| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4-5页 |
| 英文缩略词 | 第9-11页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 问题的提出与研究意义 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第12-19页 |
| 1.2.1 骨关节炎的研究进展 | 第12页 |
| 1.2.2 微环境因素在骨关节炎发生、发展中的作用 | 第12-16页 |
| 1.2.3 NFAT5在骨关节炎的发生和发展中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.4 ZIP8在骨关节炎的发生和发展中的作用 | 第17-19页 |
| 1.3 研究目的与研究内容 | 第19页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第19页 |
| 1.3.2 主要研究内容 | 第19页 |
| 1.4 本文的创新之处 | 第19-20页 |
| 1.5 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 SD大鼠软骨细胞的培养与鉴定 | 第21-30页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第21-24页 |
| 2.2.1 实验细胞 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.4 相关试剂的配置 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.3.1 SD大鼠膝关节软骨细胞的体外培养 | 第24-25页 |
| 2.3.2 软骨细胞的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-28页 |
| 2.4.1 软骨细胞的培养 | 第26-27页 |
| 2.4.2 II型胶原免疫荧光染色鉴定 | 第27页 |
| 2.4.3 甲苯胺蓝染色 | 第27-28页 |
| 2.5 分析讨论 | 第28页 |
| 2.6 实验小结 | 第28-30页 |
| 3 渗透压对大鼠软骨细胞NFAT5和ZIP8表达的影响 | 第30-45页 |
| 3.1 引言 | 第30-31页 |
| 3.2 材料 | 第31-33页 |
| 3.2.1 实验细胞 | 第31页 |
| 3.2.2 实验仪器与耗材 | 第31页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第31-32页 |
| 3.2.4 主要试剂的配制 | 第32-33页 |
| 3.3 试验方法 | 第33-40页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第33页 |
| 3.3.2 不同渗透压处理细胞 | 第33-34页 |
| 3.3.3 测定不同渗透压下细胞的增殖能力 | 第34页 |
| 3.3.4 实时定量RT-qPCR | 第34-37页 |
| 3.3.5 蛋白免疫印迹(Westernblot) | 第37-40页 |
| 3.4 实验结果 | 第40-43页 |
| 3.4.1 不同渗透压对大鼠软骨细胞增殖、形态的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 不同渗透压对大鼠软骨细胞NFAT5和ZIP8表达的影响 | 第41-43页 |
| 3.5 分析讨论 | 第43页 |
| 3.6 实验小结 | 第43-45页 |
| 4 NFAT5参与ZINC-ZIP8-MTF1信号通路的调节 | 第45-55页 |
| 4.1 引言 | 第45-46页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第46页 |
| 4.2.1 实验细胞 | 第46页 |
| 4.2.2 实验仪器及耗材 | 第46页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第46页 |
| 4.3 试验方法 | 第46-47页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第46页 |
| 4.3.2 细胞敲除实验 | 第46-47页 |
| 4.3.3 实时定量RT-qPCR | 第47页 |
| 4.3.4 蛋白免疫印迹(Westernblot) | 第47页 |
| 4.4 实验结果 | 第47-53页 |
| 4.4.1 高渗条件下NFAT5siRNA抑制了NFAT5的表达 | 第47-48页 |
| 4.4.2 NFAT5参与zinc-ZIP8-MTF1信号通路的调节 | 第48-51页 |
| 4.4.3 高渗条件下,ZIP8参与软骨细胞MMP13表达调节 | 第51-53页 |
| 4.5 分析讨论 | 第53页 |
| 4.6 本章小结 | 第53-55页 |
| 5 结论与展望 | 第55-56页 |
| 5.1 主要结论 | 第55页 |
| 5.2 后期展望 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65页 |
| A.作者在攻读学位期间参与的科研项目目录 | 第65页 |
