摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
1.1 昆虫鞣化激素 | 第11-15页 |
1.1.1 鞣化激素的分子特性 | 第12页 |
1.1.2 鞣化激素基因结构 | 第12-13页 |
1.1.3 鞣化激素的功能 | 第13-14页 |
1.1.4 昆虫鞣化激素的释放与调控 | 第14-15页 |
1.1.5 半翅目昆虫鞣化激素研究概况 | 第15页 |
1.2 RNAi研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 RNAi的作用机理 | 第15-16页 |
1.2.2 RNAi技术的特点 | 第16页 |
1.2.3 RNAi的方法 | 第16-17页 |
1.3 立题依据 | 第17-19页 |
第二章 烟蚜若蚜及有翅和无翅成蚜转录组和翅型相关基因的表达差异分析 | 第19-34页 |
2.1 材料与方法 | 第19-22页 |
2.1.1 供试虫源及饲养方法 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第19-20页 |
2.1.3 样品的采集 | 第20页 |
2.1.4 样品RNA的提取(Trizol法) | 第20页 |
2.1.5 cDNA文库的建立和转录组测序 | 第20页 |
2.1.6 不同虫态烟蚜差异基因表达分析 | 第20-21页 |
2.1.7 差异表达基因的荧光定量验证 | 第21-22页 |
2.1.8 数据统计分析 | 第22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-32页 |
2.2.1 烟蚜转录组Illumina测序和序列组装 | 第22-24页 |
2.2.2 Unigene功能注释 | 第24-27页 |
2.2.3 烟蚜不同翅型中的差异表达基因 | 第27-30页 |
2.2.4 差异表达基因的荧光定量PCR验证 | 第30-32页 |
2.3 讨论 | 第32-34页 |
第三章 烟蚜鞣化激素基因的克隆 | 第34-53页 |
3.1 材料与方法 | 第34-47页 |
3.1.1 供试虫源及饲养方法 | 第34页 |
3.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
3.1.3 主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.4 溶液配制和培养基 | 第36页 |
3.1.5 烟蚜总RNA的提取 | 第36-38页 |
3.1.6 保守域序列获得 | 第38-43页 |
3.1.7 3’和5’端序列获得 | 第43-47页 |
3.1.8 克隆测序 | 第47页 |
3.2 结果与分析 | 第47-50页 |
3.3 讨论 | 第50-53页 |
第四章 烟蚜鞣化激素基因生物信息学分析 | 第53-65页 |
4.1 材料与方法 | 第53-54页 |
4.1.1 氨基酸序列分析 | 第53页 |
4.1.2 蛋白质信息学分析 | 第53-54页 |
4.2 分析结果 | 第54-63页 |
4.2.1 氨基酸序列分析 | 第54-55页 |
4.2.2 蛋白质信息学分析 | 第55-63页 |
4.3 讨论 | 第63-65页 |
第五章 烟蚜鞣化激素基因表达特异性分析 | 第65-71页 |
5.1 材料与方法 | 第65-68页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第65页 |
5.1.2 主要仪器和试剂 | 第65-66页 |
5.1.3 烟蚜不同发育时期总RNA的提取 | 第66页 |
5.1.4 第一链cDNA合成 | 第66-67页 |
5.1.5 引物设计 | 第67页 |
5.1.6 荧光定量PCR | 第67-68页 |
5.1.7 数据分析 | 第68页 |
5.2 结果与分析 | 第68-69页 |
5.3 讨论 | 第69-71页 |
第六章 烟蚜鞣化激素基因功能分析 | 第71-85页 |
6.1 材料与方法 | 第72-80页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第72页 |
6.1.2 主要试剂 | 第72页 |
6.1.3 dsRNA的合成 | 第72-77页 |
6.1.4 纯化dsRNA | 第77-78页 |
6.1.5 dsRNA质量检测及浓度测定 | 第78页 |
6.1.6 饲喂dsRNA | 第78-80页 |
6.1.7 RNAi水平检测和表型观察 | 第80页 |
6.2 结果与分析 | 第80-83页 |
6.2.1 dsRNA合成 | 第80-81页 |
6.2.2 定量PCR检测基因的沉默效率 | 第81页 |
6.2.3 RNAi效果的观察 | 第81-83页 |
6.3 讨论 | 第83-85页 |
第七章 总结与展望 | 第85-88页 |
7.1 主要研究结果 | 第85-87页 |
7.1.1 烟蚜不同虫态及翅型转录组分析 | 第85页 |
7.1.2 烟蚜鞣化激素基因全长序列的获得 | 第85-86页 |
7.1.3 烟蚜鞣化激素基因生物信息学分析 | 第86页 |
7.1.4 烟蚜鞣化激素基因发育阶段表达特异性分析 | 第86-87页 |
7.1.5 烟蚜鞣化激素基因功能分析 | 第87页 |
7.2 论文创新点 | 第87页 |
7.3 论文不足及展望 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-96页 |
附录 | 第96-97页 |
一、获奖情况 | 第96页 |
二、参加科研项目 | 第96页 |
三、参加的学术会议 | 第96页 |
四、发表的文章 | 第96-97页 |