| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-32页 |
| 1.1 小分子p53-MDM2结合抑制剂的研究进展 | 第13-23页 |
| 1.1.1 天然产物类抑制剂 | 第15-17页 |
| 1.1.2 肽类小分子抑制剂 | 第17-18页 |
| 1.1.3 药物设计抑制剂 | 第18-21页 |
| 1.1.4 p53-MDM2结合抑制剂杂环螺环氧化吲哚化合物 | 第21-23页 |
| 1.2 抗肿瘤机制的研究进展 | 第23-30页 |
| 1.2.1 肿瘤概述 | 第23-25页 |
| 1.2.2 抑制肿瘤细胞的生长和增殖 | 第25页 |
| 1.2.3 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第25-27页 |
| 1.2.4 阻滞细胞周期 | 第27-28页 |
| 1.2.5 抑制肿瘤细胞的转移 | 第28-29页 |
| 1.2.6 抑制肿瘤新生血管生成 | 第29-30页 |
| 1.3 本课题设计思路的提出 | 第30页 |
| 1.4 本课题研究的目的及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 基于p53-MDM2靶点的氧化吲哚化合物的设计与合成 | 第32-56页 |
| 2.1 实验材料及主要仪器 | 第34-38页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第34-36页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.4 主要试剂配方 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.2.1 设计并合成以p53-MDM2为靶点的氧化吲哚化合物 | 第38-41页 |
| 2.2.2 细胞毒性测定 | 第41-43页 |
| 2.2.3 基于MDM2分子对接模式的筛选 | 第43-44页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第44-55页 |
| 2.3.1 设计并合成以p53-MDM2为靶点的氧化吲哚化合物42个 | 第44-50页 |
| 2.3.2 新型氧化吲哚化合物对肿瘤细胞的细胞毒性实验 | 第50-53页 |
| 2.3.3 先导化合物与MDM2蛋白的分子对接研究 | 第53-55页 |
| 2.4 小结 | 第55-56页 |
| 第三章 新型氧化吲哚化合物对人肺癌A549细胞增殖的作用及机制研究 | 第56-92页 |
| 3.1 实验材料及主要仪器 | 第58-63页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.1.2 主要耗材 | 第58-60页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第60-61页 |
| 3.1.4 主要试剂配方 | 第61-63页 |
| 3.2 实验方法 | 第63-75页 |
| 3.2.1 细胞生长分析 | 第63页 |
| 3.2.2 细胞软琼脂集落形成实验 | 第63-64页 |
| 3.2.3 细胞克隆形成实验 | 第64-66页 |
| 3.2.4 细胞凋亡检测 | 第66-69页 |
| 3.2.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第69-70页 |
| 3.2.6 Western Blotting检测相关蛋白表达 | 第70-72页 |
| 3.2.7 mRNA表达的测定 | 第72-75页 |
| 3.2.8 统计学处理 | 第75页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第75-90页 |
| 3.3.1 A549细胞生长分析 | 第75-76页 |
| 3.3.2 化合物5hh和化合物6hh对人肺癌细胞A549软琼脂集落形成的影响 | 第76-77页 |
| 3.3.3 化合物5hh和化合物6hh对人肺癌细胞A549克隆形成的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.4 化合物5hh和化合物6hh作用A549细胞后的细胞形态学观察 | 第78-80页 |
| 3.3.5 化合物5hh和化合物6hh作用细胞后AO/EB荧光染色结果 | 第80-81页 |
| 3.3.6 流式细胞术检测化合物5hh和化合物6hh作用细胞后的细胞凋亡结果 | 第81-83页 |
| 3.3.7 化合物5hh和化合物6hh作用细胞后对Caspase-3活性的影响 | 第83-84页 |
| 3.3.8 流式细胞术检测化合物5hh作用细胞后对细胞周期的影响 | 第84-85页 |
| 3.3.9 Western Blotting检测化合物5hh和化合物6hh作用细胞后对相关蛋白表达的影响 | 第85-88页 |
| 3.3.10 p53mRNA在肺癌细胞A549中的表达 | 第88-90页 |
| 3.4 小结 | 第90-92页 |
| 第四章 新型氧化吲哚化合物对人肺癌A549细胞侵袭转移的作用及机制研究 | 第92-105页 |
| 4.1 实验材料及主要仪器 | 第93-95页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第93页 |
| 4.1.2 主要耗材 | 第93-94页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第94页 |
| 4.1.4 主要试剂配方 | 第94-95页 |
| 4.2 实验方法 | 第95-97页 |
| 4.2.1 单细胞划痕实验 | 第95页 |
| 4.2.2 Transwell小室迁移实验 | 第95-96页 |
| 4.2.3 Transwell细胞体外侵袭实验 | 第96-97页 |
| 4.2.4 Western Blotting检测相关蛋白表达 | 第97页 |
| 4.2.5 统计学处理 | 第97页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第97-104页 |
| 4.3.1 化合物5hh和化合物6hh对人肺癌A549细胞迁移能力的影响 | 第97-100页 |
| 4.3.2 化合物5hh和化合物6hh对人肺癌A549细胞侵袭能力的影响 | 第100-102页 |
| 4.3.3 Western Blotting检测化合物5hh和化合物6hh作用细胞后对MMP-2蛋白和VEGF蛋白表达的影响 | 第102-104页 |
| 4.4 小结 | 第104-105页 |
| 第五章 新型氧化吲哚化合物对小鼠移植瘤的影响 | 第105-117页 |
| 5.1 实验材料及主要仪器 | 第105-106页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第105页 |
| 5.1.2 主要耗材 | 第105-106页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第106页 |
| 5.2 实验方法 | 第106-109页 |
| 5.2.1 动物急性毒性实验 | 第106-107页 |
| 5.2.2 小鼠Lewis肺癌细胞的培养 | 第107-108页 |
| 5.2.3 构建Lewis肺癌小鼠模型 | 第108-109页 |
| 5.2.4 统计学处理 | 第109页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第109-115页 |
| 5.3.1 化合物5hh对Balb/c小鼠的急性毒性试验结果 | 第109-110页 |
| 5.3.2 化合物6hh对Balb/c小鼠的急性毒性试验结果 | 第110-111页 |
| 5.3.3 C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型的建立 | 第111页 |
| 5.3.4 化合物对C57BL/6小鼠体重的影响 | 第111-112页 |
| 5.3.5 化合物对肿瘤体积随天数增长的抑制效果 | 第112-113页 |
| 5.3.6 化合物对肿瘤重量的抑制效果 | 第113-115页 |
| 5.3.7 化合物5hh和化合物6hh对Lewis肺癌小鼠移植瘤的疗效 | 第115页 |
| 5.4 小结 | 第115-117页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第117-120页 |
| 参考文献 | 第120-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 附录Ⅰ 缩略词表 | 第133-135页 |
| 附录Ⅱ 研究生期间取得成果 | 第135-137页 |
| 附图Ⅰ ~1H and ~(13)C NMR of 5hh | 第137-138页 |
| 附图Ⅱ ~1H and ~(13)C NMR of 6hh | 第138-139页 |
| 附图Ⅲ Different concentrations of compound 5hh on AO/EB staining of A549 | 第139-140页 |
| 附图Ⅳ Different concentrations of compound 5hh on Annexin V-FITC/PI staining of A549 | 第140-141页 |
| 附图Ⅴ WB | 第141-142页 |
| 附图Ⅵ WB | 第142-143页 |
| 附图Ⅶ Invasion | 第143-144页 |
| 附图Ⅷ Lewis lung cancer model | 第144-145页 |
