| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 缩略词表 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-35页 |
| 1 红细胞免疫功能的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.1 红细胞的免疫学功能 | 第20-22页 |
| 1.1.1 对细菌的清除作用 | 第20-21页 |
| 1.1.2 清除循环免疫复合物 | 第21页 |
| 1.1.3 抗原的识别、递呈作用 | 第21页 |
| 1.1.4 免疫佐剂效应 | 第21-22页 |
| 1.1.5 促进巨噬细胞的吞噬功能 | 第22页 |
| 1.2 红细胞的免疫调控功能 | 第22-23页 |
| 1.1.1 红细胞对巨噬细胞的调控作用 | 第22-23页 |
| 1.1.2 红细胞对淋巴细胞的调控作用 | 第23页 |
| 1.1.3 红细胞对细胞因子及补体活性的调控作用 | 第23页 |
| 2 血红蛋白的研究进展 | 第23-28页 |
| 2.1 血红蛋白的发生 | 第23-24页 |
| 2.2 血红蛋白的免疫学功能 | 第24-26页 |
| 2.2.1 血红蛋白的抗菌活性 | 第24-25页 |
| 2.2.2 血红蛋白介导的氧化应激 | 第25-26页 |
| 2.3 溶血对机体的损伤与清除 | 第26-28页 |
| 2.3.1 溶血对机体的损伤 | 第26页 |
| 2.3.2 血红蛋白的清除 | 第26-28页 |
| 3 血蓝蛋白的研究进展 | 第28-34页 |
| 3.1 血蓝蛋白的类型 | 第29页 |
| 3.2 血蓝蛋白的基本性质 | 第29-31页 |
| 3.3 血蓝蛋白的PO活性 | 第31-33页 |
| 3.4 血蓝蛋白的抗菌活性 | 第33-34页 |
| 4 转录组测序的应用 | 第34页 |
| 5 研究目的与意义 | 第34-35页 |
| 第二章 草鱼红细胞对细菌的粘附及吞噬活性研究 | 第35-44页 |
| 1 前言 | 第35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 试验鱼及细菌 | 第35页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 2.2 试验方法 | 第36-37页 |
| 2.2.1 红细胞的分离纯化 | 第36页 |
| 2.2.2 瑞士吉姆萨染色 | 第36页 |
| 2.2.3 细菌的荧光标记及乳胶微球的准备 | 第36页 |
| 2.2.4 粘附实验 | 第36-37页 |
| 2.2.5 吞噬实验 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| 3.1 红细胞的吉姆萨染色 | 第37-38页 |
| 3.2 红细胞的粘附作用 | 第38-40页 |
| 3.2.1 红细胞对乳胶微球的粘附作用 | 第38页 |
| 3.2.2 红细胞对细菌的粘附作用 | 第38-40页 |
| 3.3 红细胞的对细菌的吞噬作用 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 草鱼红细胞通过血红蛋白释放ROS杀伤细菌 | 第44-61页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-49页 |
| 2.1 试验材料 | 第44-45页 |
| 2.1.1 试验对象 | 第44页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 2.2 试验方法 | 第45-49页 |
| 2.2.1 溶血试验 | 第45页 |
| 2.2.2 抗菌活性试验 | 第45页 |
| 2.2.3 ROS及高铁血红蛋白的测定 | 第45页 |
| 2.2.4 p40phox的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR检测红细胞NADPH酶的转录水平 | 第46页 |
| 2.2.6 血红蛋白的分离纯化 | 第46页 |
| 2.2.7 血红蛋白的自氧化过程 | 第46-47页 |
| 2.2.8 细菌蛋白酶促进血红蛋白释放ROS | 第47页 |
| 2.2.9 血红蛋白的抗菌活性研究 | 第47-49页 |
| 3 结果 | 第49-58页 |
| 3.1 细菌引起草鱼红细胞溶血并产生ROS | 第49-51页 |
| 3.2 NADPH酶对草鱼红细胞ROS的调控作用 | 第51-52页 |
| 3.3 草鱼血红蛋白的自氧化过程 | 第52-53页 |
| 3.4 细菌来源的蛋白酶促进血红蛋白的水解并释放ROS | 第53-56页 |
| 3.5 细菌促进血红蛋白释放ROS | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 5 小结 | 第60-61页 |
| 第四章 血红蛋白引起组织病理变化及促进巨噬细胞细胞凋亡的研究 | 第61-91页 |
| 1 前言 | 第61-62页 |
| 2 材料与方法 | 第62-73页 |
| 2.1 试验材料 | 第62页 |
| 2.2 试验方法 | 第62-73页 |
| 2.2.1 草鱼感染试验 | 第62页 |
| 2.2.2 草鱼血清酶活测定 | 第62-64页 |
| 2.2.3 组织病理学检测 | 第64-66页 |
| 2.2.4 细胞因子相关基因qRT-PCR检测 | 第66-67页 |
| 2.2.5 头肾组织蛋白提取 | 第67页 |
| 2.2.6 草鱼头肾巨噬细胞的分离 | 第67-68页 |
| 2.2.7 血红蛋白刺激头肾巨噬细胞后的普鲁士蓝染色 | 第68页 |
| 2.2.8 血红蛋白刺激头肾巨噬细胞后的间接免疫荧光检测 | 第68页 |
| 2.2.9 血红蛋白刺激头肾巨噬细胞后的免疫印迹检测 | 第68页 |
| 2.2.10 H2DCFDA法血红蛋白刺激头肾巨噬细胞后胞内的ROS测定 | 第68-69页 |
| 2.2.11 血红蛋白刺激头肾巨噬细胞后细胞凋亡检测 | 第69页 |
| 2.2.12 头肾巨噬细胞膜蛋白及质蛋白提取 | 第69-70页 |
| 2.2.13 血红蛋白与血清及巨噬细胞蛋白的co-IP实验 | 第70-71页 |
| 2.2.14 血红蛋白刺激巨噬细胞后转录组分析 | 第71页 |
| 2.2.15 血红蛋白刺激巨噬细胞相关细胞因子qRT-PCR检测 | 第71-73页 |
| 3 结果 | 第73-88页 |
| 3.1 红细胞和血红蛋白激活血清抗氧化剂的活性 | 第73-74页 |
| 3.2 红细胞和血红蛋白对头肾组织的损伤 | 第74页 |
| 3.3 头肾巨噬细胞参与血红蛋白的清除过程 | 第74-77页 |
| 3.4 红细胞和血红蛋白对中肾组织的损伤 | 第77-78页 |
| 3.5 血红蛋白促进头肾巨噬细胞释放ROS | 第78-80页 |
| 3.6 血红蛋白促进头肾巨噬细胞细胞凋亡 | 第80-84页 |
| 3.7 血红蛋白促进头肾巨噬细胞释放细胞因子 | 第84-85页 |
| 3.8 血红蛋白刺激头肾巨噬细胞后的转录组分析 | 第85-88页 |
| 4 讨论 | 第88-90页 |
| 5 小结 | 第90-91页 |
| 第五章 克氏原螯虾血蓝蛋白抗菌活性的研究 | 第91-108页 |
| 1 前言 | 第91-92页 |
| 2 材料与方法 | 第92-96页 |
| 2.1 试验材料 | 第92页 |
| 2.1.1 试验对象 | 第92页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第92页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第92页 |
| 2.2 试验方法 | 第92-96页 |
| 2.2.1 血蓝蛋白分离纯化 | 第92-93页 |
| 2.2.2 细菌感染及样品采集 | 第93页 |
| 2.2.3 RNA提取 | 第93页 |
| 2.2.4 血蓝蛋白结构域的重组表达 | 第93页 |
| 2.2.5 组织分布及表达模式 | 第93-94页 |
| 2.2.6 细菌结合实验 | 第94页 |
| 2.2.7 多糖结合实验 | 第94页 |
| 2.2.8 细菌凝集实验 | 第94页 |
| 2.2.9 抑菌实验 | 第94-95页 |
| 2.2.10 PO活性检测 | 第95页 |
| 2.2.11 吞噬实验 | 第95-96页 |
| 3 结果 | 第96-105页 |
| 3.1 PO活性检测 | 第96-97页 |
| 3.2 PCHMC1组织分布及表达模式 | 第97-98页 |
| 3.3 重组PCHMC1结构域表达纯化 | 第98-100页 |
| 3.4 天然PCHMC1及其结构域细菌结合作用 | 第100-101页 |
| 3.5 天然PCHMC1及其结构域细菌凝集作用 | 第101-102页 |
| 3.6 天然PCHMC1及其结构域抗菌及PO活性 | 第102-103页 |
| 3.7 体外吞噬实验 | 第103-105页 |
| 4 讨论 | 第105-107页 |
| 5 小结 | 第107-108页 |
| 第六章 副溶血弧菌感染南美白对虾的转录组分析及免疫相关基因的研究 | 第108-126页 |
| 1 前言 | 第108-109页 |
| 2 材料与方法 | 第109-110页 |
| 2.1 试验材料 | 第109页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第109页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第109页 |
| 2.2 试验方法 | 第109-110页 |
| 2.2.1 实验处理与样品采集 | 第109页 |
| 2.2.2 血细胞的转录组分析 | 第109页 |
| 2.2.3 差异基因的qRT-PCR验证 | 第109-110页 |
| 2.2.4 筛选基因的组织分布和表达模式 | 第110页 |
| 2.2.5 干扰后的细菌清除实验 | 第110页 |
| 3 结果 | 第110-123页 |
| 3.1 测序及注释 | 第110-114页 |
| 3.2 功能注释 | 第114-116页 |
| 3.3 差异基因分析 | 第116-119页 |
| 3.4 差异基因的QRT-PCR验证 | 第119-120页 |
| 3.5 选择基因的组织分布和表达模式 | 第120页 |
| 3.6 选择基因的干扰及细菌清除实验 | 第120-123页 |
| 4 讨论 | 第123-125页 |
| 5 小结 | 第125-126页 |
| 全文总结与展望 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-150页 |
| 附录 | 第150-153页 |
| 个人简历 | 第153-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
