-107页 |
| 1 前言 | 第95-96页 |
| 2 实验材料 | 第96页 |
| 2.1 实验动物 | 第96页 |
| 2.2 细胞株 | 第96页 |
| 2.3 实验主要试剂和饲料 | 第96页 |
| 2.4 主要仪器和实验材料 | 第96页 |
| 3 实验方法 | 第96-97页 |
| 3.1 细胞培养 | 第96-97页 |
| 3.2 细胞荷瘤小鼠肿瘤模型的构建 | 第97页 |
| 3.3 荷瘤小鼠肿瘤体积和质量检测 | 第97页 |
| 3.4 Western blot | 第97页 |
| 3.5 ELISA检测miR-145-5p过表达对移植瘤中NF-κB活性的影响 | 第97页 |
| 4 结果 | 第97-101页 |
| 4.1 miR-145-5p过表达对荷瘤小鼠体重的影响 | 第97-98页 |
| 4.2 miR-145-5p过表达对裸鼠移植瘤生长的影响 | 第98-99页 |
| 4.3 miR-145-5p过表达对裸鼠移植瘤重量的影响 | 第99-100页 |
| 4.4 miR-145-5p过表达对移植瘤中TLR4蛋白表达的影响 | 第100页 |
| 4.5 miR-145-5p过表达对移植瘤中NF-κB活性的影响 | 第100页 |
| 4.6 miR-145-5p过表达对移植瘤中NF-κBp65蛋白表达的影响 | 第100-101页 |
| 5 讨论 | 第101-103页 |
| 6 结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-107页 |
| 全文结论 | 第107-108页 |
| 综述 miRNA在恶性黑色素瘤中的研究进展 | 第108-133页 |
| 参考文献 | 第121-133页 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
