| 摘要 | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第7-14页 |
| 1.1 桃蛀螟的研究现状 | 第7-8页 |
| 1.1.1 桃蛀螟的发生与危害 | 第7-8页 |
| 1.1.2 桃蛀螟气味结合蛋白的研究进展 | 第8页 |
| 1.2 昆虫触角感器及嗅觉机制 | 第8-9页 |
| 1.3 昆虫气味结合蛋白的研究 | 第9-12页 |
| 1.3.1 气味结合蛋白的分子特征 | 第9-10页 |
| 1.3.2 气味结合蛋白的分类 | 第10页 |
| 1.3.3 气味结合蛋白的表达与分布 | 第10-11页 |
| 1.3.4 气味结合蛋白的功能 | 第11-12页 |
| 1.4 转录组的测序技术 | 第12页 |
| 1.5 研究目的和内容 | 第12-14页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第12-13页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第13-14页 |
| 2 桃蛀螟触角转录组分析 | 第14-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第14页 |
| 2.1.1 供试虫源 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器 | 第14页 |
| 2.2 试验方法 | 第14-19页 |
| 2.2.1 桃蛀螟总RNA提取 | 第14-15页 |
| 2.2.2 RNA质量检测 | 第15页 |
| 2.2.3 cDNA文库构建及Illumina HiSeq 2500测序 | 第15页 |
| 2.2.4 测序数据质量控制 | 第15-16页 |
| 2.2.5 测序数据组装 | 第16页 |
| 2.2.6 Unigene功能注释 | 第16页 |
| 2.2.7 目的基因的鉴定及系统发育分析 | 第16页 |
| 2.2.8 基因表达量统计与差异分析 | 第16-17页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR验证 | 第17-19页 |
| 2.3 结果与分析 | 第19-30页 |
| 2.3.1 RNA提取及质量检测 | 第19页 |
| 2.3.2 测序数据产出统计 | 第19-20页 |
| 2.3.3 组装结果统计 | 第20页 |
| 2.3.4 Unigene功能注释 | 第20-22页 |
| 2.3.5 嗅觉基因的鉴定及系统发育分析 | 第22-27页 |
| 2.3.6 差异基因的筛选 | 第27页 |
| 2.3.7 差异基因的qRT-PCR验证 | 第27-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 3 桃蛀螟性信息素结合蛋白CpunPBP1的表达谱功能分析 | 第32-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第32页 |
| 3.1.2 试验试剂及仪器 | 第32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-38页 |
| 3.2.1 RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
| 3.2.2 CpunPBP1基因片段PCR扩增 | 第33页 |
| 3.2.3 RACE反应 | 第33-34页 |
| 3.2.4 PCR产物纯化 | 第34页 |
| 3.2.5 连接转化 | 第34-35页 |
| 3.2.6 桃蛀螟CpunPBP1序列分析 | 第35页 |
| 3.2.7 Real-time PCR | 第35页 |
| 3.2.8 质粒DNA的提取 | 第35-36页 |
| 3.2.9 表达载体的构建 | 第36页 |
| 3.2.10 Cpun-PBP1蛋白的诱导表达及纯化 | 第36-37页 |
| 3.2.11 荧光竞争结合试验 | 第37页 |
| 3.2.12 数据统计与分析 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-45页 |
| 3.3.1 桃蛀螟CpunPBP1基因扩增产物的克隆及鉴定 | 第38页 |
| 3.3.2 桃蛀螟CpunPBP1基因氨基酸序列分析 | 第38-40页 |
| 3.3.3 桃蛀螟CpunPBP1与其他昆虫气味结合蛋白氨基酸序列比对和系统发育关系分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 桃蛀螟Cpun-PBP1基因的转录表达谱分析 | 第41-42页 |
| 3.3.5 Cpun-PBP1蛋白的表达与纯化 | 第42-43页 |
| 3.3.6 Cpun-PBP1蛋白与不同气味物质结合能力的测定 | 第43-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 4 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| Abstract | 第54-55页 |
| 研究生期间发表论文 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
