中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第13-41页 |
1.1 溶瘤腺病毒与肿瘤 | 第13-20页 |
1.1.1 溶瘤腺病毒简介 | 第13-14页 |
1.1.2 溶瘤腺病毒与肿瘤细胞 | 第14页 |
1.1.3 肿瘤腺病毒在肿瘤细胞中的特异性转导和复制 | 第14-16页 |
1.1.4 实体肿瘤内肿瘤腺病毒传播的物理障碍 | 第16-17页 |
1.1.5 实体瘤有效抗肿瘤作用的免疫屏障 | 第17-19页 |
1.1.6 溶瘤腺病毒与细胞凋亡 | 第19-20页 |
1.1.7 展望 | 第20页 |
1.2 痘苗病毒与免疫调节 | 第20-33页 |
1.2.1 痘苗病毒简介 | 第20-22页 |
1.2.2 天花和其他人畜共患病病毒的持续威胁 | 第22-23页 |
1.2.3 天花和其他痘病毒疫苗的研制 | 第23-24页 |
1.2.4 对病毒感染的免疫反应:有效疫苗的基础 | 第24-26页 |
1.2.5 以抑制痘苗病毒免疫应答的基因药物 | 第26-33页 |
1.2.6 展望 | 第33页 |
1.3 病毒的内吞 | 第33-41页 |
1.3.1 网格蛋白介导的病毒内吞(CME) | 第33-35页 |
1.3.2 小窝/脂筏介导的病毒内吞 | 第35-36页 |
1.3.3 病毒与巨胞饮 | 第36-38页 |
1.3.4 通过巨胞饮内化入胞的病毒 | 第38-41页 |
第二章 重组腺病毒对胰腺癌细胞抑制作用的体外研究 | 第41-60页 |
2.1 前言 | 第41-42页 |
2.2 实验材料 | 第42-43页 |
2.2.1 细胞和重组腺病毒 | 第42页 |
2.2.2 实验试剂与仪器设备 | 第42-43页 |
2.3 实验方法 | 第43-47页 |
2.3.1 细胞的制备 | 第43页 |
2.3.2 重组腺病毒的扩增及测定病毒滴度 | 第43-44页 |
2.3.3 MTS检测 | 第44-45页 |
2.3.4 AO/EB染色 | 第45页 |
2.3.5 DAPI染色 | 第45-46页 |
2.3.6 AnnexinV-FITC/PI检测 | 第46页 |
2.3.7 Casepase酶活性检测 | 第46-47页 |
2.3.8 统计学处理 | 第47页 |
2.4 实验结果 | 第47-57页 |
2.4.1 重组腺病毒对人胰腺癌细胞MIA-PaCa-2的抑制作用 | 第47-52页 |
2.4.2 AO/EB染色结果 | 第52-54页 |
2.4.3 DAPI染色结果 | 第54-55页 |
2.4.4 AnnexinV-FITC/PI流式检测结果 | 第55-56页 |
2.4.5 Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测结果 | 第56-57页 |
2.5 讨论 | 第57-59页 |
2.6 小结 | 第59-60页 |
第三章 重组腺病毒对胰腺癌抑制作用的体内研究 | 第60-71页 |
3.1 前言 | 第60-61页 |
3.2 实验材料 | 第61页 |
3.2.1 细胞和重组腺病毒 | 第61页 |
3.2.2 实验动物 | 第61页 |
3.2.3 实验试剂与仪器设备 | 第61页 |
3.3 实验方法 | 第61-64页 |
3.3.1 细胞的制备、重组腺病毒的扩增及测定病毒滴度 | 第61-63页 |
3.3.2 裸鼠皮下荷瘤模型的建立 | 第63页 |
3.3.3 裸鼠皮下肿瘤体积的测定 | 第63页 |
3.3.4 裸鼠皮下肿瘤的治疗 | 第63页 |
3.3.5 裸鼠生存期的测定 | 第63-64页 |
3.3.6 细胞因子检测 | 第64页 |
3.3.7 统计学处理 | 第64页 |
3.4 实验结果 | 第64-68页 |
3.4.1 BALB/c裸鼠各治疗组的肿瘤生长曲线 | 第64-66页 |
3.4.2 裸鼠的生存曲线 | 第66页 |
3.4.3 细胞因子检测 | 第66-68页 |
3.5 讨论 | 第68-69页 |
3.6 小结 | 第69-71页 |
第四章 重组痘苗病毒的构建和毒力分析 | 第71-89页 |
4.1 前言 | 第71页 |
4.2 实验材料 | 第71-72页 |
4.2.1 细胞、质粒和菌种 | 第71-72页 |
4.2.2 实验试剂与仪器设备 | 第72页 |
4.3 实验方法 | 第72-80页 |
4.3.1 质粒的设计与合成 | 第72-73页 |
4.3.2 质粒的转化、提取与酶切 | 第73-74页 |
4.3.3 产物的转化与鉴定 | 第74-75页 |
4.3.4 重组痘苗病毒rVTT-J-EGFP+构建 | 第75-76页 |
4.3.5 重组痘苗病毒rVTT-J-构建 | 第76-77页 |
4.3.6 重组痘苗病毒rVTT-J-鉴定 | 第77页 |
4.3.7 重组痘苗病毒rVTT-J-A35-EGFP+构建和鉴定 | 第77页 |
4.3.8 重组痘苗病毒遗传稳定性检测 | 第77-78页 |
4.3.9 重组痘苗病毒的滴度测定 | 第78页 |
4.3.10 重组痘苗病毒形态学观察 | 第78页 |
4.3.11 重组痘苗病毒生长趋势 | 第78-79页 |
4.3.12 结晶紫染色实验 | 第79页 |
4.3.13 MTS检测 | 第79-80页 |
4.4 实验结果 | 第80-86页 |
4.4.1 重组质粒的构建和鉴定结果 | 第80-82页 |
4.4.2 重组痘苗病毒rVTT-J-A35-EGFP+构建和鉴定结果 | 第82-83页 |
4.4.3 重组痘苗病毒rVTT-J-A35-EGFP+遗传稳定性鉴定结果 | 第83页 |
4.4.4 重组痘苗病毒的形态学观察结果 | 第83页 |
4.4.5 重组痘苗病毒的生长趋势 | 第83-84页 |
4.4.6 重组痘苗病毒的细胞毒性检测结果 | 第84-85页 |
4.4.7 结晶紫染色结果 | 第85-86页 |
4.5 讨论 | 第86-88页 |
4.6 小结 | 第88-89页 |
第五章 纳米材料代替病毒研究病毒大小对其内吞机制的影响 | 第89-95页 |
5.1 前言 | 第89页 |
5.2 实验材料 | 第89-90页 |
5.3 实验方法 | 第90-91页 |
5.3.1 MSNs的制备 | 第90页 |
5.3.2 MSNs大小的电镜验证 | 第90页 |
5.3.3 MSNs入胞实验 | 第90-91页 |
5.4 实验结果 | 第91-94页 |
5.4.1 MSNs的尺寸验证 | 第91页 |
5.4.2 不同尺寸MSNs的内化研究 | 第91-94页 |
5.5 讨论 | 第94-95页 |
第六章 结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-109页 |
致谢 | 第109页 |