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重组病毒杀伤及巨胞饮实验研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第13-41页
    1.1 溶瘤腺病毒与肿瘤第13-20页
        1.1.1 溶瘤腺病毒简介第13-14页
        1.1.2 溶瘤腺病毒与肿瘤细胞第14页
        1.1.3 肿瘤腺病毒在肿瘤细胞中的特异性转导和复制第14-16页
        1.1.4 实体肿瘤内肿瘤腺病毒传播的物理障碍第16-17页
        1.1.5 实体瘤有效抗肿瘤作用的免疫屏障第17-19页
        1.1.6 溶瘤腺病毒与细胞凋亡第19-20页
        1.1.7 展望第20页
    1.2 痘苗病毒与免疫调节第20-33页
        1.2.1 痘苗病毒简介第20-22页
        1.2.2 天花和其他人畜共患病病毒的持续威胁第22-23页
        1.2.3 天花和其他痘病毒疫苗的研制第23-24页
        1.2.4 对病毒感染的免疫反应:有效疫苗的基础第24-26页
        1.2.5 以抑制痘苗病毒免疫应答的基因药物第26-33页
        1.2.6 展望第33页
    1.3 病毒的内吞第33-41页
        1.3.1 网格蛋白介导的病毒内吞(CME)第33-35页
        1.3.2 小窝/脂筏介导的病毒内吞第35-36页
        1.3.3 病毒与巨胞饮第36-38页
        1.3.4 通过巨胞饮内化入胞的病毒第38-41页
第二章 重组腺病毒对胰腺癌细胞抑制作用的体外研究第41-60页
    2.1 前言第41-42页
    2.2 实验材料第42-43页
        2.2.1 细胞和重组腺病毒第42页
        2.2.2 实验试剂与仪器设备第42-43页
    2.3 实验方法第43-47页
        2.3.1 细胞的制备第43页
        2.3.2 重组腺病毒的扩增及测定病毒滴度第43-44页
        2.3.3 MTS检测第44-45页
        2.3.4 AO/EB染色第45页
        2.3.5 DAPI染色第45-46页
        2.3.6 AnnexinV-FITC/PI检测第46页
        2.3.7 Casepase酶活性检测第46-47页
        2.3.8 统计学处理第47页
    2.4 实验结果第47-57页
        2.4.1 重组腺病毒对人胰腺癌细胞MIA-PaCa-2的抑制作用第47-52页
        2.4.2 AO/EB染色结果第52-54页
        2.4.3 DAPI染色结果第54-55页
        2.4.4 AnnexinV-FITC/PI流式检测结果第55-56页
        2.4.5 Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测结果第56-57页
    2.5 讨论第57-59页
    2.6 小结第59-60页
第三章 重组腺病毒对胰腺癌抑制作用的体内研究第60-71页
    3.1 前言第60-61页
    3.2 实验材料第61页
        3.2.1 细胞和重组腺病毒第61页
        3.2.2 实验动物第61页
        3.2.3 实验试剂与仪器设备第61页
    3.3 实验方法第61-64页
        3.3.1 细胞的制备、重组腺病毒的扩增及测定病毒滴度第61-63页
        3.3.2 裸鼠皮下荷瘤模型的建立第63页
        3.3.3 裸鼠皮下肿瘤体积的测定第63页
        3.3.4 裸鼠皮下肿瘤的治疗第63页
        3.3.5 裸鼠生存期的测定第63-64页
        3.3.6 细胞因子检测第64页
        3.3.7 统计学处理第64页
    3.4 实验结果第64-68页
        3.4.1 BALB/c裸鼠各治疗组的肿瘤生长曲线第64-66页
        3.4.2 裸鼠的生存曲线第66页
        3.4.3 细胞因子检测第66-68页
    3.5 讨论第68-69页
    3.6 小结第69-71页
第四章 重组痘苗病毒的构建和毒力分析第71-89页
    4.1 前言第71页
    4.2 实验材料第71-72页
        4.2.1 细胞、质粒和菌种第71-72页
        4.2.2 实验试剂与仪器设备第72页
    4.3 实验方法第72-80页
        4.3.1 质粒的设计与合成第72-73页
        4.3.2 质粒的转化、提取与酶切第73-74页
        4.3.3 产物的转化与鉴定第74-75页
        4.3.4 重组痘苗病毒rVTT-J-EGFP+构建第75-76页
        4.3.5 重组痘苗病毒rVTT-J-构建第76-77页
        4.3.6 重组痘苗病毒rVTT-J-鉴定第77页
        4.3.7 重组痘苗病毒rVTT-J-A35-EGFP+构建和鉴定第77页
        4.3.8 重组痘苗病毒遗传稳定性检测第77-78页
        4.3.9 重组痘苗病毒的滴度测定第78页
        4.3.10 重组痘苗病毒形态学观察第78页
        4.3.11 重组痘苗病毒生长趋势第78-79页
        4.3.12 结晶紫染色实验第79页
        4.3.13 MTS检测第79-80页
    4.4 实验结果第80-86页
        4.4.1 重组质粒的构建和鉴定结果第80-82页
        4.4.2 重组痘苗病毒rVTT-J-A35-EGFP+构建和鉴定结果第82-83页
        4.4.3 重组痘苗病毒rVTT-J-A35-EGFP+遗传稳定性鉴定结果第83页
        4.4.4 重组痘苗病毒的形态学观察结果第83页
        4.4.5 重组痘苗病毒的生长趋势第83-84页
        4.4.6 重组痘苗病毒的细胞毒性检测结果第84-85页
        4.4.7 结晶紫染色结果第85-86页
    4.5 讨论第86-88页
    4.6 小结第88-89页
第五章 纳米材料代替病毒研究病毒大小对其内吞机制的影响第89-95页
    5.1 前言第89页
    5.2 实验材料第89-90页
    5.3 实验方法第90-91页
        5.3.1 MSNs的制备第90页
        5.3.2 MSNs大小的电镜验证第90页
        5.3.3 MSNs入胞实验第90-91页
    5.4 实验结果第91-94页
        5.4.1 MSNs的尺寸验证第91页
        5.4.2 不同尺寸MSNs的内化研究第91-94页
    5.5 讨论第94-95页
第六章 结论第95-96页
参考文献第96-109页
致谢第109页

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