| 中文摘要 | 第3-6页 |
| 英文摘要 | 第6-16页 |
| 缩略词表 | 第16-18页 |
| 1 绪论 | 第18-36页 |
| 1.1 引言 | 第18页 |
| 1.2 金黄色葡萄球菌 | 第18-20页 |
| 1.2.1 胞内金黄色葡萄球菌 | 第18-19页 |
| 1.2.2 金黄色葡萄球菌逃避宿主免疫防御的机制 | 第19-20页 |
| 1.3 抗生素治疗胞内菌 | 第20-24页 |
| 1.3.1 抗生素的胞内摄取、蓄积和分布 | 第20-22页 |
| 1.3.2 抗生素的胞内抗菌活性 | 第22-23页 |
| 1.3.3 现有抗生素治疗胞内菌面临的挑战 | 第23-24页 |
| 1.4 抗胞内菌的靶向载药体系开发 | 第24-26页 |
| 1.4.1 脂质体 | 第24-25页 |
| 1.4.2 固体脂质纳米粒 | 第25页 |
| 1.4.3 纳米聚合物颗粒 | 第25页 |
| 1.4.4 树枝状大分子 | 第25页 |
| 1.4.5 类脂囊泡 | 第25-26页 |
| 1.4.6 抗体 | 第26页 |
| 1.5 外泌体作为药物递送载体 | 第26-34页 |
| 1.5.1 外泌体的定义和来源 | 第26页 |
| 1.5.2 外泌体的形成和分泌 | 第26-27页 |
| 1.5.3 外泌体的结构组成 | 第27页 |
| 1.5.4 外泌体的摄取机制 | 第27-29页 |
| 1.5.5 外泌体的生物学功能 | 第29-30页 |
| 1.5.6 外泌体作为药物递送载体 | 第30-31页 |
| 1.5.7 外泌体作为药物载体在临床实验中的应用 | 第31-34页 |
| 1.5.8 外泌体作为药物递送载体的优势 | 第34页 |
| 1.6 本课题的研究意义与内容 | 第34-36页 |
| 2 小鼠巨噬细胞来源的外泌体制备 | 第36-46页 |
| 2.1 引言 | 第36-37页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第37-39页 |
| 2.2.1 材料 | 第37-38页 |
| 2.2.2 细胞和细菌 | 第38页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第38-39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-43页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第39页 |
| 2.3.2 外泌体的制备 | 第39-40页 |
| 2.3.3 外泌体的含量测定 | 第40页 |
| 2.3.4 Western blot法检测外泌体特异性蛋白 | 第40-42页 |
| 2.3.5 外泌体的粒径分布和Zeta电位测定 | 第42页 |
| 2.3.6 透射电子显微镜观察外泌体的形态 | 第42页 |
| 2.3.7 统计学处理 | 第42-43页 |
| 2.4 结果 | 第43-44页 |
| 2.4.1 外泌体的粒径分布和Zeta电位 | 第43页 |
| 2.4.2 透射电镜下外泌体的形貌表征 | 第43-44页 |
| 2.4.3 外泌体特异性蛋白表达 | 第44页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 3 外泌体负载利奈唑胺治疗胞内MRSA | 第46-64页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第46-49页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.2.2 细胞和细菌 | 第47-48页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第48页 |
| 3.2.4 细菌培养基配制 | 第48-49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第49页 |
| 3.3.2 从细胞培养液中分离外泌体 | 第49页 |
| 3.3.3 ExoLZD的制备 | 第49-50页 |
| 3.3.4 ExoLZD的体外释放 | 第50页 |
| 3.3.5 ExoLZD的细胞摄取实验 | 第50-51页 |
| 3.3.6 ExoLZD的细胞毒性实验 | 第51页 |
| 3.3.7 体外胞内药效实验 | 第51-52页 |
| 3.3.8 体内药效实验 | 第52页 |
| 3.3.9 胞内蓄积实验 | 第52-53页 |
| 3.3.10 胞内命运实验 | 第53页 |
| 3.3.11 动物活体成像 | 第53页 |
| 3.3.12 统计学处理 | 第53页 |
| 3.4 结果 | 第53-61页 |
| 3.4.1 ExoLZD的制备与结构表征 | 第53-54页 |
| 3.4.2 ExoLZD的体外释放 | 第54-55页 |
| 3.4.3 ExoLZD的细胞毒性 | 第55-56页 |
| 3.4.4 ExoLZD的细胞摄取 | 第56-57页 |
| 3.4.5 ExoLZD的药效实验 | 第57-59页 |
| 3.4.6 ExoLZD的胞内蓄积 | 第59页 |
| 3.4.7 ExoLZD的胞内定位 | 第59-60页 |
| 3.4.8 ExoLZD的体内分布 | 第60-61页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第61-64页 |
| 4 外泌体负载万古霉素治疗胞内MRSA | 第64-74页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第64-66页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 4.2.2 细胞和细菌 | 第65页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第65-66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第66页 |
| 4.3.2 外泌体的分离纯化 | 第66页 |
| 4.3.3 ExoVan的制备 | 第66-67页 |
| 4.3.4细胞摄取实验 | 第67页 |
| 4.3.5细胞毒性实验 | 第67页 |
| 4.3.6药效实验 | 第67页 |
| 4.3.7 ExoVan胞内蓄积实验 | 第67页 |
| 4.3.8 统计学处理 | 第67-68页 |
| 4.4 结果 | 第68-72页 |
| 4.4.1 ExoVan的制备与结构表征 | 第68页 |
| 4.4.2 ExoVan的细胞摄取 | 第68-69页 |
| 4.4.3 ExoVan的细胞毒性 | 第69-70页 |
| 4.4.4 ExoVan的药效实验 | 第70-71页 |
| 4.4.5 ExoVan的胞内蓄积 | 第71-72页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第72-74页 |
| 5 外泌体负载calothrixin A治疗胞内MRSA | 第74-82页 |
| 5.1 引言 | 第74页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第74-76页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第74-75页 |
| 5.2.2 细胞和细菌 | 第75页 |
| 5.2.3 仪器设备 | 第75-76页 |
| 5.3 实验方法 | 第76-78页 |
| 5.3.1 细胞培养 | 第76页 |
| 5.3.2 外泌体的分离纯化 | 第76-77页 |
| 5.3.3 ExoCAA的制备 | 第77页 |
| 5.3.4 ExoCAA的表征 | 第77页 |
| 5.3.5 细胞摄取实验 | 第77页 |
| 5.3.6 细胞毒性实验 | 第77-78页 |
| 5.3.7 胞外MIC测定 | 第78页 |
| 5.3.8 胞内药效实验 | 第78页 |
| 5.3.9 统计学处理 | 第78页 |
| 5.4 结果 | 第78-81页 |
| 5.4.1 ExoCAA的制备与结构表征 | 第78-79页 |
| 5.4.2 ExoCAA的细胞摄取 | 第79-80页 |
| 5.4.3 ExoCAA的细胞毒性 | 第80-81页 |
| 5.4.4 胞外MIC测定结果 | 第81页 |
| 5.4.5 胞内药效测定结果 | 第81页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第81-82页 |
| 6 表面功能化的外泌体制备 | 第82-94页 |
| 6.1 引言 | 第82-83页 |
| 6.2 实验材料与仪器 | 第83-85页 |
| 6.2.1 材料 | 第83-84页 |
| 6.2.2 细胞 | 第84页 |
| 6.2.3 仪器设备 | 第84-85页 |
| 6.3 实验方法 | 第85-88页 |
| 6.3.1 L-azidohomoalanine(AHA)4 的合成 | 第85-86页 |
| 6.3.2 DBCO-RohB的合成 | 第86页 |
| 6.3.3 AHA标记的外泌体制备 | 第86-87页 |
| 6.3.4 Western blot法检测AHA外泌体特异性蛋白 | 第87页 |
| 6.3.5 AHA外泌体的表征 | 第87页 |
| 6.3.6 DBCO-RohB偶联AHA外泌体 | 第87页 |
| 6.3.7 DBCO-RohB偶联外泌体胞内传递 | 第87页 |
| 6.3.8 统计学处理 | 第87-88页 |
| 6.4 结果 | 第88-91页 |
| 6.4.1 AHA外泌体的粒径分布和Zeta电位 | 第88页 |
| 6.4.2 透射电镜下AHA外泌体的形貌表征 | 第88-89页 |
| 6.4.3 AHA外泌体特异性蛋白表达 | 第89页 |
| 6.4.4 激光共聚焦显微镜观察DBCO-RohB偶联外泌体的胞内传递 | 第89-91页 |
| 6.5 小结与讨论 | 第91-94页 |
| 7 甘露糖修饰的外泌体负载抗菌药清除胞内MRSA | 第94-114页 |
| 7.1 引言 | 第94页 |
| 7.2 实验材料与仪器 | 第94-97页 |
| 7.2.1 实验材料 | 第94-96页 |
| 7.2.2 细胞和细菌 | 第96页 |
| 7.2.3 仪器设备 | 第96-97页 |
| 7.3 实验方法 | 第97-105页 |
| 7.3.1 DBCO-mannose的合成 | 第97-101页 |
| 7.3.2 细胞培养 | 第101页 |
| 7.3.3 AHA外泌体的分离纯化 | 第101页 |
| 7.3.4 DBCO-mannose偶联AHA外泌体 | 第101-102页 |
| 7.3.5 MExos的荧光标记 | 第102页 |
| 7.3.6 MExoVan的制备 | 第102页 |
| 7.3.7 MExoLy的制备 | 第102-103页 |
| 7.3.8 MExoVan的体外释放 | 第103页 |
| 7.3.9 细胞摄取实验 | 第103页 |
| 7.3.10 细胞毒性实验 | 第103-104页 |
| 7.3.11 胞外MIC测定 | 第104页 |
| 7.3.12 胞内药效实验 | 第104-105页 |
| 7.3.13 MExoVan胞内蓄积实验 | 第105页 |
| 7.3.14 统计学处理 | 第105页 |
| 7.4 结果 | 第105-111页 |
| 7.4.1 MExos的制备 | 第105-106页 |
| 7.4.2 MExoVan和 MExoLy的制备与结构表征 | 第106-107页 |
| 7.4.3 MExos和 Exos的细胞摄取 | 第107-108页 |
| 7.4.4 MExoVan的体外释放 | 第108页 |
| 7.4.5 MExoVan和 MExoLy的细胞毒性 | 第108-109页 |
| 7.4.6 胞外MIC测定结果 | 第109页 |
| 7.4.7 MExoVan和 MExoLy的药效实验 | 第109-111页 |
| 7.4.8 ExoVan的胞内蓄积 | 第111页 |
| 7.5 小结与讨论 | 第111-114页 |
| 8 总结与展望 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-128页 |
| 附录 | 第128-146页 |
| A.作者在攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第128-129页 |
| B.重要化合物谱图 | 第129-144页 |
| C.学位论文数据集 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
