摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 前言 | 第7-19页 |
1.1 干扰素系统概述 | 第7-10页 |
1.1.1 干扰素的发现 | 第7页 |
1.1.2 干扰素的分类 | 第7-8页 |
1.1.3 干扰素的产生机制及其介导的抗病毒免疫过程 | 第8-10页 |
1.2 脊椎动物干扰素调节因子家族 | 第10-16页 |
1.2.1 IRF-1亚家族分子的结构与功能 | 第11-12页 |
1.2.2 IRF-3亚家族分子的结构与功能 | 第12-13页 |
1.2.3 IRF-4亚家族分子的结构与功能 | 第13-15页 |
1.2.4 IRF-5亚家族分子的结构与功能 | 第15-16页 |
1.3 无脊椎动物干扰素调节因子 | 第16-17页 |
1.4 本研究的主要目的及意义 | 第17-19页 |
1.4.1 研究意义 | 第17-19页 |
2 实验材料与方法 | 第19-35页 |
2.1 实验材料 | 第19-24页 |
2.1.1 实验用动物及相关菌株、细胞株 | 第19页 |
2.1.2 实验用试剂及仪器 | 第19-21页 |
2.1.3 实验用引物的主要信息 | 第21-22页 |
2.1.4 实验用序列信息 | 第22-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-34页 |
2.2.1 长牡蛎免疫刺激及样品收集 | 第24页 |
2.2.2 长牡蛎总RNA的提取及cDNA文库的构建 | 第24-25页 |
2.2.3 基因克隆及序列分析 | 第25-27页 |
2.2.4 重组蛋白原核表达及纯化 | 第27-29页 |
2.2.5 多克隆抗体的制备及western blot分析 | 第29-30页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR | 第30页 |
2.2.7 血淋巴细胞免疫荧光组化 | 第30-31页 |
2.2.8 EMSA实验 | 第31-32页 |
2.2.9 双荧光素酶报告基因实验 | 第32-34页 |
2.3 数据处理 | 第34-35页 |
3 实验结果 | 第35-47页 |
3.1 长牡蛎CgIRF-1和CgIRF-8分子结构和进化特征 | 第35-39页 |
3.2 长牡蛎CgIRF-1和CgIRF-8家族重组蛋白及其多克隆抗体 | 第39-40页 |
3.3 长牡蛎IRFs家族基因的组织分布及亚细胞定位 | 第40-42页 |
3.4 Poly(I:C)刺激后长牡蛎血淋巴细胞中CgIRF-1基因的mRNA时序表达 | 第42-43页 |
3.5 CgIRF-1与ISRE的结合活性 | 第43-44页 |
3.6 CgIRF-1和CgIRF-8对CgIFNLP的转录调节活性 | 第44-47页 |
4 分析与讨论 | 第47-51页 |
4.1 CgIRFs分子具有结构的保守性 | 第47-48页 |
4.2 CgIRFs在各个组织中呈组成型表达 | 第48页 |
4.3 CgIRF-1参与对poly(I:C)刺激的免疫应答 | 第48页 |
4.4 CgIRF-1具有结合经典DNA基序ISRE的活性 | 第48-49页 |
4.5 CgIRFs对IFN系统具有调节活性 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
攻读硕士期间取得的学术成果 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |