中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-20页 |
1.1 问题的提出 | 第10页 |
1.2 国内外研究现状 | 第10-17页 |
1.2.1 基质力学对细胞生物学行为的影响 | 第10-12页 |
1.2.2 基质刚度对2D基质上培养的MSCs成骨分化的影响 | 第12-13页 |
1.2.3 基质刚度对3D基质上培养的MSCs成骨分化的影响 | 第13-15页 |
1.2.4 不同程度的氧分压对MSCs成骨分化的影响 | 第15-17页 |
1.3 本文研究目的、意义及主要内容 | 第17-19页 |
1.3.1 本文研究目的及意义 | 第17页 |
1.3.2 本文研究的主要内容 | 第17-18页 |
1.3.3 技术路线 | 第18-19页 |
1.4 本实验创新点 | 第19-20页 |
2 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSC活力及增殖能力的影响 | 第20-31页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料与试剂 | 第20-23页 |
2.2.1 实验动物和细胞 | 第20页 |
2.2.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.2.3 实验仪器及耗材 | 第21-22页 |
2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第22-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-26页 |
2.3.1 脱细胞骨制备 | 第23-24页 |
2.3.2 脱钙骨制备 | 第24页 |
2.3.3 大鼠骨髓MSCs的分离及培养 | 第24页 |
2.3.4 3D支架上MSCs的接种 | 第24-25页 |
2.3.5 3D支架上MSCs的Live/dead染色 | 第25页 |
2.3.6 3D支架上MSCs的MTS检测 | 第25-26页 |
2.3.7 数据统计分析 | 第26页 |
2.4 实验结果 | 第26-29页 |
2.4.1 3D脱钙骨支架的大体观察 | 第26页 |
2.4.2 大鼠MSCs的形态观察 | 第26-27页 |
2.4.3 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs活力的影响 | 第27-28页 |
2.4.4 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs增殖的影响 | 第28-29页 |
2.5 分析讨论 | 第29-30页 |
2.6 本章小结 | 第30-31页 |
3 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs浸润及成骨分化的影响 | 第31-50页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 实验材料与试剂 | 第31-33页 |
3.2.1 实验动物与细胞 | 第31-32页 |
3.2.2 实验试剂 | 第32页 |
3.2.3 实验仪器及耗材 | 第32页 |
3.2.4 主要实验试剂的配制 | 第32-33页 |
3.3 实验方法 | 第33-36页 |
3.3.1 3D支架上MSCs的接种 | 第33页 |
3.3.2 2D条件下MSCs的ALP染色 | 第33页 |
3.3.3 2D条件下MSCs的茜素红S染色 | 第33页 |
3.3.4 3D支架上MSCs的ALP染色 | 第33页 |
3.3.5 细胞/支架复合物石蜡切片的制备 | 第33-34页 |
3.3.6 细胞/支架复合物石蜡切片的HE染色 | 第34页 |
3.3.7 细胞/支架复合物石蜡切片的Masson染色 | 第34-35页 |
3.3.8 细胞/支架复合物石蜡切片的OC免疫组化染色 | 第35页 |
3.3.9 细胞/支架复合物石蜡切片的OPN免疫组化染色 | 第35页 |
3.3.10 细胞/支架复合物石蜡切片的VEGF免疫组化染色 | 第35页 |
3.3.11 细胞/支架复合物石蜡切片的HIF-1α免疫荧光染色染色 | 第35-36页 |
3.4 实验结果 | 第36-47页 |
3.4.1 低氧对2D基质上MSCs成骨分化的影响 | 第36-38页 |
3.4.2 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs浸润及ECM分泌的影响 | 第38-39页 |
3.4.3 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs胶原沉积的影响 | 第39-40页 |
3.4.4 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs成骨分化的影响 | 第40-45页 |
3.4.5 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs的HIF-1α表达的影响 | 第45-46页 |
3.4.6 低氧对不同基质刚度脱钙骨支架上MSCs的VEGF表达的影响 | 第46-47页 |
3.5 分析讨论 | 第47-49页 |
3.6 本章小结 | 第49-50页 |
4 结论及后续工作展望 | 第50-51页 |
4.1 主要结论 | 第50页 |
4.2 后续工作建议 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |