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水稻不育突变体ohms1、difo1和strs1的鉴定、基因定位与功能分析

摘要第11-13页
Abstract第13-15页
第一章 文献综述第16-40页
    1.1 水稻花器官发育的研究进展第17-24页
        1.1.1 水稻花器官的结构组成第17-18页
        1.1.2 水稻花器官发育第18-24页
            1.1.2.1 拟南芥中花器官发育的ABCDE模型第18-20页
            1.1.2.2 水稻花分生组织的形成第20页
            1.1.2.3 水稻花器官发育的ABCDE模型第20-24页
    1.2 水稻雄性生殖发育第24-38页
        1.2.1 水稻雄性生殖发育进程第25-26页
            1.2.1.1 水稻花药的结构第25页
            1.2.1.2 水稻花药的精细分期第25-26页
        1.2.2 水稻雄性生殖发育的分子机理第26-36页
            1.2.2.1 绒毡层发育与雄性不育第26-30页
            1.2.2.2 减数分裂与雄性不育第30-32页
            1.2.2.3 花粉壁发育与雄性不育第32-35页
            1.2.2.4 花药开裂与雄性不育第35-36页
        1.2.3 其他类型的雄性不育第36-38页
    1.3 本研究的目的与意义第38-40页
第二章 水稻开颖不育突变体ohms1的鉴定及基因定位第40-52页
    2.1 材料与方法第40-43页
        2.1.1 试验材料第40页
        2.1.2 遗传分析及定位群体的构建第40页
        2.1.3 花粉育性和小穗育性考察第40-41页
        2.1.4 DNA的提取第41页
        2.1.5 PCR反应体系及程序第41页
        2.1.6 精细定位与图位克隆第41页
        2.1.7 候选基因分析第41-42页
        2.1.8 三维结构预测第42页
        2.1.9 RNA提取第42页
        2.1.10 cDNA反转录第42页
        2.1.11 花器官发育相关基因的表达分析第42-43页
    2.2 结果与分析第43-50页
        2.2.1 突变体的主要表型特征第43页
        2.2.2 突变体的遗传分析第43-44页
        2.2.3 ohms1开颖不育基因的精细定位第44-46页
        2.2.4 候选基因的克隆及序列分析第46-47页
        2.2.5 野生型和突变体OsMADS1蛋白的三维结构预测第47-48页
        2.2.6 花器官发育相关基因的表达分析第48页
        2.2.7 ohms1与02428组配后代出现结实分离第48-49页
        2.2.8 S5位点的存在对分离群体中开颖单株结实的影响第49-50页
    2.3 结论与讨论第50-52页
第三章 水稻内轮花器官畸形突变体difo1的鉴定及精细定位第52-72页
    3.1 材料与方法第52-54页
        3.1.1 试验材料及田间管理第52页
        3.1.2 花器官表型分析第52-53页
        3.1.3 半薄切片观察第53页
        3.1.4 小穗发育的扫描电镜观察第53页
        3.1.5 开花习性的调查与分析第53页
        3.1.6 DNA提取与PCR反应第53页
        3.1.7 遗传分析与基因定位第53-54页
        3.1.8 RNA提取与cDNA逆转录第54页
        3.1.9 荧光定量PCR第54页
    3.2 结果与分析第54-68页
        3.2.1 difo1的主要表型特征第54-59页
        3.2.2 difo1内轮花器官发育的半薄切片观察第59-61页
        3.2.3 difo1的幼穗原基发育的扫描电镜观察第61-63页
        3.2.4 difo1突变体严重影响水稻的开花习性第63-64页
        3.2.5 difo1位点的遗传分析第64-65页
        3.2.6 DIFO1基因的精细定位与候选基因预测第65-67页
        3.2.7 花器官发育相关基因的表达分析第67-68页
    3.3 结论与讨论第68-72页
        3.3.1 DIFO1特异调控水稻内轮花器官分生组织属性决定第68-70页
        3.3.2 DIFO1在水稻小穗发育和生殖发育过程中具有重要作用第70-71页
        3.3.3 DIFO1的目的基因第71-72页
第四章 水稻核雄性不育基因OsSTRS1的图位克隆和功能互补第72-98页
    4.1 材料与方法第72-76页
        4.1.1 试验材料及田间管理第72页
        4.1.2 遗传分析及定位群体的构建第72页
        4.1.3 育性调查第72页
        4.1.4 野生型与strs1突变体花药发育的细胞学观察第72-73页
        4.1.5 DNA提取第73页
        4.1.6 InDel标记开发与精细定位第73页
        4.1.7 目标区域基因的功能预测和序列测定第73页
        4.1.8 转基因功能互补载体构建第73-74页
        4.1.9 RNAi和Crispr载体构建第74页
        4.1.10 qRT-PCR与原位杂交第74-75页
        4.1.11 GUS染色试验第75页
        4.1.12 亚细胞定位第75-76页
        4.1.13 生物信息学分析第76页
        4.1.14 花药角质、蜡质的提取及其含量的测定第76页
    4.2 结果与分析第76-95页
        4.2.1 strs1的主要表型特点第76-77页
        4.2.2 花药发育不同时期的半薄切片观察第77-80页
        4.2.3 扫描电镜和透射电镜观察第80-83页
        4.2.4 目的基因的遗传分析与图位克隆第83-85页
        4.2.5 OsSTRS1全长cDNA的克隆和序列分析第85-86页
        4.2.6 RNAi完全干涉可以导致花粉败育第86-88页
        4.2.7 strs1的功能互补验证第88-89页
        4.2.8 OsSTRS1基因的表达分析第89-90页
        4.2.9 OsSTRS1蛋白的亚细胞定位第90-91页
        4.2.10 花药内角质与蜡质含量的测定第91-93页
        4.2.11 水稻花药发育相关基因的表达分析第93-95页
    4.3 结论与讨论第95-98页
        4.3.1 OsSTRS1主要参与调控水稻花药壁和花粉外壁的发育第95页
        4.3.2 OsSTRS1基因的图位克隆第95-96页
        4.3.3 STRS1基因功能的研究展望第96-98页
            4.3.3.1 STRS1基因的可能功能第96页
            4.3.3.2 STRS1 蛋白的可能互作模式研究思路第96-97页
            4.3.3.3 STRS1基因在未来杂种优势利用中的应用前景第97-98页
第五章 全文结论第98-100页
参考文献第100-110页
附录 本研究中的部分实验技术和引物信息第110-116页
致谢第116-118页
攻读学位期间发表的学术论文目录与成果获奖第118-121页

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