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烟蚜鞣化激素基因的克隆、表达和功能分析

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
第一章 前言第11-19页
    1.1 昆虫鞣化激素第11-15页
        1.1.1 鞣化激素的分子特性第12页
        1.1.2 鞣化激素基因结构第12-13页
        1.1.3 鞣化激素的功能第13-14页
        1.1.4 昆虫鞣化激素的释放与调控第14-15页
        1.1.5 半翅目昆虫鞣化激素研究概况第15页
    1.2 RNAi研究进展第15-17页
        1.2.1 RNAi的作用机理第15-16页
        1.2.2 RNAi技术的特点第16页
        1.2.3 RNAi的方法第16-17页
    1.3 立题依据第17-19页
第二章 烟蚜若蚜及有翅和无翅成蚜转录组和翅型相关基因的表达差异分析第19-34页
    2.1 材料与方法第19-22页
        2.1.1 供试虫源及饲养方法第19页
        2.1.2 主要试剂和仪器第19-20页
        2.1.3 样品的采集第20页
        2.1.4 样品RNA的提取(Trizol法)第20页
        2.1.5 cDNA文库的建立和转录组测序第20页
        2.1.6 不同虫态烟蚜差异基因表达分析第20-21页
        2.1.7 差异表达基因的荧光定量验证第21-22页
        2.1.8 数据统计分析第22页
    2.2 结果与分析第22-32页
        2.2.1 烟蚜转录组Illumina测序和序列组装第22-24页
        2.2.2 Unigene功能注释第24-27页
        2.2.3 烟蚜不同翅型中的差异表达基因第27-30页
        2.2.4 差异表达基因的荧光定量PCR验证第30-32页
    2.3 讨论第32-34页
第三章 烟蚜鞣化激素基因的克隆第34-53页
    3.1 材料与方法第34-47页
        3.1.1 供试虫源及饲养方法第34页
        3.1.2 主要仪器第34-35页
        3.1.3 主要试剂第35-36页
        3.1.4 溶液配制和培养基第36页
        3.1.5 烟蚜总RNA的提取第36-38页
        3.1.6 保守域序列获得第38-43页
        3.1.7 3’和5’端序列获得第43-47页
        3.1.8 克隆测序第47页
    3.2 结果与分析第47-50页
    3.3 讨论第50-53页
第四章 烟蚜鞣化激素基因生物信息学分析第53-65页
    4.1 材料与方法第53-54页
        4.1.1 氨基酸序列分析第53页
        4.1.2 蛋白质信息学分析第53-54页
    4.2 分析结果第54-63页
        4.2.1 氨基酸序列分析第54-55页
        4.2.2 蛋白质信息学分析第55-63页
    4.3 讨论第63-65页
第五章 烟蚜鞣化激素基因表达特异性分析第65-71页
    5.1 材料与方法第65-68页
        5.1.1 供试昆虫第65页
        5.1.2 主要仪器和试剂第65-66页
        5.1.3 烟蚜不同发育时期总RNA的提取第66页
        5.1.4 第一链cDNA合成第66-67页
        5.1.5 引物设计第67页
        5.1.6 荧光定量PCR第67-68页
        5.1.7 数据分析第68页
    5.2 结果与分析第68-69页
    5.3 讨论第69-71页
第六章 烟蚜鞣化激素基因功能分析第71-85页
    6.1 材料与方法第72-80页
        6.1.1 供试昆虫第72页
        6.1.2 主要试剂第72页
        6.1.3 dsRNA的合成第72-77页
        6.1.4 纯化dsRNA第77-78页
        6.1.5 dsRNA质量检测及浓度测定第78页
        6.1.6 饲喂dsRNA第78-80页
        6.1.7 RNAi水平检测和表型观察第80页
    6.2 结果与分析第80-83页
        6.2.1 dsRNA合成第80-81页
        6.2.2 定量PCR检测基因的沉默效率第81页
        6.2.3 RNAi效果的观察第81-83页
    6.3 讨论第83-85页
第七章 总结与展望第85-88页
    7.1 主要研究结果第85-87页
        7.1.1 烟蚜不同虫态及翅型转录组分析第85页
        7.1.2 烟蚜鞣化激素基因全长序列的获得第85-86页
        7.1.3 烟蚜鞣化激素基因生物信息学分析第86页
        7.1.4 烟蚜鞣化激素基因发育阶段表达特异性分析第86-87页
        7.1.5 烟蚜鞣化激素基因功能分析第87页
    7.2 论文创新点第87页
    7.3 论文不足及展望第87-88页
致谢第88-90页
参考文献第90-96页
附录第96-97页
    一、获奖情况第96页
    二、参加科研项目第96页
    三、参加的学术会议第96页
    四、发表的文章第96-97页

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