摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-40页 |
1.1 水稻花器官发育的研究进展 | 第17-24页 |
1.1.1 水稻花器官的结构组成 | 第17-18页 |
1.1.2 水稻花器官发育 | 第18-24页 |
1.1.2.1 拟南芥中花器官发育的ABCDE模型 | 第18-20页 |
1.1.2.2 水稻花分生组织的形成 | 第20页 |
1.1.2.3 水稻花器官发育的ABCDE模型 | 第20-24页 |
1.2 水稻雄性生殖发育 | 第24-38页 |
1.2.1 水稻雄性生殖发育进程 | 第25-26页 |
1.2.1.1 水稻花药的结构 | 第25页 |
1.2.1.2 水稻花药的精细分期 | 第25-26页 |
1.2.2 水稻雄性生殖发育的分子机理 | 第26-36页 |
1.2.2.1 绒毡层发育与雄性不育 | 第26-30页 |
1.2.2.2 减数分裂与雄性不育 | 第30-32页 |
1.2.2.3 花粉壁发育与雄性不育 | 第32-35页 |
1.2.2.4 花药开裂与雄性不育 | 第35-36页 |
1.2.3 其他类型的雄性不育 | 第36-38页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第38-40页 |
第二章 水稻开颖不育突变体ohms1的鉴定及基因定位 | 第40-52页 |
2.1 材料与方法 | 第40-43页 |
2.1.1 试验材料 | 第40页 |
2.1.2 遗传分析及定位群体的构建 | 第40页 |
2.1.3 花粉育性和小穗育性考察 | 第40-41页 |
2.1.4 DNA的提取 | 第41页 |
2.1.5 PCR反应体系及程序 | 第41页 |
2.1.6 精细定位与图位克隆 | 第41页 |
2.1.7 候选基因分析 | 第41-42页 |
2.1.8 三维结构预测 | 第42页 |
2.1.9 RNA提取 | 第42页 |
2.1.10 cDNA反转录 | 第42页 |
2.1.11 花器官发育相关基因的表达分析 | 第42-43页 |
2.2 结果与分析 | 第43-50页 |
2.2.1 突变体的主要表型特征 | 第43页 |
2.2.2 突变体的遗传分析 | 第43-44页 |
2.2.3 ohms1开颖不育基因的精细定位 | 第44-46页 |
2.2.4 候选基因的克隆及序列分析 | 第46-47页 |
2.2.5 野生型和突变体OsMADS1蛋白的三维结构预测 | 第47-48页 |
2.2.6 花器官发育相关基因的表达分析 | 第48页 |
2.2.7 ohms1与02428组配后代出现结实分离 | 第48-49页 |
2.2.8 S5位点的存在对分离群体中开颖单株结实的影响 | 第49-50页 |
2.3 结论与讨论 | 第50-52页 |
第三章 水稻内轮花器官畸形突变体difo1的鉴定及精细定位 | 第52-72页 |
3.1 材料与方法 | 第52-54页 |
3.1.1 试验材料及田间管理 | 第52页 |
3.1.2 花器官表型分析 | 第52-53页 |
3.1.3 半薄切片观察 | 第53页 |
3.1.4 小穗发育的扫描电镜观察 | 第53页 |
3.1.5 开花习性的调查与分析 | 第53页 |
3.1.6 DNA提取与PCR反应 | 第53页 |
3.1.7 遗传分析与基因定位 | 第53-54页 |
3.1.8 RNA提取与cDNA逆转录 | 第54页 |
3.1.9 荧光定量PCR | 第54页 |
3.2 结果与分析 | 第54-68页 |
3.2.1 difo1的主要表型特征 | 第54-59页 |
3.2.2 difo1内轮花器官发育的半薄切片观察 | 第59-61页 |
3.2.3 difo1的幼穗原基发育的扫描电镜观察 | 第61-63页 |
3.2.4 difo1突变体严重影响水稻的开花习性 | 第63-64页 |
3.2.5 difo1位点的遗传分析 | 第64-65页 |
3.2.6 DIFO1基因的精细定位与候选基因预测 | 第65-67页 |
3.2.7 花器官发育相关基因的表达分析 | 第67-68页 |
3.3 结论与讨论 | 第68-72页 |
3.3.1 DIFO1特异调控水稻内轮花器官分生组织属性决定 | 第68-70页 |
3.3.2 DIFO1在水稻小穗发育和生殖发育过程中具有重要作用 | 第70-71页 |
3.3.3 DIFO1的目的基因 | 第71-72页 |
第四章 水稻核雄性不育基因OsSTRS1的图位克隆和功能互补 | 第72-98页 |
4.1 材料与方法 | 第72-76页 |
4.1.1 试验材料及田间管理 | 第72页 |
4.1.2 遗传分析及定位群体的构建 | 第72页 |
4.1.3 育性调查 | 第72页 |
4.1.4 野生型与strs1突变体花药发育的细胞学观察 | 第72-73页 |
4.1.5 DNA提取 | 第73页 |
4.1.6 InDel标记开发与精细定位 | 第73页 |
4.1.7 目标区域基因的功能预测和序列测定 | 第73页 |
4.1.8 转基因功能互补载体构建 | 第73-74页 |
4.1.9 RNAi和Crispr载体构建 | 第74页 |
4.1.10 qRT-PCR与原位杂交 | 第74-75页 |
4.1.11 GUS染色试验 | 第75页 |
4.1.12 亚细胞定位 | 第75-76页 |
4.1.13 生物信息学分析 | 第76页 |
4.1.14 花药角质、蜡质的提取及其含量的测定 | 第76页 |
4.2 结果与分析 | 第76-95页 |
4.2.1 strs1的主要表型特点 | 第76-77页 |
4.2.2 花药发育不同时期的半薄切片观察 | 第77-80页 |
4.2.3 扫描电镜和透射电镜观察 | 第80-83页 |
4.2.4 目的基因的遗传分析与图位克隆 | 第83-85页 |
4.2.5 OsSTRS1全长cDNA的克隆和序列分析 | 第85-86页 |
4.2.6 RNAi完全干涉可以导致花粉败育 | 第86-88页 |
4.2.7 strs1的功能互补验证 | 第88-89页 |
4.2.8 OsSTRS1基因的表达分析 | 第89-90页 |
4.2.9 OsSTRS1蛋白的亚细胞定位 | 第90-91页 |
4.2.10 花药内角质与蜡质含量的测定 | 第91-93页 |
4.2.11 水稻花药发育相关基因的表达分析 | 第93-95页 |
4.3 结论与讨论 | 第95-98页 |
4.3.1 OsSTRS1主要参与调控水稻花药壁和花粉外壁的发育 | 第95页 |
4.3.2 OsSTRS1基因的图位克隆 | 第95-96页 |
4.3.3 STRS1基因功能的研究展望 | 第96-98页 |
4.3.3.1 STRS1基因的可能功能 | 第96页 |
4.3.3.2 STRS1 蛋白的可能互作模式研究思路 | 第96-97页 |
4.3.3.3 STRS1基因在未来杂种优势利用中的应用前景 | 第97-98页 |
第五章 全文结论 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-110页 |
附录 本研究中的部分实验技术和引物信息 | 第110-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录与成果获奖 | 第118-121页 |