| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 英文缩略语 | 第15-22页 |
| 第一部分：饮酒对高脂高胆固醇饮食所致肝脏炎症和纤维化进展的影响 | 第22-49页 |
| 1 前言 | 第22-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-34页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 大鼠模型的建立 | 第27-28页 |
| 2.2.2 小鼠模型的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.3 标本采集 | 第29-30页 |
| 2.2.4 组织病理制作 | 第30页 |
| 2.2.5 H&E染色 | 第30页 |
| 2.2.6 油红O染色 | 第30-31页 |
| 2.2.7 Siriusred染色 | 第31页 |
| 2.2.8 病理评分 | 第31-32页 |
| 2.2.9 血液生化指标检测 | 第32页 |
| 2.2.10 大鼠血浆内毒素水平测定 | 第32页 |
| 2.3 统计学分析 | 第32-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-44页 |
| 3.1 造模期间实验动物生长情况和一般情况 | 第34页 |
| 3.1.1 动物生长情况 | 第34页 |
| 3.1.2 大鼠模型中动物热量摄入 | 第34页 |
| 3.1.3 实验动物死亡情况 | 第34页 |
| 3.2 长期高脂高胆固醇饮食对肝指数造成明显影响 | 第34-35页 |
| 3.3 二锅头未显著增加高脂高胆固醇饮食大鼠血清ALP和AST水平 | 第35-36页 |
| 3.4 二锅头和乙醇未增加门静脉内毒素水平 | 第36页 |
| 3.5 长期适量饮酒对高脂高胆固醇饮食大鼠的肝脏组织学影响 | 第36-40页 |
| 3.5.1 脂肪变情况 | 第37-38页 |
| 3.5.2 炎症改变 | 第38-39页 |
| 3.5.3 各大鼠肝组织纤维化情况 | 第39-40页 |
| 3.6 单次乙醇和二锅头增加血清ALT和AST水平 | 第40页 |
| 3.7 小鼠肝组织的组织学改变 | 第40-44页 |
| 3.7.1 单次乙醇和二锅头加重HFD的肝脏脂肪变程度 | 第40-41页 |
| 3.7.2 单次大剂量乙醇和二锅头导致肝脏出现炎症 | 第41-42页 |
| 3.7.3 各组肝脏未出现纤维化 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 第二部分：小剂量乙醇对Kupffer细胞活化的作用及IL-1β在肝星状细胞活化中的作用研究 | 第49-66页 |
| 1 前言 | 第49-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-58页 |
| 2.1 RAW264.7细胞的培养及细胞存活率的测定 | 第51页 |
| 2.2 低剂量乙醇对巨噬细胞活化的作用 | 第51-52页 |
| 2.3 IL-1β在肝星状细胞活化中的作用 | 第52-56页 |
| 2.3.1 大鼠星状细胞系HSC-T6细胞的培养 | 第52-53页 |
| 2.3.2 IL-1β重组蛋白与LPS刺激HSC-T6细胞 | 第53页 |
| 2.3.3 细胞总RNA提取 | 第53页 |
| 2.3.4 罗氏逆转录 | 第53-54页 |
| 2.3.5 qPCR | 第54-55页 |
| 2.3.6 细胞蛋白的提取 | 第55页 |
| 2.3.7 BCA法测定细胞蛋白浓度 | 第55页 |
| 2.3.8 蛋白变性 | 第55页 |
| 2.3.9 Western blot检测α-SMA的蛋白表达 | 第55-56页 |
| 2.4 IL-1β siRNA降低肝星状细胞的IL-1β表达及肝星状细胞活化的研究 | 第56-57页 |
| 2.4.1 IL-1β siRNA的设计和合成 | 第56页 |
| 2.4.2 HSC-T6细胞培养 | 第56-57页 |
| 2.4.3 试剂的配制及干预 | 第57页 |
| 2.5 统计学分析 | 第57-58页 |
| 3 实验结果 | 第58-63页 |
| 3.1 低剂量乙醇对巨噬细胞活化的影响 | 第58-59页 |
| 3.1.1 低剂量乙醇对巨噬细胞存活率的影响 | 第58页 |
| 3.1.2 小剂量乙醇降低LPS引起的巨噬细胞活化 | 第58-59页 |
| 3.4 IL-1β对HSC-T6细胞活化的作用 | 第59-62页 |
| 3.4.1 IL-1β未促进HSC-T6细胞活化 | 第59-60页 |
| 3.4.2 在LPS作用的基础上,IL-1β促进HSC-T6细胞持续活化 | 第60-62页 |
| 3.5 IL-1β siRNA降低HSC-T6细胞活化 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 第三部分：IL-1β对大鼠肝脏炎症和纤维化影响的研究 | 第66-82页 |
| 1 前言 | 第66-67页 |
| 2 材料与方法 | 第67-71页 |
| 2.1 大鼠肝组织mRNA测序 | 第67页 |
| 2.1.1 肝脏组织的准备 | 第67页 |
| 2.1.2 mRNA测序 | 第67页 |
| 2.2 RT-qPCR | 第67-69页 |
| 2.2.1 组织总RNA提取 | 第67-68页 |
| 2.2.2 罗氏逆转录 | 第68页 |
| 2.2.3 qPCR | 第68-69页 |
| 2.3 免疫组化 | 第69-70页 |
| 2.4 统计学分析 | 第70-71页 |
| 3 实验结果 | 第71-79页 |
| 3.1 大鼠肝组织的mRNA测序 | 第71-74页 |
| 3.1.1 测序样品质检 | 第71页 |
| 3.1.2 测序样本间生物学重复性的检验 | 第71-72页 |
| 3.1.3 测序样本间差异表达基因的筛选 | 第72页 |
| 3.1.4 测序样本间差异基因聚类分析 | 第72页 |
| 3.1.5 白介素家族部分基因表达情况 | 第72-73页 |
| 3.1.6 RT-qPCR方法验证IL-1β和IL-33基因在大鼠肝脏中表达 | 第73-74页 |
| 3.2 肝脏炎症和纤维化基因及蛋白的表达差异 | 第74-79页 |
| 3.2.1 适量二锅头及酒精降低高脂高胆固醇饮食引起的Kupffer细胞活化及下游炎症因子的释放 | 第74-76页 |
| 3.2.2 适量二锅头和酒精降低高脂高胆固醇饮食引起的趋化因子和其它炎症介质的表达 | 第76-77页 |
| 3.2.3 适量二锅头和酒精降低高脂高胆固醇饮食引起的肝星状细胞活化及纤维化程度 | 第77-79页 |
| 4 讨论 | 第79-81页 |
| 5 结论 | 第81-82页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 综述 | 第91-104页 |
| 参考文献 | 第98-104页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 个人简历 | 第106页 |
