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吉西他滨及低剂量辐射对巨核细胞发育和血小板生成的影响及机制研究

前言第4-6页
中文摘要第6-11页
Abstract第11-16页
中英文缩略词对照表第20-21页
第1章 绪论第21-23页
第2章 综述第23-35页
    2.1 血小板的简介及来源第23页
    2.2 巨核细胞的增殖、分化与成熟第23-26页
        2.2.1 巨核细胞的来源第23页
        2.2.2 巨核细胞的发育第23-26页
    2.3 巨核细胞发育的调控因素第26-29页
        2.3.1 细胞因子第26-27页
        2.3.2 核转录因子第27-28页
        2.3.3 细胞周期相关蛋白第28-29页
        2.3.4 细胞之间相互作用第29页
    2.4 血小板生成与释放第29-31页
        2.4.1 细胞骨架参与血小板生成与释放第29-30页
        2.4.2 血小板生成与巨核细胞凋亡第30-31页
    2.5 放疗与化疗导致的血小板减少第31-32页
    2.6 低剂量辐射的兴奋性效应与适应性反应第32页
    2.7 总结与展望第32-33页
    2.8 立题依据第33-35页
第3章 实验材料与方法第35-49页
    3.1 主要器材与试剂第35-38页
        3.1.1 主要实验器材第35-36页
        3.1.2 主要实验试剂第36-38页
    3.2 原代巨核细胞培养、诱导、分离与纯化第38-40页
    3.3 实验方法第40-49页
        3.3.1 WST-1 法检测不同浓度吉西他滨对胎肝细胞分化为巨核细胞过程中的细胞增殖的影响第40页
        3.3.2 流式细胞术检测吉西他滨对胎肝细胞分化为巨核细胞过程中的多倍体形成的影响第40-41页
        3.3.3 流式细胞术检测吉西他滨对胎肝细胞分化为巨核细胞过程中的CD41~+/ CD61~+表达的影响第41页
        3.3.4 流式细胞术检测吉西他滨对胎肝细胞分化为巨核细胞过程中的细胞凋亡的影响第41页
        3.3.5 流式细胞术检测吉西他滨作用后小鼠体内血小板的寿命第41-42页
        3.3.6 活细胞微分干涉相差显微镜观察第42页
        3.3.7 细胞总RNA提取第42-43页
        3.3.8 cDNA的制备:第43页
        3.3.9 Real-time PCR(实时定量)反应:第43页
        3.3.10 蛋白免疫印迹法第43-45页
        3.3.11 免疫荧光检测观察巨核细胞细胞骨架变化第45-46页
        3.3.12 透射电镜制样、切片及拍照第46-47页
        3.3.13 ELISA检测小鼠血清中TPO、SDF-1 和IL-1 因子水平第47-48页
        3.3.14 X 线照射第48页
        3.3.15 统计学方法第48-49页
第4章 结果第49-63页
    4.1 吉西他滨可抑制巨核细胞的增殖、多倍体形成和分化成熟第49-53页
        4.1.1 吉西他滨对巨核细胞的增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性第49-50页
        4.1.2 吉西他滨可抑制巨核细胞多倍体形成第50-51页
        4.1.3 吉西他滨可抑制巨核细胞的成熟分化第51-52页
        4.1.4 吉西他滨不影响巨核细胞的细胞凋亡第52-53页
    4.2 吉西他滨抑制胎肝细胞来源的巨核细胞生成前血小板及血小板释放第53-54页
    4.3 吉西他滨抑制巨核细胞增殖、分化及释放血小板的机制研究第54-56页
        4.3.1 吉西他滨对巨核细胞发育相关的转录因子GATA-1、NF-E2、Fli-1 及细胞周期相关基因p21、Cyclin D1、Cyclin E1的表达的影响第54-55页
        4.3.2 吉西他滨对巨核细胞发育相关信号转导通路蛋白表达的影响第55-56页
    4.4 在小鼠体内吉西他滨对巨核细胞增殖、发育及血小板生成的作用第56-59页
        4.4.1 吉西他滨可引起小鼠体内血小板计数下降第56-57页
        4.4.2 吉西他滨不影响小鼠体内血小板寿命第57-58页
        4.4.3 吉西他滨对小鼠肝脏TPO m RNA及血清中TPO、IL-1、SDF-1 的影响第58页
        4.4.4 吉西他滨处理后小鼠骨髓巨核细胞数量及形态变化第58-59页
    4.5 低剂量辐射可促进巨核细胞增殖及分化成熟及血小板生成、释放第59-62页
        4.5.1 低剂量辐射促进巨核细胞的增殖作用呈剂量和时间依赖性第59-60页
        4.5.2 LDR可促进巨核细胞多倍体形成第60-61页
        4.5.3 LDR可促进巨核细胞的成熟分化第61页
        4.5.4 LDR对巨核细胞生成前血小板及血小板释放的影响第61-62页
    4.6 LDR可减轻化疗药物吉西他滨引起的血小板减少的程度第62-63页
第5章 讨论第63-69页
第6章 结论第69-71页
参考文献第71-81页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第81-83页
致谢第83页

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