| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 胃癌研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.1 胃癌的概述 | 第15-16页 |
| 1.1.2 与胃癌相关信号通路的研究 | 第16-17页 |
| 1.2 MicroRNA相关研究 | 第17-21页 |
| 1.2.1 MicroRNA概述 | 第17-19页 |
| 1.2.2 MicroRNA在胃癌中的作用 | 第19-21页 |
| 1.2.3 MiR-149与肿瘤的研究 | 第21页 |
| 1.3 PHLPP的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.3.1 PHLPP的概述 | 第22页 |
| 1.3.2 MicroRNA对PHLPP2的调控 | 第22-23页 |
| 1.3.3 PHLPP2在肿瘤中的研究 | 第23页 |
| 1.4 MicroRNA与GPCR的关系 | 第23-27页 |
| 第二章 MiR-149对胃癌细胞SGC7901增殖迁移的研究 | 第27-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第27页 |
| 2.1.2 试剂及配制 | 第27-28页 |
| 2.1.3 仪器及耗材 | 第28-29页 |
| 2.2 实验步骤 | 第29-35页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2.2 细胞的复苏 | 第29-30页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第30页 |
| 2.2.4 细胞培养与传代 | 第30页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第30-31页 |
| 2.2.6 细胞中microRNA的提取 | 第31页 |
| 2.2.7 cDNA的合成 | 第31-32页 |
| 2.2.8 microRNA的定量分析 | 第32页 |
| 2.2.9 细胞中RNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.10 cDNA的合成 | 第33页 |
| 2.2.11 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 2.2.12 MTT实验 | 第34页 |
| 2.2.13 细胞增殖实验 | 第34-35页 |
| 2.2.14 细胞划痕实验 | 第35页 |
| 2.2.15 细胞迁移实验 | 第35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-43页 |
| 2.3.1 胃癌细胞SGC7901中miR-149的表达量 | 第35-36页 |
| 2.3.2 过表达miR-149检测目的基因的表达 | 第36-37页 |
| 2.3.3 MiR-149对胃癌细胞增殖的影响 | 第37-40页 |
| 2.3.4 MiR-149对胃癌细胞迁移的影响 | 第40-43页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 MiR-149在胃癌细胞中靶向调控PHLPP2 | 第45-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第45页 |
| 3.1.2 试剂及配制 | 第45-46页 |
| 3.1.3 仪器及耗材 | 第46页 |
| 3.2 实验步骤 | 第46-51页 |
| 3.2.1 重组质粒的构建 | 第46-49页 |
| 3.2.2 质粒突变 | 第49-51页 |
| 3.2.3 双荧光素酶报告实验 | 第51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-53页 |
| 3.3.1 MiR-149靶基因的预测 | 第51-52页 |
| 3.3.2 报告基因载体质粒的制备 | 第52页 |
| 3.3.3 质粒突变 | 第52页 |
| 3.3.4 双荧光素酶报告实验 | 第52-53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 MiR-149对胃癌细胞内Akt磷酸化活性的影响 | 第55-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 实验细胞 | 第55页 |
| 4.1.2 试剂及配制 | 第55-56页 |
| 4.1.3 仪器及耗材 | 第56页 |
| 4.2 实验步骤 | 第56-60页 |
| 4.2.1 细胞中蛋白的提取 | 第56-57页 |
| 4.2.2 测定蛋白浓度 | 第57-60页 |
| 4.3 实验结果 | 第60-64页 |
| 4.3.1 MiR-149促进Akt的磷酸化 | 第60-62页 |
| 4.3.2 MiR-149促进TNF-α诱导的Akt磷酸化活化 | 第62-63页 |
| 4.3.3 MiR-149能够促进被LY294002抑制的Akt磷酸化活化 | 第63-64页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 作者及导师简介 | 第77-79页 |
| 附件 | 第79-80页 |
