摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表(Abbreviations) | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-15页 |
1.1 研究问题的由来 | 第9页 |
1.2 文献综述 | 第9-14页 |
1.2.1 鞘脂的结构 | 第9-12页 |
1.2.2 植物中鞘脂的作用及其研究现状 | 第12-14页 |
1.2.3 植物中磷酸化的鞘脂研究现状 | 第14页 |
1.3 研究目的及意义 | 第14-15页 |
2 实验材料与方法 | 第15-22页 |
2.1 实验材料 | 第15-16页 |
2.1.1 植物材料 | 第15页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第15页 |
2.1.3 主要分子生物学试剂 | 第15-16页 |
2.1.4 实验常用仪器 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-22页 |
2.2.1 油菜不同组织部位鞘脂的组成和含量 | 第16-17页 |
2.2.2 油菜中鞘脂的组成和含量响应环境胁迫的分析 | 第17页 |
2.2.3 植物材料总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.2.4 油菜鞘脂合成代谢途径相关酶基因的RealtimePCR定量分析 | 第18页 |
2.2.5 外源加入鞘脂对油菜幼苗生长发育的影响 | 第18页 |
2.2.6 目的基因序列查找选择及引物设计 | 第18-19页 |
2.2.7 目的基因克隆 | 第19页 |
2.2.8 过表达载体构建 | 第19-20页 |
2.2.9 CRISPR载体构建(pHSE401-2gR) | 第20-21页 |
2.2.10电击法转化表达载体到农杆菌GV3101 | 第21页 |
2.2.11 油菜遗传转化及含目的基因的过表达和突变体植株检测 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-42页 |
3.1 油菜不同组织部位鞘脂组成及含量分析 | 第22-23页 |
3.2 油菜中鞘脂组成和含量响应逆境胁迫的变化 | 第23-29页 |
3.3 油菜各组织部位及响应环境胁迫的鞘脂基因的表达量分析 | 第29-30页 |
3.4 油菜叶片中鞘脂相关基因real-timePCR定量分析 | 第30-33页 |
3.5 外源加入鞘脂对油菜种子萌发及幼苗生长的影响 | 第33-36页 |
3.6 油菜中SPL和SPP的基因功能研究 | 第36-42页 |
3.6.1 SPL的生物信息学分析 | 第36-37页 |
3.6.2 SPP的生物信息学分析 | 第37-38页 |
3.6.3 SPL和SPP载体构建 | 第38-39页 |
3.6.3.1 过表达载体构建 | 第38-39页 |
3.6.3.2 CRISPR/Cas9表达载体构建 | 第39页 |
3.6.4 表达载体遗传转化检测 | 第39-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
4.1 油菜鞘脂对油菜生长发育的调控作用 | 第42页 |
4.2 油菜鞘脂响应非生物逆境胁迫 | 第42-43页 |
4.3 油菜鞘脂研究展望 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录1 | 第48-55页 |
附录2 | 第55-58页 |
致谢 | 第58页 |