| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| 1 HSV-1简介 | 第10-14页 |
| 1.1 HSV-1生物学性状 | 第10-11页 |
| 1.2 HSV-1的致病性 | 第11-14页 |
| 1.2.1 原发感染 | 第11-12页 |
| 1.2.2 潜伏感染与复发 | 第12-14页 |
| 2 天然淋巴细胞 | 第14-18页 |
| 2.1 天然淋巴细胞的发育 | 第14-16页 |
| 2.2 天然淋巴细胞的功能 | 第16-17页 |
| 2.3 天然淋巴细胞与其他类型免疫细胞的相关性 | 第17-18页 |
| 3 呼吸道上皮组织及粘膜屏障系统 | 第18-19页 |
| 4 本课题研究的意义、目的和基本策略 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-43页 |
| 1 材料和方法 | 第21-43页 |
| 1.1 材料 | 第21-29页 |
| 1.1.1 病毒 | 第21页 |
| 1.1.2 实验用动物 | 第21页 |
| 1.1.3 实验用细胞 | 第21页 |
| 1.1.4 引物 | 第21-24页 |
| 1.1.5 主要试剂 | 第24-26页 |
| 1.1.6 主要耗材 | 第26-27页 |
| 1.1.7 主要仪器 | 第27页 |
| 1.1.8 试剂的配制 | 第27-29页 |
| 1.1.8.1 病毒稀释液 | 第27页 |
| 1.1.8.2 MEM完全培养基 | 第27-28页 |
| 1.1.8.3 细胞冻存液 | 第28页 |
| 1.1.8.4 胰蛋白酶溶液 | 第28页 |
| 1.1.8.5 抗菌素溶液 | 第28页 |
| 1.1.8.6 LB液体培养基 | 第28页 |
| 1.1.8.7 LB固体培养基 | 第28页 |
| 1.1.8.8 PBS缓冲液 | 第28页 |
| 1.1.8.9 10%中性福尔马林固定液 | 第28-29页 |
| 1.2 方法 | 第29-43页 |
| 1.2.1 细胞复苏、传代培养与冻存 | 第29页 |
| 1.2.1.1 细胞复苏 | 第29页 |
| 1.2.1.2 细胞传代培养 | 第29页 |
| 1.2.1.3 细胞冻存 | 第29页 |
| 1.2.2 病毒培养 | 第29-30页 |
| 1.2.3 病毒滴度测定 | 第30-31页 |
| 1.2.4 Q-PCR检测16HBE细胞中TNFR超家族成员及与ILCs激活相关信号分子的 | 第31-32页 |
| 1.2.4.1 16HBE细胞总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 1.2.4.2 检测16HBE细胞中TNFR超家族成员及与ILCs激活相关信号分子的基因水平表达 | 第32页 |
| 1.2.5 HSV-I病毒对小鼠的急性感染能力及致病性分析 | 第32-35页 |
| 1.2.5.1 急性感染动物模型的建立 | 第32-33页 |
| 1.2.5.2 临床观察 | 第33页 |
| 1.2.5.3 组织取材 | 第33页 |
| 1.2.5.4 组织中病毒DNA/RNA的提取 | 第33-34页 |
| 1.2.5.5 小鼠组织中的HSV-1病毒载量分析 | 第34页 |
| 1.2.5.6 组织病理学分析 | 第34-35页 |
| 1.2.6 免疫组织化学检测HSV-1感染小鼠后急性发病期呼吸道上皮组织中TNF-α、IFN-γ的分泌 | 第35-36页 |
| 1.2.7 Q-PCR检测HSV-1感染小鼠后急性发病期呼吸道上皮组织中ILCls、ILC2s、ILC3s相关的信号分子基因表达 | 第36-37页 |
| 1.2.7.1 小鼠呼吸道上皮组织总RNA的提取 | 第36-37页 |
| 1.2.7.2 Q-PCR检测ILCls、ILC2s、ILC3s相关信号分子的基因水平表达 | 第37页 |
| 1.2.8 免疫荧光技术检测HSV-1病毒感染小鼠后急性发病期呼吸道上皮组织中ILCls、ILC2s、ILC3s | 第37-38页 |
| 1.2.9 利用FACS技术从小鼠组织中分选出ILCs及T细胞 | 第38-42页 |
| 1.2.9.1 从小鼠的肺组织分选Lin~-CD45~+ILCs | 第38-39页 |
| 1.2.9.2 从脾组织中分选出CD3~+T细胞 | 第39-40页 |
| 1.2.9.3 体外条件下模拟ILCs在HSV-1诱导特异性T细胞免疫过程中所起的作用 | 第40-42页 |
| 1.2.10 统计方法 | 第42-43页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第43-62页 |
| 1 结果分析 | 第43-57页 |
| 1.1 HSV-1病毒对人支气管上皮细胞16HBE的感染特征 | 第43-44页 |
| 1.2 小鼠HSV-1病毒感染后急性发病期组织中病毒载量分析 | 第44-46页 |
| 1.3 小鼠在HSV-1病毒感染后急性发病期呼吸道上皮组织中的病理学变化。 | 第46-47页 |
| 1.4 小鼠在HSV-1病毒感染后急性发病期呼吸道上皮组织TNF-α、IFN-y细胞因子分泌及基因表达水平分析 | 第47-50页 |
| 1.5 小鼠感染HSV-1病毒后1-8天呼吸道上皮组织中与ILCs激活相关的细胞因子基因表达水平分析 | 第50-52页 |
| 1.6 小鼠感染HSV-1病毒后呼吸道上皮组织中与ILCs发挥效应功能相关的细胞因子基因表达水平分析 | 第52-53页 |
| 1.7 免疫荧光检测小鼠呼吸道粘膜组织中HSV-1病毒与ILCs的分布 | 第53-54页 |
| 1.8 HSV-1病毒在ILCs中的增殖及其对免疫学功能的影响 | 第54-57页 |
| 2 讨论 | 第57-62页 |
| 全文总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 研究生个人简历 | 第70-72页 |
