| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1.1 玉米简介及其重要性 | 第14页 |
| 1.2 玉米胚乳的发育 | 第14-25页 |
| 1.2.1 玉米糊粉层(Aleurone,AL)的发育 | 第15-17页 |
| 1.2.2 玉米基部胚乳传递层(Basal Endosperm Transfer Layer,BETL)的发育 | 第17-19页 |
| 1.2.3 玉米胚周区(Embryo Surrounding Region,ESR)的发育 | 第19-20页 |
| 1.2.4 玉米淀粉胚乳(Starchy Endosperm,SE)的发育 | 第20-25页 |
| 1.3 冷胁迫对籽粒发育的影响 | 第25-26页 |
| 1.4 bHLH蛋白家族介绍 | 第26-27页 |
| 1.5 立题意义 | 第27-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-43页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 菌种和载体 | 第28页 |
| 2.1.3 试剂 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-43页 |
| 2.2.1 透射电镜的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.2 未成熟籽粒石蜡切片的制作与染色观察 | 第31-32页 |
| 2.2.3 总淀粉含量测定 | 第32页 |
| 2.2.4 总蛋白、醇溶蛋白和非醇溶蛋白的抽提及定量 | 第32-33页 |
| 2.2.5 油脂含量测定 | 第33-34页 |
| 2.2.6 氨基酸分析 | 第34页 |
| 2.2.7 玉米籽粒总RNA抽提 | 第34-35页 |
| 2.2.8 RT-PCR | 第35页 |
| 2.2.9 Immunoblot | 第35-36页 |
| 2.2.10 免疫荧光 | 第36-37页 |
| 2.2.11 基因枪法瞬时转化洋葱表皮细胞 | 第37页 |
| 2.2.12 玉米籽粒细胞核与细胞质的分离 | 第37-38页 |
| 2.2.13 在酵母系统中检测转录激活能力 | 第38页 |
| 2.2.14 ChIP实验 | 第38-41页 |
| 2.2.15 农杆菌侵染烟草 | 第41页 |
| 2.2.16 双荧光转录激活实验测试 | 第41页 |
| 2.2.17 GC-MS检测糖代谢产物含量 | 第41-42页 |
| 2.2.18 半分子荧光实验验证蛋白互作 | 第42-43页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第43-72页 |
| 3.1 前期工作总结 | 第43-46页 |
| 3.2 osk突变体籽粒细胞学及生化成分分析 | 第46-48页 |
| 3.2.1 osk突变体籽粒细胞学分析 | 第46-47页 |
| 3.2.2 osk突变体籽粒生化成分分析 | 第47-48页 |
| 3.3 OSK候选基因的确认 | 第48-49页 |
| 3.4 OSK候选基因验证 | 第49-51页 |
| 3.4.1 OSK候选基因的功能互补测试 | 第49-50页 |
| 3.4.2 CRISPR-Cas9技术获得等位突变体进行等位测试 | 第50-51页 |
| 3.5 OSK抗体检测 | 第51-52页 |
| 3.6 OSK蛋白的进化树分析 | 第52-53页 |
| 3.7 OSK的时空表达分析 | 第53-54页 |
| 3.8 免疫荧光实验分析OSK蛋白的组织定位 | 第54-55页 |
| 3.9 OSK蛋白的亚细胞定位及组分分离 | 第55-56页 |
| 3.10 OSK蛋白转录激活能力检测 | 第56-57页 |
| 3.11 osk转录组分析 | 第57-58页 |
| 3.11.1 osk转录组的可靠性验证 | 第57页 |
| 3.11.2 osk转录组GO聚类分析 | 第57-58页 |
| 3.12 染色质免疫共沉淀关联高通量测序(ChlP-Seq)检测OSK体内结合靶标 | 第58-63页 |
| 3.12.1 OSK ChIP-Seq的IP效果检测 | 第58-59页 |
| 3.12.2 OSK ChIP-Seq可靠性验证 | 第59-60页 |
| 3.12.3 OSK ChIP-Seq基因组结合位点分析 | 第60-61页 |
| 3.12.4 OSK结合motif计算及其验证 | 第61-63页 |
| 3.12.5 OSK可能直接调控的靶标 | 第63页 |
| 3.13 OSK直接调控碳水化合物代谢相关基因 | 第63-65页 |
| 3.14 OSK直接调控冷响应基因的转录 | 第65-66页 |
| 3.15 OSK调控ESR特异表达基因 | 第66-67页 |
| 3.16 OSK直接调控大量转录因子 | 第67-69页 |
| 3.17 OSK与O2的共同调控关系 | 第69-72页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第72-76页 |
| 4.1 OSK编码一个胚乳特异的bHLH转录因子 | 第72页 |
| 4.2 OSK结合G-box motif且同时具有激活和抑制能力 | 第72-73页 |
| 4.3 OSK是调控碳氮代谢的关键转录因子 | 第73-74页 |
| 4.4 OSK调控ESR发育和胁迫应答 | 第74页 |
| 4.5 OSK调控大量关键转录因子 | 第74-76页 |
| 附件 | 第76-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 作者在攻读学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
