| 缩略词中英文对照表 | 第4-13页 |
| 摘要 | 第13-15页 |
| Abstract | 第15-16页 |
| 第1章 绪论 | 第17-28页 |
| 1.1 对虾白斑综合征病毒 | 第17-19页 |
| 1.1.1 对虾白斑综合征病毒的发现和结构 | 第17-18页 |
| 1.1.2 对虾白斑综合征病毒的宿主和感染模型 | 第18页 |
| 1.1.3 对虾白斑综合征病毒的防治方法 | 第18-19页 |
| 1.2 甲壳动物的免疫系统 | 第19-23页 |
| 1.2.1 免疫系统的概念以及分类 | 第19-20页 |
| 1.2.2 细胞免疫 | 第20-22页 |
| 1.2.3 体液免疫 | 第22-23页 |
| 1.3 甲壳动物抗菌肽 | 第23-27页 |
| 1.3.1 甲壳动物Penaeidins | 第23-24页 |
| 1.3.2 甲壳动物Custins | 第24页 |
| 1.3.3 甲壳动物ALFs | 第24-26页 |
| 1.3.4 抗菌肽在甲壳动物中的应用 | 第26-27页 |
| 1.4 研究技术路线和意义 | 第27-28页 |
| 1.4.1 研究技术路线 | 第27页 |
| 1.4.2 研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第2章 红螯螯虾ALFs的cDNA序列扩增及分析 | 第28-43页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第28页 |
| 2.1.2 主要试剂和耗材 | 第28页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2 方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 PCR所用引物 | 第29-30页 |
| 2.2.2 总RNA提取及cDNA合成 | 第30-31页 |
| 2.2.3 DH5a感受态细胞工程菌的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.4 RACE技术扩增CqALF全长 | 第32-33页 |
| 2.2.5 CqALF的cDNA全长序列验证 | 第33-34页 |
| 2.2.6 CqALF2的ORF扩增 | 第34页 |
| 2.2.7 CqALF序列的信息学分析 | 第34页 |
| 2.3 结果 | 第34-41页 |
| 2.3.1 CqALF2的ORF扩增 | 第34-35页 |
| 2.3.2 ALFs的基因序列分子特征 | 第35-38页 |
| 2.3.3 CqALF的序列全长验证 | 第38-39页 |
| 2.3.4 红螯螯虾ALFs与同源序列对比及进化树分析 | 第39-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第3章 红螯螯虾CqALF的组织分布特性 | 第43-51页 |
| 3.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第43页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第43页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.2 方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 荧光定量PCR引物 | 第44页 |
| 3.2.2 健康红螯螯虾的无WSSV检测 | 第44-45页 |
| 3.2.3 组织器官采集 | 第45页 |
| 3.2.4 总RNA提取和cDNA合成 | 第45页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR检测 | 第45-46页 |
| 3.3 结果 | 第46-49页 |
| 3.3.1 红螯螯虾的无WSSV检测 | 第46-47页 |
| 3.3.2 总RNA提取质量分析 | 第47页 |
| 3.3.3 荧光定量PCR扩增产物的特异性 | 第47-48页 |
| 3.3.4 CqALF基因mRNA水平的组织分布 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第4章 红螯螯虾CqALF重组蛋白的真核表达及纯化 | 第51-59页 |
| 4.1 材料 | 第51-53页 |
| 4.1.1 主要试剂耗材 | 第51页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第51页 |
| 4.1.3 主要溶液配制 | 第51-53页 |
| 4.2 方法 | 第53-55页 |
| 4.2.1 rCqALF的诱导表达流程 | 第53-54页 |
| 4.2.2 rCqALF的亲和层析纯化 | 第54-55页 |
| 4.2.3 rCqALF的质谱鉴定 | 第55页 |
| 4.3 结果 | 第55-57页 |
| 4.3.1 rCqALF的诱导表达 | 第55-56页 |
| 4.3.2 rCqALF表达产物的纯化及鉴定 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-59页 |
| 第5章 红螯螯虾rCqALF免疫活性研究 | 第59-72页 |
| 5.1 材料 | 第59-62页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第59页 |
| 5.1.2 实验用病原微生物 | 第59-60页 |
| 5.1.3 主要试剂耗材 | 第60页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第60页 |
| 5.1.5 主要溶液配制 | 第60-62页 |
| 5.2 方法 | 第62-65页 |
| 5.2.1 克氏原螯虾体内WSSV的增殖纯化 | 第62-63页 |
| 5.2.2 造血组织(Hpt)细胞原代培养 | 第63页 |
| 5.2.3 rCqALF的MIC和MBC检测 | 第63-64页 |
| 5.2.4 细胞泄露实验 | 第64页 |
| 5.2.5 rCqALF对WSSV结构的影响 | 第64页 |
| 5.2.6 rCqALF对WSSV转录复制的影响 | 第64-65页 |
| 5.2.7 rCqALF对活体抗WSSV的保护力实验 | 第65页 |
| 5.3 结果 | 第65-70页 |
| 5.3.1 rCqALF的MIC和MBC | 第65-67页 |
| 5.3.2 rCqALF的抗菌机制 | 第67页 |
| 5.3.3 WSSV的增殖纯化 | 第67-68页 |
| 5.3.4 rCqALF破坏WSSV结构完整性 | 第68-69页 |
| 5.3.5 rCqALF抑制WSSV转录复制 | 第69页 |
| 5.3.6 rCqALF提高螯虾抗WSSV保护力 | 第69-70页 |
| 5.4 讨论 | 第70-72页 |
| 结语 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 在学期间参加的科研项目以及成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
