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Rhodanobacter sp.GS3054菌酶转化法制备人参皂苷Rd的研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-27页
    1.1 人参概述第10-12页
        1.1.1 人参的使用历史第10-11页
        1.1.2 人参的性状及生长环境第11页
        1.1.3 人参的分类第11-12页
    1.2 人参的化学成份和结构第12-17页
        1.2.1 人参皂苷的化学成分第12-14页
        1.2.2 人参皂苷的结构和命名第14-17页
    1.3 人参皂苷的理化性质及药理作用第17-20页
        1.3.1 人参皂苷的理化性质第17-18页
            1.3.1.1 皂苷的水解性第17页
            1.3.1.2 人参皂苷的泡沫及溶血第17-18页
            1.3.1.3 人参皂苷的稳定性第18页
            1.3.1.4 皂苷的显色反应第18页
        1.3.2 人参皂苷的药理作用第18-20页
    1.4 人参皂苷的提取与分离第20-23页
        1.4.1 人参皂苷的提取第20-21页
            1.4.1.1 有机溶剂提取法第21页
            1.4.1.2 超声波提取法第21页
            1.4.1.3 超临界流体提取法第21页
        1.4.2 人参皂苷的分析鉴定第21-23页
            1.4.2.1 薄层层析第21-22页
            1.4.2.2 高效液相色谱第22页
            1.4.2.3 核磁共振第22页
            1.4.2.4 高效液相色谱一质谱联用第22-23页
            1.4.2.5 酶联免疫第23页
    1.5 人参皂苷酶蛋白的分离提纯第23-24页
        1.5.1 酶蛋白的制备第23-24页
        1.5.2 酶蛋白的纯度分析第24页
    1.6 人参皂苷转化方面的研究进展第24-25页
        1.6.1 酸水解法第24页
        1.6.2 生物转化法第24-25页
    1.7 人参制品的发展趋势第25-26页
    1.8 本论文研究的目的及意义第26-27页
第二章 材料与方法第27-37页
    2.1 实验材料第27页
    2.2 实验方法第27-37页
        2.2.1 菌种的筛选第27页
        2.2.2 产酶最适条件的确定第27-29页
            2.2.2.1 最适培养基的确定第27-28页
            2.2.2.2 最适诱导物的确定第28页
            2.2.2.3 最适产酶温度的确定第28-29页
            2.2.2.4 薄层层析法(TLC)第29页
        2.2.3 人参皂苷糖苷酶的分离纯化第29-33页
            2.2.3.1 DEAE阴离子交换树脂第29-31页
            2.2.3.2 人参皂苷糖苷酶纯度的测定第31-33页
        2.2.4 最适酶反应条件的确定(或酶的性质)第33-34页
            2.2.4.1 最适底物浓度的确定第33页
            2.2.4.2 最适PH值的确定第33-34页
            2.2.4.3 最适反应温度的确定第34页
            2.2.4.4 离子对酶反应的影响第34页
        2.2.5 大量反应实验制备人参皂苷Rd粗品第34页
            2.2.5.1 人参皂苷的提取第34页
            2.2.5.2 制备人参皂苷Rd粗品第34页
        2.2.6 产物的分离第34-37页
            2.2.6.1 AB-8大孔树脂吸附第35页
            2.2.6.2 常压硅胶柱分离人参皂苷Rd第35页
            2.2.6.3 高压硅胶柱分离人参皂苷第35-36页
            2.2.6.4 高效液相色谱检测第36-37页
第三章 结果与讨论第37-54页
    3.1 菌种的筛选第37页
    3.2 产酶最适条件的确定第37-42页
        3.2.1 最适诱导物与培养基的确定第37-41页
            3.2.1.1 诱导物浓度的确定第37-39页
            3.2.1.2 最适培养基和最适诱导物的确定第39-41页
        3.2.2 最适产酶温度(培养温度)的确定第41页
        3.2.3 最适产酶时间(培养时间)的确定第41-42页
    3.3 人参皂苷酶分离及纯度检测第42-47页
        3.3.1 酶蛋白的分离提纯第42-43页
        3.3.2 提纯后人参皂苷酶活力的检测第43-44页
        3.3.3 人参皂苷酶纯度第44-47页
            3.3.3.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测提纯酶的纯度第45页
            3.3.3.2 人参皂苷酶分子量的测定第45-46页
            3.3.3.3 纯酶的反应第46-47页
    3.4 人参皂苷酶的性质第47-50页
        3.4.1 最适底物浓度的确定第47页
        3.4.2 最适pH值的确定第47-48页
        3.4.3 最适反应温度的确定第48-49页
        3.4.4 离子对酶反应的影响第49-50页
    3.5 人参皂苷Rd的分离提取第50-54页
        3.5.1 人参二醇类皂苷的提取第50-51页
        3.5.2 硅胶柱分离人参皂苷Rd第51-53页
        3.5.3 人参皂苷单体的提纯及检测第53-54页
            3.5.3.1 人参皂苷单体的精制第53页
            3.5.3.2 人参皂苷单体纯度的检测第53-54页
第四章 结论第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59页

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