摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第11-16页 |
第一部分 :布拉氏酵母菌对小鼠实验性结肠炎的疗效 | 第16-43页 |
1 前言 | 第16-18页 |
2 材料和方法 | 第18-27页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 药品与试剂 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验对象与分组 | 第19页 |
2.2.1 实验动物 | 第19页 |
2.2.2 实验分组 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-24页 |
2.3.1 BALB/c小鼠实验性结肠炎模型的建立 | 第19页 |
2.3.2 动物的处理 | 第19-20页 |
2.3.3 结肠炎活动程度的评估 | 第20页 |
2.3.4 结肠病理切片 | 第20-21页 |
2.3.5 组织学损伤的评估 | 第21页 |
2.3.6 免疫组织化学 | 第21-22页 |
2.3.7 Real-TimePCR方法检测结肠组织中occludin、claudin-1和ITF的mRNA水平 | 第22-24页 |
2.4 Westernblot技术检测occludin、claudin-1的蛋白表达 | 第24-26页 |
2.4.1 组织总蛋白取 | 第24页 |
2.4.2 BCA法进行蛋白定量 | 第24-25页 |
2.4.3 蛋白样品的制备 | 第25页 |
2.4.4 SDS–PAGE凝胶电泳 | 第25页 |
2.4.5 湿法转印蛋白至PVDF膜 | 第25页 |
2.4.6 封闭 | 第25-26页 |
2.4.7 孵育一抗 | 第26页 |
2.4.8 孵育二抗 | 第26页 |
2.4.9 ECL底物发光 | 第26页 |
2.5 统计学处理 | 第26-27页 |
3 实验结果 | 第27-40页 |
3.1 一般情况 | 第27-28页 |
3.1.1 一般状态 | 第27页 |
3.1.2 小鼠体重变化 | 第27-28页 |
3.2 DAI评分 | 第28-29页 |
3.3 组织损伤评分 | 第29-30页 |
3.4 病理组织学照片 | 第30-31页 |
3.5 Real-timePCR、免疫组化、Westernblot检测各组小鼠结肠组织中紧密连接蛋白(occludin、claudin-1)和ITF的表达 | 第31-40页 |
3.5.1 occludin | 第31-35页 |
3.5.2 claudin-1 | 第35-39页 |
3.5.3 ITF | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
第二部分 :布拉氏酵母菌对实验性结肠炎小鼠结肠组织中缺氧诱导因子的作用 | 第43-74页 |
1 前言 | 第43-45页 |
2 材料和方法 | 第45-52页 |
2.1 实验材料 | 第45-46页 |
2.1.1 药品与试剂 | 第45页 |
2.1.2 主要仪器 | 第45-46页 |
2.2 实验方法 | 第46-51页 |
2.2.1 免疫组织化学 | 第46页 |
2.2.2 Real-TimePCR方法检测结肠组织中各mRNA的表达 | 第46-49页 |
2.2.3 Westernblot技术检测HIF-1α、EPAS1、E-cadherin、vimentin、VEGF、IL-6的蛋白表达 | 第49-51页 |
2.3 统计学处理 | 第51-52页 |
3 实验结果 | 第52-68页 |
3.1 Real-timePCR、免疫组化、Westernblot检测各组小鼠结肠组织中HIF-1α的表达 | 第52-55页 |
3.1.1 Real-timePCR检测各组小鼠结肠组织中HIF-1αmRNA的表达 | 第52-53页 |
3.1.2 用免疫组化方法检测各组小鼠结肠组织HIF-1α蛋白的分布与表达 | 第53-54页 |
3.1.3 用Westernblotting方法检测各组结肠组织HIF-1α的表达 | 第54-55页 |
3.2 Real-timePCR、免疫组化、Westernblot检测各组小鼠结肠组织中E-cadherin的表达 | 第55-58页 |
3.2.1 Real-timePCR检测各组小鼠结肠组织中E-cadherin的表达 | 第55页 |
3.2.2 用免疫组化方法检测各组小鼠结肠组织E-cadherin蛋白的分布与表达 | 第55-57页 |
3.2.3 用Westernblot方法检测各组小鼠结肠组织E-cadherin蛋白的表达 | 第57-58页 |
3.3 Real-timePCR、免疫组化、Westernblot检测各组小鼠结肠组织中vimentin的表达 | 第58-61页 |
3.3.1 Real-timePCR检测各组小鼠结肠组织中vimentin的表达 | 第58-59页 |
3.3.2 用免疫组化方法检测各组小鼠结肠组织 vimentin 蛋白的分布与表达 | 第59-60页 |
3.3.3 用Westernblot方法检测各组小鼠结肠组织vimentin蛋白的表达 | 第60-61页 |
3.4 Real-timePCR、免疫组化、Westernblot检测各组小鼠结肠组织中HIF-2α的表达 | 第61-64页 |
3.4.1 Real-timePCR检测各组小鼠结肠组织中HIF-2α的表达 | 第61-62页 |
3.4.2 用免疫组化方法检测各组小鼠结肠组织HIF-2α蛋白的分布与表达 | 第62-64页 |
3.4.3 Westernblot检测各组小鼠结肠组织中HIF-2α的表达 | 第64页 |
3.5 免疫组化、Westernblot检测各组小鼠结肠组织中VEGF的表达 | 第64-67页 |
3.5.1 免疫组化检测各组小鼠结肠组织中VEGF的表达与分布 | 第64-66页 |
3.5.2 Westernblot检测各组小鼠结肠组织中VEGF的表达 | 第66-67页 |
3.6 Westernblot检测各组小鼠结肠组织中IL-6的表达 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
本研究创新性的自我评价 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-80页 |
综述 | 第80-89页 |
参考文献 | 第85-89页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
个人简历 | 第91页 |