| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-32页 |
| 1 昆虫变态发育的激素调节 | 第16-23页 |
| 1.1 昆虫的变态发育 | 第16页 |
| 1.2 蜕皮激素和保幼激素对昆虫变态发育的调控 | 第16-17页 |
| 1.3 蜕皮激素和保幼激素合成和分解的核心通路 | 第17-20页 |
| 1.4 蜕皮激素和保幼激素作用的分子机制和互作 | 第20-23页 |
| 2 microRNA在昆虫变态发育中的功能研究 | 第23-26页 |
| 2.1 microRNA的特性 | 第23-24页 |
| 2.2 microRNA在昆虫变态发育中的研究 | 第24-26页 |
| 3 mRNA和miRNA对昆虫变态发育的网络调控 | 第26页 |
| 4 昆虫化蛹和羽化的调控机制 | 第26-29页 |
| 4.1 昆虫的化蛹 | 第26-27页 |
| 4.2 昆虫蛹期的发育 | 第27-28页 |
| 4.3 昆虫的羽化 | 第28-29页 |
| 5 二化螟 | 第29-30页 |
| 6 本文研究目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 二化螟蛋白编码基因在蛹期发育中的表达分析 | 第32-50页 |
| 1 引言 | 第32-33页 |
| 2 材料和方法 | 第33-38页 |
| 2.1 二化螟 | 第33页 |
| 2.2 试虫准备 | 第33页 |
| 2.3 主要仪器设备与试剂 | 第33-34页 |
| 2.4 NimbleGen基因芯片 | 第34-36页 |
| 2.5 RT-PCR和qRT-PCR | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-48页 |
| 3.1 基因芯片 | 第38-39页 |
| 3.2 定量PCR验证 | 第39-41页 |
| 3.3 不同发育时期差异表达基因的的六种模式 | 第41-43页 |
| 3.4 不同发育时期差异表达的基因 | 第43-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 6个不同时期差异高表达基因的功能分析 | 第50-68页 |
| 1 引言 | 第50-51页 |
| 2 材料和方法 | 第51-53页 |
| 2.1 二化螟 | 第51页 |
| 2.2 试虫准备 | 第51页 |
| 2.3 主要仪器设备与试剂 | 第51页 |
| 2.4 siRNA设计 | 第51-52页 |
| 2.5 RNA干扰 | 第52页 |
| 2.6 总RNA提取 | 第52页 |
| 2.7 cDNA第一链合成 | 第52页 |
| 2.8 qPCR | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-65页 |
| 3.1 六种模式的差异高表达基因 | 第53-62页 |
| 3.2 溶质载体家族基因广泛地参与化蛹和羽化的调控 | 第62-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 4.1 SLC22A1参与蛹表皮形成 | 第65-66页 |
| 4.2 RNAi干扰效果 | 第66-68页 |
| 第四章 二化螟microRNA基因的发现和分析 | 第68-76页 |
| 1 引言 | 第68-69页 |
| 2 材料和方法 | 第69-71页 |
| 2.1 二化螟 | 第69页 |
| 2.2 试虫准备 | 第69页 |
| 2.3 主要仪器设备与试剂 | 第69页 |
| 2.4 总RNA提取 | 第69页 |
| 2.5 小RNA文库构建 | 第69-70页 |
| 2.6 小RNA生物信息分析 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-74页 |
| 3.1 小RNA文库概览 | 第71-72页 |
| 3.2 小RNA长度分析 | 第72页 |
| 3.3 小RNA的注释 | 第72-73页 |
| 3.4 二化螟microRNA的发现 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 二化螟miRNA基因在化蛹和蛹期发育中的表达谱分析 | 第76-90页 |
| 1 引言 | 第76-77页 |
| 2 材料和方法 | 第77-80页 |
| 2.1 二化螟 | 第77页 |
| 2.2 试虫准备 | 第77页 |
| 2.3 主要仪器设备与试剂 | 第77页 |
| 2.4 μParaflo~(TM)基因芯片 | 第77-78页 |
| 2.5 差异表达csu-miRNA的靶标预测和功能富集分析 | 第78-79页 |
| 2.6 定量PCR验证 | 第79-80页 |
| 3 结果与分析 | 第80-89页 |
| 3.1 小RNA基因芯片表达谱 | 第80页 |
| 3.2 差异表达的csu-miRNA | 第80-82页 |
| 3.3 差异表达csu-miRNA的靶标分析 | 第82-87页 |
| 3.4 定量PCR验证差异表达的csu-miRNA | 第87-89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| 第六章 二化螟csu-miR-277的RNA干扰及功能分析 | 第90-104页 |
| 1 引言 | 第90-91页 |
| 2 材料和方法 | 第91-95页 |
| 2.1 二化螟 | 第91页 |
| 2.2 试虫准备 | 第91页 |
| 2.3 主要仪器设备与试剂 | 第91页 |
| 2.4 miRNA靶标预测和功能富集分析 | 第91页 |
| 2.5 引物和siRNA合成 | 第91-92页 |
| 2.6 总RNA提取 | 第92页 |
| 2.7 cDNA第一链合成 | 第92页 |
| 2.8 RT-PCR | 第92页 |
| 2.9 qRT-PCR | 第92页 |
| 2.10 3'RACE cDNA的合成 | 第92-93页 |
| 2.11 3'RACE PCR | 第93-94页 |
| 2.12 双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第94页 |
| 2.13 重组质粒的提取和检测 | 第94页 |
| 2.14 细胞转染 | 第94页 |
| 2.15 荧光素酶活性的检测 | 第94-95页 |
| 2.16 miRNA mimics和inhibitor注射 | 第95页 |
| 3 结果与分析 | 第95-101页 |
| 3.1 成虫期差异性高表达的csu-miR-277基因干扰和过表达分析 | 第95-99页 |
| 3.2 csu-miR-277的靶标预测和验证 | 第99-100页 |
| 3.3 老熟幼虫时期差异性高表达的miRNA功能分析 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-104页 |
| 第七章 二化螟蛋白编码基因和miRNA的网络调控分析 | 第104-114页 |
| 1 引言 | 第104-105页 |
| 2 材料和方法 | 第105页 |
| 2.1 数据来源 | 第105页 |
| 2.2 方法 | 第105页 |
| 2.3 软件和语言 | 第105页 |
| 3 结果与分析 | 第105-112页 |
| 3.1 正相关的csu-miRNA和MRNA | 第105-108页 |
| 3.2 负相关的csu-miRNA和mRNA | 第108-109页 |
| 3.3 csu-miRNAs与SLC基因的关联性分析 | 第109-112页 |
| 4 讨论 | 第112-114页 |
| 全文总结 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-126页 |
| 附录 | 第126-140页 |
| 攻读博士期间论文发表情况 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
